Температуранын өзгөрүшүнүн клетка маданиятына тийгизген таасири
Температура клетка маданиятынын маанилүү параметри болуп саналат, анткени ал натыйжалардын кайталанышына таасир этет. Температуранын 37°Сден жогору же андан төмөн өзгөрүшү сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларынын клетка өсүү кинетикасына бактериялык клеткалардай эле олуттуу таасир этет. Ген экспрессиясынын өзгөрүшү жана клеткалык түзүлүштөгү модификациялар, клетка циклинин прогресси, мРНКнын туруктуулугу сүт эмүүчүлөрдүн клеткаларында 32ºC температурада бир сааттан кийин байкалат. Клетканын өсүшүнө түздөн-түз таасирин тийгизгенден тышкары, температуранын өзгөрүшү медианын рНына да таасирин тийгизет, анткени СО2 эригичтиги рНды өзгөртөт (рН төмөнкү температурада жогорулайт). Маданияттуу сүт эмүүчүлөрдүн клеткалары температуранын олуттуу төмөндөшүнө чыдай алат. Аларды 4 °C температурада бир нече күн сактоого болот жана -196 °C (тиешелүү шарттарды колдонуу менен) тоңууга чыдай алат. Бирок алар нормадан 2 °C жогору температурага бир нече сааттан ашык чыдай алышпайт жана 40 °C жана андан жогору температурада тез өлүшөт. Натыйжалардын максималдуу кайталанышын камсыз кылуу үчүн, клеткалар аман калган күндө да, инкубациялоо жана клеткаларды инкубатордун сыртында иштетүү учурунда температураны мүмкүн болушунча туруктуу кармап турууга кам көрүү керек.
Инкубатордун ичиндеги температуранын өзгөрүшүнүн себептери
Сиз инкубатордун эшиги ачылганда температура 37 °C белгиленген мааниге чейин тез төмөндөй турганын байкагансыз. Жалпысынан алганда, температура эшик жабылгандан кийин бир нече мүнөттүн ичинде калыбына келет. Чынында, статикалык маданияттар инкубатордогу белгиленген температурага чейин калыбына келүү үчүн убакыт керек. Клетка культурасы инкубатордон тышкары дарылоодон кийин температураны калыбына келтирүүгө кеткен убакытка бир катар факторлор таасир этиши мүмкүн.Бул факторлор төмөнкүлөрдү камтыйт:
- ▶клеткалар инкубатордон чыккан убакыттын узактыгы
- ▶клеткалар өстүрүлгөн колбанын түрү (геометрия жылуулук өткөрүүгө таасир этет)
- ▶Инкубатордогу контейнерлердин саны.
- ▶Колбалардын болот текчеге тике тийүүсү жылуулук алмашууга жана оптималдуу температурага жетүү ылдамдыгына таасирин тийгизет, ошондуктан колбалардын үймөлөрүнөн качуу жана ар бир идиштерди коюу жакшы.
- ▶түздөн-түз инкубатордун текчесинде.
Колдонулган ар кандай жаңы идиштердин жана медианын баштапкы температурасы да клеткалардын оптималдуу абалына келүү убактысына таасир этет; алардын температурасы канчалык төмөн болсо, ошончолук көп убакыт талап кылынат.
Бул факторлордун баары убакыттын өтүшү менен өзгөрсө, алар эксперименттердин ортосундагы өзгөрмөлүүлүгүн да жогорулатат. Баарын көзөмөлдөө дайыма эле мүмкүн болбосо да (айрыкча, бир инкубаторду бир нече адам колдонуп жатса) бул температуралык өзгөрүүлөрдү минималдаштыруу зарыл.
Температуранын өзгөрүшүн кантип азайтуу жана температураны калыбына келтирүү убактысын кыскартуу
Ортону алдын ала ысытуу менен
Кээ бир изилдөөчүлөр медианын бүт бөтөлкөлөрүн колдонуудан мурун 37 °C суу мончосунда бул температурага чейин жылытууга көнүп калышкан. Ошондой эле чөйрөнү клетка культурасы үчүн эмес, орто ысытуу үчүн гана колдонулган инкубатордо алдын ала ысытууга болот, мында чөйрө башка инкубатордогу клетка культураларын бузбастан оптималдуу температурага жете алат. Бирок бул, биз билгенден, адатта, жеткиликтүү чыгаша эмес.
Инкубатордун ичинде
Инкубатордун эшигин мүмкүн болушунча аз ачып, тезирээк жабыңыз. Инкубатордо температуралык айырмачылыктарды жараткан муздак тактардан сактаныңыз. Колбалардын ортосунда аба айлануусу үчүн боштук калтырыңыз. Инкубатордун ичиндеги текчелер тешилиши мүмкүн. Бул абанын тешиктерден өтүшүнө мүмкүндүк бергендиктен жылуулукту жакшы бөлүштүрүүгө мүмкүндүк берет. Бирок тешиктердин болушу клетканын өсүшүндөгү айырмачылыктарга алып келиши мүмкүн, анткени тешиктери бар аймак менен мета менен аймактын ортосунда температура айырмасы бар. Ушул себептерден улам, эгерде сиздин эксперименттериңиз клетка маданиятынын бир калыпта өсүүсүн талап кылса, сиз культуралык флягаларды кадимки клетка маданиятында талап кылынбаган кичинекей контакт беттери бар металл таянычтарга жайгаштырсаңыз болот.
Клетканын иштетүү убактысын азайтуу
Клетканы дарылоо процессине сарпталган убакытты азайтуу үчүн керек
- ▶Ишке киришерден мурун бардык керектүү материалдарды жана шаймандарды иреттеп алыңыз.
- ▶Операцияларыңыз кайталануучу жана автоматташтырылган болушу үчүн эксперименталдык ыкмаларды алдын ала карап чыгып, тез жана жылмакай иштеңиз.
- ▶Айланадагы аба менен суюктуктардын тийүүсүн азайтыңыз.
- ▶Өзүңүз иштеген клетка өстүрүүчү лабораторияда туруктуу температураны кармаңыз.
Посттун убактысы: 18-август-2023