तापमानातील बदलाचा पेशी संवर्धनावरील परिणाम
पेशी संवर्धनामध्ये तापमान हा एक महत्त्वाचा घटक आहे, कारण त्याचा परिणामांच्या पुनरुत्पादकतेवर परिणाम होतो. ३७°C पेक्षा जास्त किंवा कमी तापमानातील बदलांचा सस्तन प्राण्यांच्या पेशींच्या वाढीच्या गतीवर, जिवाणू पेशींप्रमाणेच, खूप महत्त्वपूर्ण परिणाम होतो. ३२°C तापमानात एका तासानंतर सस्तन प्राण्यांच्या पेशींमध्ये जनुकीय अभिव्यक्तीतील बदल आणि पेशींच्या रचनेतील सुधारणा, पेशीचक्राची प्रगती, mRNA ची स्थिरता हे बदल शोधता येतात. पेशींच्या वाढीवर थेट परिणाम करण्याव्यतिरिक्त, तापमानातील बदलांचा माध्यमाच्या pH वर देखील परिणाम होतो, कारण CO2 च्या विद्राव्यतेमुळे pH बदलतो (कमी तापमानात pH वाढतो). संवर्धित सस्तन प्राण्यांच्या पेशी तापमानातील लक्षणीय घट सहन करू शकतात. त्या ४°C तापमानात अनेक दिवस साठवल्या जाऊ शकतात आणि (योग्य परिस्थिती वापरून) -१९६°C पर्यंतचे गोठण सहन करू शकतात. तथापि, त्या सामान्य तापमानापेक्षा सुमारे २°C जास्त तापमान काही तासांपेक्षा जास्त काळ सहन करू शकत नाहीत आणि ४०°C व त्याहून अधिक तापमानात लवकर मरतात. परिणामांची जास्तीत जास्त पुनरुत्पादकता सुनिश्चित करण्यासाठी, जरी पेशी जिवंत राहिल्या तरी, इनक्यूबेटरच्या बाहेर पेशींच्या उष्मायन आणि हाताळणी दरम्यान तापमान शक्य तितके स्थिर ठेवण्याची काळजी घेणे आवश्यक आहे.
इनक्यूबेटरमधील तापमानातील फरकाची कारणे
तुमच्या लक्षात आले असेल की, जेव्हा इनक्यूबेटरचा दरवाजा उघडला जातो, तेव्हा तापमान झपाट्याने ३७°C या निर्धारित तापमानापर्यंत खाली येते. साधारणपणे, दरवाजा बंद केल्यावर काही मिनिटांत तापमान पुन्हा पूर्ववत होते. वास्तविक पाहता, स्थिर संवर्धनांना (static cultures) इनक्यूबेटरमधील निर्धारित तापमानापर्यंत पूर्ववत होण्यासाठी वेळ लागतो. इनक्यूबेटरच्या बाहेर प्रक्रिया केल्यानंतर पेशी संवर्धनाला (cell culture) पुन्हा तापमान प्राप्त करण्यासाठी लागणाऱ्या वेळेवर अनेक घटक परिणाम करू शकतात.या घटकांमध्ये खालील गोष्टींचा समावेश आहे:
- ▶पेशी इनक्यूबेटरच्या बाहेर राहिलेला कालावधी
- ▶ ज्या फ्लास्कमध्ये पेशी वाढवल्या जातात त्याचा प्रकार (भूमितीचा उष्णता हस्तांतरणावर परिणाम होतो)
- ▶इन्क्यूबेटरमधील कंटेनरची संख्या.
- ▶ फ्लास्कचा स्टीलच्या शेल्फशी थेट संपर्क उष्णता विनिमयावर आणि इष्टतम तापमान गाठण्याच्या गतीवर परिणाम करतो, म्हणून फ्लास्कचे ढिग टाळणे आणि प्रत्येक भांडे वेगळे ठेवणे चांगले.
- ▶ थेट इनक्यूबेटरच्या शेल्फवर.
वापरण्यात येणाऱ्या कोणत्याही नवीन कंटेनर आणि माध्यमाचे सुरुवातीचे तापमान देखील पेशींना त्यांच्या इष्टतम स्थितीत येण्यासाठी लागणाऱ्या वेळेवर परिणाम करते; त्यांचे तापमान जितके कमी असेल, तितका जास्त वेळ लागतो.
जर हे सर्व घटक कालांतराने बदलले, तर त्यामुळे प्रयोगांमधील तफावतही वाढेल. तापमानातील हे चढउतार कमी करणे आवश्यक आहे, जरी प्रत्येक गोष्टीवर नियंत्रण ठेवणे नेहमीच शक्य नसले तरी (विशेषतः जर अनेक लोक एकच इनक्यूबेटर वापरत असतील).
तापमानातील चढउतार कसे कमी करावे आणि तापमान पूर्वस्थितीत येण्याचा वेळ कसा कमी करावा
माध्यम आधीच गरम करून
काही संशोधकांना माध्यमाच्या संपूर्ण बाटल्या वापरण्यापूर्वी ३७°C पाण्याच्या बाथमध्ये पूर्व-उष्णता देण्याची सवय असते. केवळ माध्यम पूर्व-उष्णतेसाठी वापरल्या जाणाऱ्या आणि पेशी संवर्धनासाठी न वापरल्या जाणाऱ्या इनक्यूबेटरमध्ये माध्यम पूर्व-उष्णता देणे देखील शक्य आहे, जिथे दुसऱ्या इनक्यूबेटरमधील पेशी संवर्धनाला कोणताही अडथळा न आणता माध्यम इष्टतम तापमानापर्यंत पोहोचू शकते. परंतु आमच्या माहितीनुसार, हा खर्च सहसा परवडणारा नसतो.
इनक्यूबेटरच्या आत
इन्क्यूबेटरचा दरवाजा शक्य तितका कमी उघडा आणि शक्य तितक्या लवकर बंद करा. थंड जागा टाळा, ज्यामुळे इन्क्यूबेटरमध्ये तापमानातील फरक निर्माण होतो. हवा खेळती राहण्यासाठी फ्लास्कमध्ये जागा सोडा. इन्क्यूबेटरमधील शेल्फला छिद्रे असू शकतात. यामुळे छिद्रांमधून हवा जाऊ शकते, ज्यामुळे उष्णतेचे वितरण अधिक चांगले होते. तथापि, छिद्रांच्या उपस्थितीमुळे पेशींच्या वाढीमध्ये फरक होऊ शकतो, कारण छिद्रे असलेल्या भागात आणि धातू असलेल्या भागात तापमानाचा फरक असतो. या कारणांमुळे, जर तुमच्या प्रयोगांमध्ये पेशी संवर्धनाची अत्यंत एकसमान वाढ आवश्यक असेल, तर तुम्ही कल्चर फ्लास्क कमी संपर्क पृष्ठभाग असलेल्या धातूच्या आधारांवर ठेवू शकता, जे सामान्य पेशी संवर्धनामध्ये सहसा आवश्यक नसते.
पेशी प्रक्रिया वेळ कमी करणे
पेशी उपचार प्रक्रियेत लागणारा वेळ कमी करण्यासाठी, तुम्हाला हे करणे आवश्यक आहे:
- ▶काम सुरू करण्यापूर्वी सर्व आवश्यक साहित्य आणि साधने संघटित करून ठेवा.
- प्रायोगिक पद्धतींचा आगाऊ आढावा घेऊन जलद आणि सहजतेने काम करा, जेणेकरून तुमची कार्यवाही पुनरावृत्त आणि स्वयंचलित होईल.
- ▶ द्रवांचा सभोवतालच्या हवेसोबतचा संपर्क कमीत कमी ठेवा.
- ▶तुम्ही काम करत असलेल्या पेशी संवर्धन प्रयोगशाळेत तापमान स्थिर ठेवा.
पोस्ट करण्याची वेळ: १८ ऑगस्ट २०२३