Pangaruh variasi suhu dina kultur sél
Suhu mangrupa parameter penting dina kultur sél sabab mangaruhan reproducibility hasil. Parobahan suhu di luhur atawa di handap 37°C boga pangaruh anu pohara signifikan dina kinetika pertumbuhan sél sél mamalia, sarupa jeung sél baktéri. Parobahan éksprési gén jeung modifikasi dina struktur sélulér, kamajuan siklus sél, stabilitas mRNA bisa dideteksi dina sél mamalia sanggeus hiji jam dina 32ºC. Salian langsung mangaruhan kamekaran sél, parobahan suhu ogé mangaruhan pH média, sabab kalarutan CO2 ngarobih pH (pH ningkat dina suhu anu langkung handap). Sél mamalia anu dibudidayakeun tiasa toleran panurunan suhu anu signifikan. Éta tiasa disimpen dina suhu 4 ° C salami sababaraha dinten sareng tiasa tolérkeun beku dugi ka -196 ° C (maké kaayaan anu pas). Tapi, aranjeunna henteu tiasa toléran suhu di luhur sakitar 2 °C di luhur normal salami langkung ti sababaraha jam sareng bakal maot gancang dina 40 °C ka luhur. Pikeun mastikeun reproducibility maksimum hasilna, sanajan sél salamet, care perlu dilaksanakeun pikeun ngajaga suhu sabisa mungkin salila inkubasi jeung penanganan sél luar inkubator.
Alesan pikeun parobahan suhu di jero inkubator
Anjeun bakal perhatikeun yén nalika panto inkubator dibuka, suhu turun gancang ka nilai set 37 °C. Sacara umum, hawa bakal pulih dina sababaraha menit saatos panto ditutup. Nyatana, budaya statik peryogi waktos pikeun pulih kana suhu anu diatur dina inkubator. Sajumlah faktor bisa mangaruhan waktu nu diperlukeun pikeun kultur sél pikeun meunangkeun deui suhu sanggeus perlakuan di luar incubator.Faktor ieu ngawengku:
- ▶ lilana waktu sél geus kaluar tina incubator
- ▶jenis flask tempat sél tumuwuh (géométri mangaruhan mindahkeun panas)
- ▶Jumlah wadah dina inkubator .
- ▶ Kontak langsung tina flasks jeung rak baja mangaruhan bursa panas sarta laju ngahontal suhu optimal, jadi eta leuwih hade ulah tumpukan flasks jeung nempatkeun unggal wadah.
- ▶langsung dina rak incubator.
Suhu awal sagala wadah seger jeung média dipaké ogé bakal mangaruhan waktu nu diperlukeun pikeun sél dina kaayaan optimal maranéhanana; nu handap suhu maranéhanana, nu lila waktu nu diperlukeun.
Upami sadaya faktor ieu robih kana waktosna, aranjeunna ogé bakal ningkatkeun variabilitas antara percobaan. Ieu diperlukeun pikeun ngaleutikan fluctuations suhu ieu, sanajan teu salawasna mungkin pikeun ngadalikeun sagalana (utamana lamun sababaraha urang ngagunakeun incubator sarua).
Kumaha ngaleutikan variasi suhu sareng ngirangan waktos pamulihan suhu
Ku preheating sedeng
Sababaraha panalungtik biasa pre-warming sakabeh botol media dina mandi cai 37 °C pikeun mawa ka suhu ieu saméméh dipaké. Éta ogé mungkin pikeun memanaskeun médium dina inkubator anu ngan ukur dianggo pikeun pemanasan sedeng sareng sanés pikeun kultur sél, dimana médium tiasa ngahontal suhu anu optimal tanpa ngaganggu kultur sél dina inkubator sanés. Tapi ieu, sajauh anu urang terang, biasana sanés biaya anu lumayan.
Di jero Incubator
Buka panto inkubator sakedik-gancang sareng tutupna gancang-gancang. Hindarkeun bintik tiis, anu nyiptakeun bédana suhu dina inkubator. Ninggalkeun spasi antara flasks pikeun ngidinan hawa pikeun ngiderkeun. Rak di jero inkubator tiasa dibobodo. Hal ieu ngamungkinkeun pikeun distribusi panas hadé sabab ngamungkinkeun hawa ngaliwatan liang. Sanajan kitu, ayana liang bisa ngakibatkeun béda dina tumuwuhna sél, sabab aya béda suhu antara wewengkon kalawan liang jeung wewengkon meta. Ku sabab kitu, lamun percobaan Anjeun merlukeun tumuwuh kacida seragam tina budaya sél, Anjeun bisa nempatkeun flasks budaya dina ngarojong logam kalawan surfaces kontak leutik, nu biasana teu diperlukeun dina budaya sél rutin.
Ngaminimalkeun Waktu Ngolah Sél
Pikeun ngaleutikan waktu méakkeun dina prosés perlakuan sél, Anjeun kudu
- ▶Atur sadaya bahan sareng alat anu diperyogikeun sateuacan anjeun damel.
- ▶ Gawé gancang sareng lancar, marios metode ékspérimén sateuacanna supados operasi anjeun janten repetitive sareng otomatis.
- ▶ Ngaleutikan kontak cairan jeung hawa ambient.
- ▶Jaga suhu konstan di laboratorium kultur sél dimana anjeun damel.
waktos pos: Aug-18-2023