Athari ya mabadiliko ya joto kwenye utamaduni wa seli
Joto ni kigezo muhimu katika utamaduni wa seli kwa sababu inathiri uzazi wa matokeo. Mabadiliko ya halijoto ya juu au chini ya 37°C yana athari kubwa sana kwenye kinetiki ya ukuaji wa seli za seli za mamalia, sawa na ile ya seli za bakteria. Mabadiliko katika usemi wa jeni na marekebisho katika muundo wa seli, kuendelea kwa mzunguko wa seli, uthabiti wa mRNA unaweza kutambuliwa katika seli za mamalia baada ya saa moja kwa 32ºC. Mbali na kuathiri ukuaji wa seli moja kwa moja, mabadiliko ya halijoto pia huathiri pH ya vyombo vya habari, kwani umumunyifu wa CO2 hubadilisha pH (pH huongezeka kwa joto la chini). Seli za mamalia zilizopandwa zinaweza kuvumilia kupungua kwa joto kubwa. Wanaweza kuhifadhiwa kwa 4 ° C kwa siku kadhaa na wanaweza kuvumilia baridi hadi -196 ° C (kwa kutumia hali zinazofaa). Hata hivyo, hawawezi kuvumilia halijoto ya juu ya 2 °C juu ya kawaida kwa zaidi ya saa chache na watakufa haraka kwa 40 °C na zaidi. Ili kuhakikisha kiwango cha juu cha kuzaliana kwa matokeo, hata kama seli zinaendelea kuishi, utunzaji unahitaji kuchukuliwa ili kudumisha halijoto mara kwa mara iwezekanavyo wakati wa kuangua na kushughulikia seli nje ya incubator.
Sababu za mabadiliko ya joto ndani ya incubator
Utakuwa umeona kwamba wakati mlango wa incubator unafunguliwa, joto hupungua kwa kasi hadi thamani iliyowekwa ya 37 ° C. Kwa ujumla, hali ya joto itapona ndani ya dakika chache baada ya kufungwa kwa mlango. Kwa kweli, tamaduni za tuli zinahitaji muda wa kurejesha joto la kuweka katika incubator. Sababu kadhaa zinaweza kuathiri wakati inachukua kwa utamaduni wa seli kurejesha joto baada ya matibabu nje ya incubator.Mambo haya ni pamoja na:
- ▶urefu wa muda seli zimekuwa nje ya incubator
- ▶aina ya chupa ambamo seli hukuzwa (jiometri huathiri uhamishaji wa joto)
- ▶Idadi ya vyombo kwenye incubator .
- ▶Mgusano wa moja kwa moja wa chupa na rafu ya chuma huathiri ubadilishanaji wa joto na kasi ya kufikia joto bora, kwa hivyo ni bora kuzuia milundo ya chupa na kuweka kila chombo.
- ▶moja kwa moja kwenye rafu ya incubator.
Halijoto ya awali ya vyombo na midia yoyote mpya itakayotumiwa pia itaathiri muda unaochukua kwa seli kuwa katika hali yao bora; joto lao la chini, inachukua muda mrefu.
Ikiwa mambo haya yote yatabadilika kwa wakati, pia yataongeza utofauti kati ya majaribio. Inahitajika kupunguza mabadiliko haya ya joto, hata ikiwa haiwezekani kudhibiti kila kitu kila wakati (haswa ikiwa watu kadhaa wanatumia incubator sawa).
Jinsi ya kupunguza tofauti za joto na kupunguza muda wa kurejesha joto
Kwa kuwasha moto kati
Watafiti wengine wamezoea kupasha joto chupa nzima za vyombo vya habari katika umwagaji wa maji wa 37 °C ili kuwaleta kwenye joto hili kabla ya matumizi. Inawezekana pia kuwasha moto wa kati katika incubator ambayo hutumiwa tu kwa joto la kati na si kwa utamaduni wa seli, ambapo kati inaweza kufikia joto la juu bila kuvuruga tamaduni za seli kwenye incubator nyingine. Lakini hii, kama tunavyojua, kawaida sio gharama ya kumudu.
Ndani ya Incubator
Fungua mlango wa incubator kidogo iwezekanavyo na uifunge haraka. Epuka maeneo ya baridi, ambayo huunda tofauti za joto katika incubator. Acha nafasi kati ya chupa ili kuruhusu hewa kuzunguka. Rafu ndani ya incubator inaweza kutobolewa. Hii inaruhusu usambazaji bora wa joto kwani inaruhusu hewa kupita kwenye mashimo. Hata hivyo, kuwepo kwa mashimo kunaweza kusababisha tofauti katika ukuaji wa seli, kwa sababu kuna tofauti ya joto kati ya eneo lenye mashimo na eneo lenye meta. Kwa sababu hizi, ikiwa majaribio yako yanahitaji ukuaji unaofanana sana wa utamaduni wa seli, unaweza kuweka vifuko vya utamaduni kwenye viunzi vya chuma vilivyo na nyuso ndogo za mguso, ambazo kwa kawaida si lazima katika utamaduni wa kawaida wa seli.
Kupunguza Muda wa Kuchakata Seli
Ili kupunguza muda wa kutumia katika mchakato wa matibabu ya seli, unahitaji
- ▶Panga vifaa na zana zote muhimu kabla ya kuanza kufanya kazi.
- ▶Fanya kazi haraka na kwa upole, ukihakiki mbinu za majaribio mapema ili shughuli zako ziwe za kujirudiarudia na kiotomatiki.
- ▶Punguza mguso wa vimiminika na hewa iliyoko.
- ▶Dumisha halijoto isiyobadilika katika maabara ya utamaduni wa seli mahali unapofanya kazi.
Muda wa kutuma: Aug-18-2023