Epekto sa kausaban sa temperatura sa cell culture
Ang temperatura usa ka importante nga parameter sa cell culture tungod kay kini makaapekto sa reproducibility sa mga resulta. Ang mga pagbag-o sa temperatura sa ibabaw o ubos sa 37°C adunay dakong epekto sa mga kinetika sa pagtubo sa selula sa mga selula sa mammalian, susama sa mga selula sa bakterya. Ang mga pagbag-o sa ekspresyon sa gene ug mga pagbag-o sa istruktura sa cellular, pag-uswag sa siklo sa selula, kalig-on sa mRNA mahimong makit-an sa mga selula sa mammalian pagkahuman sa usa ka oras sa 32ºC. Dugang sa direktang pag-apektar sa pagtubo sa selula, ang mga pagbag-o sa temperatura makaapekto usab sa pH sa media, tungod kay ang solubility sa CO2 nag-usab sa pH (ang pH mosaka sa mas ubos nga temperatura). Ang kultura nga mammalian nga mga selula makaagwanta sa mahinungdanong pagkunhod sa temperatura. Mahimo kining tipigan sa 4 °C sulod sa pipila ka adlaw ug makaagwanta sa pagyelo ngadto sa -196 °C (gamit ang angay nga mga kondisyon). Bisan pa, dili nila maagwanta ang mga temperatura nga labaw sa 2 °C labaw sa normal sa sobra sa pipila ka oras ug mamatay dayon sa 40 °C pataas. Aron masiguro ang labing kadaghan nga reproducibility sa mga resulta, bisan kung mabuhi ang mga selula, kinahanglan ang pag-amping aron mapadayon ang temperatura nga kanunay kutob sa mahimo sa panahon sa paglumlum ug pagdumala sa mga selula sa gawas sa incubator.
Mga hinungdan sa pagbag-o sa temperatura sa sulod sa incubator
Mamatikdan nimo nga kung ablihan ang pultahan sa incubator, ang temperatura paspas nga moubos sa gitakda nga kantidad nga 37 °C. Sa kinatibuk-an, ang temperatura maulian sulod sa pipila ka minuto human masirad-an ang pultahan. Sa tinuud, ang mga static nga kultura nanginahanglan oras aron mabawi ang gitakda nga temperatura sa incubator. Daghang mga hinungdan ang makaapekto sa oras nga gikinahanglan alang sa usa ka kultura sa cell aron mabalik ang temperatura pagkahuman sa pagtambal sa gawas sa incubator.Kini nga mga hinungdan naglakip sa:
- ▶ang gitas-on sa panahon nga ang mga selula wala na sa incubator
- ▶ang matang sa flask diin ang mga selula mitubo (geometry makaapekto sa heat transfer)
- ▶Gidaghanon sa mga sudlanan sa incubator .
- ▶ Direkta nga pagkontak sa mga flasks nga adunay estante nga asero makaapekto sa pagbinayloay sa kainit ug ang katulin sa pagkab-ot sa labing maayo nga temperatura, mao nga mas maayo nga likayan ang mga stack sa flasks ug ibutang ang matag sudlanan
- ▶ direkta sa estante sa incubator.
Ang inisyal nga temperatura sa bisan unsang lab-as nga mga sudlanan ug media nga gigamit makaapekto usab sa oras nga gikinahanglan aron ang mga selula anaa sa ilang labing maayo nga kahimtang; mas ubos ang ilang temperatura, mas dugay kini.
Kung ang tanan niini nga mga hinungdan mausab sa paglabay sa panahon, kini usab makadugang sa pagkalainlain tali sa mga eksperimento. Kinahanglan nga maminusan kini nga mga pagbag-o sa temperatura, bisan kung dili kanunay posible nga makontrol ang tanan (labi na kung daghang mga tawo ang naggamit sa parehas nga incubator).
Sa unsa nga paagi nga maminusan ang mga kalainan sa temperatura ug makunhuran ang oras sa pagbawi sa temperatura
Pinaagi sa preheating sa medium
Ang ubang mga tigdukiduki naanad sa pagpainit sa tibuok nga mga botelya sa media sa usa ka 37 °C nga kaligoanan sa tubig aron kini madala niini nga temperatura sa dili pa gamiton. Posible usab nga preheat ang medium sa usa ka incubator nga gigamit lamang alang sa medium preheating ug dili alang sa cell culture, diin ang medium makaabot sa usa ka kamalaumon nga temperatura nga dili makabalda sa mga cell culture sa laing incubator. Apan kini, sa atong nahibal-an, kasagaran dili usa ka barato nga gasto.
Sulod sa Incubator
Ablihi ang pultahan sa incubator kutob sa mahimo ug isira kini sa labing madali. Likayi ang mga bugnaw nga lugar, nga makamugna og mga kalainan sa temperatura sa incubator. Biyai og luna taliwala sa mga flasks aron maka-circulate ang hangin. Ang mga estante sa sulod sa incubator mahimong mabutas. Kini nagtugot alang sa mas maayo nga pag-apod-apod sa kainit tungod kay kini nagtugot sa hangin nga moagi sa mga lungag. Bisan pa, ang presensya sa mga lungag mahimong mosangpot sa mga kalainan sa pagtubo sa selula, tungod kay adunay kalainan sa temperatura tali sa lugar nga adunay mga lungag ug sa lugar nga adunay meta. Tungod niini nga mga hinungdan, kung ang imong mga eksperimento nanginahanglan labi ka parehas nga pagtubo sa kultura sa cell, mahimo nimong ibutang ang mga flasks sa kultura sa mga suporta sa metal nga adunay gamay nga kontak nga mga ibabaw, nga kasagaran dili kinahanglan sa naandan nga kultura sa cell.
Pagminus sa Oras sa Pagproseso sa Cell
Aron maminusan ang oras nga gigugol sa proseso sa pagtambal sa cell, kinahanglan nimo
- ▶I-organisar ang tanang gikinahanglang materyales ug himan sa dili ka pa magsugod sa pagtrabaho.
- ▶Pagtrabaho dayon ug hapsay, pagrepaso daan sa mga pamaagi sa eksperimento aron ang imong mga operasyon mahimong balik-balik ug awtomatiko.
- ▶Kinamay ang pagkontak sa mga likido sa hangin sa palibot.
- ▶ Hupti ang kanunay nga temperatura sa cell culture lab diin ka nagtrabaho.
Oras sa pag-post: Ago-18-2023