中文
Hvordan vælger jeg den rigtige shaker -amplitude?
Hvad er amplituden af en ryster?
Amplituden af en ryster er diameteren af palle i cirkulær bevægelse, undertiden kaldet "oscillationsdiameter" eller "spordiameter" -symbol: Ø. Radobio tilbyder standard ryster med amplituder på 3 mm, 25 mm, 26 mm og 50 mm. Tilpassede ryster med andre amplitude størrelser er også tilgængelige.
Hvad er iltoverførselshastighed (OTR)?
Oxygenoverførselshastighed (OTR) er effektiviteten af ilt overføres fra atmosfæren til væsken. Jo højere OTR -værdi betyder, jo højere er iltoverførselseffektiviteten.
Effekt af amplitude og rotationshastighed
Begge disse faktorer påvirker blandingen af mediet i kulturkolben. Jo bedre blanding, jo bedre er iltoverførselshastigheden (OTR). Efter disse retningslinjer kan den mest passende amplitude og rotationshastighed vælges.
Generelt kan valg af en 25 mm eller 26 mm amplitude bruges som en universel amplitude til alle kulturapplikationer.
Bakterie-, gær- og svampekulturer:
Oxygenoverførsel i ryste kolber er meget mindre effektiv end hos bioreaktorer. Oxygenoverførsel kan i de fleste tilfælde være den begrænsende faktor for ryste kolbe -kulturer. Amplituden er relateret til størrelsen på de koniske kolber: større kolber bruger større amplituder.
Anbefaling: 25 mm amplitude til koniske kolber fra 25 ml til 2000 ml.
50 mm amplitude til koniske kolber fra 2000 ml til 5000 ml.
Cellekultur:
* Pattedyrscellekultur har et relativt lavt iltbehov.
* For 250 ml shaker-kolber kan der leveres tilstrækkelig iltlevering over en relativt bred vifte af amplituder og hastigheder (20-50 mm amplitude; 100-300 o / min).
* For kolber med større diameter (Fernbach -kolber) anbefales en amplitude på 50 mm.
* Hvis der bruges engangskulturposer, anbefales der 50 mm amplitude.
Mikrotiter og plader med dybbrønde:
For mikrotiter og dybt brøndeplader er der to forskellige metoder til at opnå maksimal iltoverførsel!
* 50 mm amplitude med en hastighed på mindst 250 o / min.
* Brug 3 mm amplitude ved 800-1000 o / min.
I mange tilfælde, selvom der vælges en rimelig amplitude, kan det muligvis ikke øge biokulturvolumen, fordi stigningen i volumen kan påvirkes af flere faktorer. For eksempel, hvis en eller to af de ti faktorer ikke er ideelle, vil stigningen i kulturvolumen være begrænset, uanset hvor gode de andre faktorer er, eller det kan hævdes, at det korrekte valg af amplitude vil resultere i en mærkbar stigning i inkubatoren, hvis den eneste begrænsende faktor for kulturvolumen er iltlevering. For eksempel, hvis kulstofkilden er den begrænsende faktor, uanset hvor god iltoverførsel er, opnås det ønskede kulturvolumen ikke.
Amplitude og rotationshastighed
Både amplitude og rotationshastighed kan have en effekt på iltoverførsel. Hvis cellekulturer dyrkes med meget lave rotationshastigheder (f.eks. 100 o / min), har forskelle i amplitude ringe eller ingen mærkbar effekt på iltoverførsel. For at opnå den højeste iltoverførsel er det første trin at øge rotationshastigheden så meget som muligt, og bakken vil være korrekt afbalanceret for hastighed. Ikke alle celler kan vokse godt med svingninger med høj hastighed, og nogle celler, der er følsomme over for forskydningskræfter, kan dø af høje rotationshastigheder.
Andre påvirkninger
Andre faktorer kan have en effekt på iltoverførsel:.
* Påfyldningsvolumen skal koniske kolber fyldes til højst en tredjedel af det samlede volumen. Hvis maksimal iltoverførsel skal opnås, skal du udfylde til højst 10%. Fyld aldrig til 50%.
* Spoilere: Spoilere er effektive til at forbedre iltoverførsel i alle typer kulturer. Nogle producenter anbefaler brugen af "ultra højt udbytte" kolber. Spoilerne på disse kolber øger flydende friktion, og rysteren når muligvis ikke den maksimale sæthastighed.
Sammenhæng mellem amplitude og hastighed
Centrifugalkraften i en ryster kan beregnes ved hjælp af følgende ligning
FC = RPM2× amplitude
Der er et lineært forhold mellem centrifugalkraft og amplitude: Hvis du bruger en 25 mm amplitude til en 50 mm amplitude (med samme hastighed), øges centrifugalkraften med en faktor på 2.
Der findes et firkantet forhold mellem centrifugalkraft og rotationshastighed.
Hvis hastigheden forøges med en faktor på 2 (samme amplitude), øges centrifugalkraften med en faktor på 4. Hvis hastigheden øges med en faktor på 3, øges centrifugalkraften med en faktor 9!
Hvis du bruger en amplitude på 25 mm, skal du inkubere med en given hastighed. Hvis du ønsker at opnå den samme centrifugalkraft med en amplitude på 50 mm, skal rotationshastigheden beregnes som kvadratroten på 1/2, så du skal bruge 70% af rotationshastigheden for at opnå de samme inkubationsbetingelser.
Bemærk, at ovenstående kun er en teoretisk metode til beregning af centrifugalkraft. Der er andre påvirkende faktorer i reelle applikationer. Denne beregningsmetode giver omtrentlige værdier til operationelle formål.
Posttid: SEP-10-2023