Effekt fan temperatuerfariaasje op selkultuer
Temperatuer is in wichtige parameter yn selkultuer, om't it ynfloed hat op de reprodusearberens fan resultaten. Temperatuerferoarings boppe of ûnder 37 °C hawwe in tige wichtich effekt op 'e selgroeikinetyk fan sûchdiersellen, fergelykber mei dy fan baktearjesellen. Feroarings yn genekspresje en modifikaasjes yn sellulêre struktuer, selsyklusprogresje, mRNA-stabiliteit kinne wurde waarnommen yn sûchdiersellen nei ien oere by 32 °C. Neist it direkt beynfloedzjen fan selgroei, beynfloedzje feroarings yn temperatuer ek de pH fan 'e media, om't de oplosberens fan CO2 de pH feroaret (pH nimt ta by legere temperatueren). Kultivearre sûchdiersellen kinne wichtige temperatuerferlegings tolerearje. Se kinne ferskate dagen by 4 °C opslein wurde en kinne it befriezen oant -196 °C tolerearje (mei passende omstannichheden). Se kinne lykwols gjin temperatueren boppe sawat 2 °C boppe normaal langer as in pear oeren tolerearje en sille fluch stjerre by 40 °C en heger. Om maksimale reprodusearberens fan resultaten te garandearjen, sels as de sellen oerlibje, moat derfoar soarge wurde dat de temperatuer sa konstant mooglik hâlden wurdt tidens de ynkubaasje en it behanneljen fan 'e sellen bûten de ynkubator.
Redenen foar temperatuerferskillen yn 'e ynkubator
Jo sille opmurken hawwe dat as de doar fan 'e ynkubator iepene wurdt, de temperatuer rap sakket nei de ynstelde wearde fan 37 °C. Yn 't algemien sil de temperatuer binnen in pear minuten nei it sluten fan 'e doar wer opkomme. Eins hawwe statyske kultueren tiid nedich om te herstellen nei de ynstelde temperatuer yn 'e ynkubator. In oantal faktoaren kinne ynfloed hawwe op 'e tiid dy't it duorret foar in selkultuer om wer op temperatuer te kommen nei behanneling bûten de ynkubator.Dizze faktoaren omfetsje:
- ▶de tiid dat de sellen bûten de ynkubator west hawwe
- ▶ it type kolf wêryn't de sellen groeid wurde (geometry beynfloedet waarmteferfier)
- ▶Oantal konteners yn 'e ynkubator.
- ▶ Direkt kontakt fan 'e kolven mei de stielen plank beynfloedet de waarmtewikseling en de snelheid fan it berikken fan 'e optimale temperatuer, dus it is better om stapels kolven te foarkommen en elk fet te pleatsen
- ▶direkt op it rek fan 'e ynkubator.
De begjintemperatuer fan alle farske konteners en media dy't brûkt wurde sil ek ynfloed hawwe op de tiid dy't it duorret foardat de sellen yn har optimale steat binne; hoe leger har temperatuer, hoe langer it duorret.
As al dizze faktoaren yn 'e rin fan' e tiid feroarje, sille se ek de fariabiliteit tusken eksperiminten ferheegje. It is needsaaklik om dizze temperatuerfluktuaasjes te minimalisearjen, sels as it net altyd mooglik is om alles te kontrolearjen (benammen as ferskate minsken deselde ynkubator brûke).
Hoe kinne jo temperatuerferskillen minimalisearje en de hersteltiid fan temperatuer ferminderje
Troch it foarferwaarmjen fan it medium
Guon ûndersikers binne wend om hiele flessen media foar te ferwaarmjen yn in wetterbad fan 37 °C om se foar gebrûk op dizze temperatuer te bringen. It is ek mooglik om it medium foar te ferwaarmjen yn in ynkubator dy't allinich brûkt wurdt foar it foarferwaarmjen fan it medium en net foar selkultuer, wêrby't it medium in optimale temperatuer berikke kin sûnder de selkultueren yn in oare ynkubator te fersteuren. Mar dit is, foar safier't wy witte, meastal gjin betelbere útjefte.
Binnen de ynkubator
Iepenje de doar fan 'e ynkubator sa min mooglik en doch it sa gau mooglik ticht. Foarkom kâlde plakken, dy't temperatuerferskillen yn 'e ynkubator feroarsaakje. Lit romte tusken de flessen om lucht te sirkulearjen. De planken yn 'e ynkubator kinne perforearre wurde. Dit soarget foar in bettere waarmteferdieling, om't lucht troch de gatten kin gean. De oanwêzigens fan gatten kin lykwols liede ta ferskillen yn selgroei, om't der in temperatuerferskil is tusken it gebiet mei gatten en it gebiet mei meta. Om dizze redenen, as jo eksperiminten in heul unifoarme groei fan 'e selkultuer fereaskje, kinne jo de kultuerflessen op metalen stipen pleatse mei lytsere kontaktflakken, dy't normaal net nedich binne yn routine selkultuer.
Minimalisearjen fan selferwurkingstiid
Om de tiid dy't jo besteegje oan it selbehannelingsproses te minimalisearjen, moatte jo
- ▶ Organisearje alle nedige materialen en ark foardat jo begjinne te wurkjen.
- ▶Wurkje fluch en soepel, en besjoch eksperimintele metoaden fan tefoaren, sadat jo operaasjes repetityf en automatisearre wurde.
- ▶Minimalisearje kontakt fan floeistoffen mei omjouwingslucht.
- ▶Hâld in konstante temperatuer yn it selkultuerlaboratoarium dêr't jo wurkje.
Pleatsingstiid: 18 augustus 2023