中文
Com triar l'amplitud de Shaker correcta?
Quina és l'amplitud d'un agitador?
L’amplitud d’un agitador és el diàmetre del palet en moviment circular, de vegades anomenat “diàmetre d’oscil·lació” o “diàmetre de la pista”: Ø. Radobio ofereix agitadors estàndard amb amplituds de 3mm, 25mm, 26mm i 50mm ,. També hi ha disponibles agitadors personalitzats amb altres mides d’amplitud.
Què és la taxa de transferència d’oxigen (OTR)?
La taxa de transferència d’oxigen (OTR) és l’eficiència de l’oxigen es transfereix de l’atmosfera al líquid. Com més gran sigui el valor OTR significa que més gran sigui l’eficiència de transferència d’oxigen.
Efecte de l'amplitud i la velocitat de rotació
Ambdós factors afecten la barreja del medi en el matràs de cultiu. Com millor sigui la barreja, millor la taxa de transferència d’oxigen (OTR). Seguint aquestes directrius, es pot seleccionar l'amplitud i la velocitat de rotació més adequades.
En general, es pot utilitzar una amplitud de 25 mm o 26 mm com a amplitud universal per a totes les aplicacions de cultura.
Cultius bacterians, llevats i fúngics:
La transferència d’oxigen en matràs de sacsejada és molt menys eficient que en els bioreactors. La transferència d’oxigen pot ser el factor limitant dels cultius de matràs de sacsejades en la majoria dels casos. L’amplitud està relacionada amb la mida dels matràs cònics: els matràs més grans utilitzen amplituds més grans.
Recomanació: amplitud de 25 mm per a matràs cònics de 25ml a 2000ml.
Amplitud de 50 mm per a matràs cònics de 2000 ml a 5000 ml.
Cultiu cel·lular:
* El cultiu de cèl·lules de mamífers té un requeriment d’oxigen relativament baix.
* Per als matràs de Shaker de 250 ml, es pot proporcionar un lliurament d’oxigen suficient en un rang d’amplituds i velocitats relativament àmplia (amplitud de 20-50mm; 100-300rpm).
* Per a matràs de diàmetre més gran (Fernbach Flasks) es recomana una amplitud de 50 mm.
* Si s’utilitzen bosses de cultiu d’un sol ús, es recomana amplitud de 50 mm.
Microtitre i plaques de pou profund:
Per a les plaques de microtitre i de profunditat profunda, hi ha dos mètodes diferents per obtenir la màxima transferència d’oxigen.
* Amplitud de 50 mm a una velocitat no inferior a 250 rpm.
* Utilitzeu l'amplitud de 3 mm a 800-1000rpm.
En molts casos, fins i tot si es tria una amplitud raonable, pot no augmentar el volum de biocultiu, perquè l’augment del volum pot estar influenciat per diversos factors. Per exemple, si un o dos dels deu factors no són ideals, l’augment del volum de cultiu es limitarà, per molt que siguin els altres factors, o es podria argumentar que l’elecció correcta d’amplitud donarà lloc a un augment notable de la incubadora si l’únic factor limitant del volum de cultiu és el lliurament d’oxigen. Per exemple, si la font de carboni és el factor limitant, per molt que sigui la transferència d’oxigen, no s’aconseguirà el volum de cultiu desitjat.
Amplitud i velocitat de rotació
Tant l’amplitud com la velocitat de rotació poden tenir un efecte sobre la transferència d’oxigen. Si els cultius de cèl·lules es cultiven a velocitats de rotació molt baixes (per exemple, 100 rpm), les diferències d’amplitud tenen poc o cap efecte notable sobre la transferència d’oxigen. Per aconseguir la transferència d’oxigen més alta, el primer pas és augmentar la velocitat de rotació tant com sigui possible, i la safata s’equilibrarà correctament per a la velocitat. No totes les cèl·lules poden créixer bé amb oscil·lacions d’alta velocitat i algunes cèl·lules sensibles a les forces de cisalla poden morir per velocitats rotatives elevades.
Altres influències
Altres factors poden tenir un efecte sobre la transferència d’oxigen :.
* Volum d'ompliment, els matràs cònics s'han d'omplir a no més d'un terç del volum total. Si s'ha d'assolir la transferència màxima d'oxigen, ompliu -ne no més del 10%. No ompliu mai el 50%.
* Spoilers: els spoilers són efectius per millorar la transferència d’oxigen en tot tipus de cultures. Alguns fabricants recomanen l’ús de matràs “Ultra High Rive”. Els spoilers d’aquests matràs augmenten la fricció líquida i el Shaker pot no arribar a la velocitat màxima del conjunt.
Correlació entre amplitud i velocitat
La força centrífuga en un agitador es pot calcular mitjançant l'equació següent
Fc = rpm2× Amplitud
Hi ha una relació lineal entre la força centrífuga i l’amplitud: si utilitzeu una amplitud de 25 mm fins a una amplitud de 50 mm (a la mateixa velocitat), la força centrífuga augmenta en un factor de 2.
Existeix una relació quadrada entre la força centrífuga i la velocitat de rotació.
Si la velocitat s’incrementa en un factor de 2 (mateixa amplitud), la força centrífuga augmenta en un factor de 4. Si la velocitat s’incrementa en un factor de 3, la força centrífuga augmenta en un factor de 9!
Si utilitzeu una amplitud de 25 mm, incubeu a una velocitat determinada. Si voleu aconseguir la mateixa força centrífuga amb una amplitud de 50 mm, la velocitat de rotació s'ha de calcular com a arrel quadrada d'1/2, de manera que haureu d'utilitzar el 70% de la velocitat de rotació per aconseguir les mateixes condicions d'incubació.
Tingueu en compte que l’anterior només és un mètode teòric per calcular la força centrífuga. Hi ha altres factors influents en les aplicacions reals. Aquest mètode de càlcul proporciona valors aproximats a efectes operatius.
Posada a l'hora: 10 de setembre de 2013