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Prudutti di variazione di temperatura nantu à a cultura cellulare
Temperatura hè un paràmetru impurtante in cultura celulare perchè afecta a riproducibilità di i risultati. Cambiamenti di temperatura sopra o sottu à u 37 ° C anu un effettu assai significativu nantu à a cinta di a crescita di a cellula di e cellule mammiferi, simili à quellu di e cellule batteriche. Cambiamenti in spressione è mudificazioni gene in a struttura cicculata, a progressione cicatrice, a stabilità MRNA pò esse rilevata in e cellule mammaliane dopu à una ora à 32ºC. In più di a custituimentu direttamente a crescita, i cambiamenti ancu affette à u più di i media, cum'è a solubilità di CO2 altere u phoneuraturi di punti). Celle mammiferi cultivate ponu tollerà a temperatura significativa di a temperatura. Ponu esse guardati à u 4 ° C per parechji ghjorni è pò tollerà a congelazione à -196 ° C (aduprendu cundizioni adatti). Tuttavia, ùn ponu tollerà temperature sopra à circa 2 ° C sopra a normale per più di qualchì ora è moriri prestu à 40 ° Per assicurà a ripruducazione massima, ancu i Cole Survive, A Cura I Cura deve esse pigliatu à a temperatura quantu pussibule
Mutivi di variazioni di temperatura in l'incubatore
Avete nutatu chì quandu a porta di l'incubatore hè aperta, a temperatura abbanduneghja rapidamente à u valore di u set di 37 ° C. In generale, a temperatura ricuperarà ind'è pochi minuti dopu a porta si trova chjude. In fatti, culture statiche anu bisognu di tempu per ricuperà à a temperatura stabilita in l'incubatore. Un numeru di fatturi pò affettà u tempu chì ci vole à una cultura cellula per ripiglià a temperatura dopu à u trattamentu fora di l'incubatore.Sti fattori includenu:
- ▶ a durata di u tempu chì e cellule sò stati fora di l'incubatore
- ▶ u tipu di frascu in quale e cellule sò cultivate (geometria afecta u trasferimentu di calore)
- ▶ numeru di cuntenituri in l'incubatore.
- ▶ Cuntattu direttu di i fraschi cù u scambiu di azzaru afecta u scambiu di u calore è a velocità di a temperatura ottima, per quessa hè megliu per evità di stalla è di mette ogni bastimentu
- ▶ direttamente nantu à u scaffale di l'incubatore.
A temperatura iniziale di qualsiasi cuntenituri freschi è i media utilizati anu ancu afectarà u tempu chì ci vole à e cellule per esse in u so statu ottimali; a temperatura bassa, a più longa ci vole.
Sì tutti questi fattori cambianu cù u tempu, aumentanu dinanu a varietà trà l'esperimenti. Hè necessariu minimizzà questi flutazioni di temperatura, ancu s'ellu ùn hè micca sempre pussibule di cuntrullà tuttu ciò (in particulare, se parechje persone usate u listessu incubatore).
Cumu minimizzà e variazioni di temperatura è reduce u tempu di recuperazione di a temperatura
Preferendu u mediu
Alcuni circadori sò abituati à i buttigli in pienu buttigli in un bagnu di acqua 37 ° per purtallu à sta temperatura prima di l'usu. Hè ancu pussibule di predisore u mediu in incubatore chì hè necessariu per a so incubatore è micca per a cultura cellulare, induve u mediu pò ghjunghje à una temperatura ottimaria. Ma questu, quant'è sapemu, ùn hè generalmente micca una spesa prudente.
Dentru l'incubatore
Apertura a porta di l'incubatore quant'è pussibule è vicinu à prestu. Evitate i punti friddi, chì creanu e differenze di temperatura in l'incubatore. Lasciate u spaziu trà i lampi per permette l'aria à circulà. I sacchetti in l'incubatore pò esse perforazione. Questu permette per a distribuzione di u calore megliu mentre permette l'aria per passà per i buchi. Tuttavia, a presenza di i buchi ponu purtà à e differenze in a crescita di a cellulare, perchè ùn ci hè una finestra di temperatura trà l'area cù Meta. Per questi mutivi, se i vostri esperimenti necessitanu una crescita uniforme, vi pudete piazzà a cultura di a cultura annantu à superfici di cuntattu di u metallu, chì ùn sò generalmente micca bisognu d'in cuntattu di a cultura di a rutina.
Minimizendu u tempu di trasfurmazioni di cellule
Per minimisà u tempu passanu in u prucessu di trattamentu cellulare, avete bisognu
- ▶ Organizzà tutti i materiali è l'utili necessarii prima di cumincià à travaglià.
- ▶ travaglià rapidamente è liscia, revueing metudi sperimentale in anticipu per chì i vostri operazioni diventa repetitivu è automatizate.
- ▶ minimisà u cuntattu di liquidi cù l'aria ambientale.
- ▶ Mantene una temperatura constante in u laboratoriu di a cultura di a cellula induve travaglia.
Tempu post: Aug-18-2023