Pengaruh variasi suhu ing kultur sel
Suhu minangka parameter penting ing kultur sel amarga mengaruhi reproducibility asil. Owah-owahan suhu ing ndhuwur utawa ngisor 37 ° C duweni pengaruh sing signifikan marang kinetika pertumbuhan sel sel mamalia, padha karo sel bakteri. Owah-owahan ekspresi gen lan modifikasi struktur sel, progresi siklus sel, stabilitas mRNA bisa dideteksi ing sel mamalia sawise siji jam ing 32ºC. Saliyane langsung mengaruhi pertumbuhan sel, owah-owahan suhu uga mengaruhi pH media, amarga kelarutan CO2 ngowahi pH (pH mundhak ing suhu sing luwih murah). Sèl mamalia sing dibudidaya bisa ngidinaké penurunan suhu sing signifikan. Bisa disimpen ing suhu 4 °C nganti pirang-pirang dina lan bisa tahan beku nganti -196 °C (nggunakake kahanan sing cocog). Nanging, ora bisa ngidinke suhu ing ndhuwur 2 °C ndhuwur normal luwih saka sawetara jam lan bakal cepet mati ing 40 °C lan ndhuwur. Kanggo mesthekake reproducibility maksimum asil, sanajan sel bisa urip, care kudu dijupuk kanggo njaga suhu minangka pancet sabisa sak inkubasi lan nangani sel njaba inkubator.
Alesan kanggo variasi suhu ing inkubator
Sampeyan bakal weruh yen nalika lawang inkubator dibukak, suhu mudhun kanthi cepet nganti 37 °C. Umumé, suhu bakal pulih ing sawetara menit sawise lawang ditutup. Nyatane, budaya statis mbutuhake wektu kanggo pulih menyang suhu sing disetel ing inkubator. Sawetara faktor bisa mengaruhi wektu sing dibutuhake kanggo kultur sel kanggo entuk suhu maneh sawise perawatan ing njaba inkubator.Faktor kasebut kalebu:
- ▶ suwene wektu sel wis metu saka inkubator
- ▶jinis flask ing ngendi sel tuwuh (geometri mengaruhi transfer panas)
- ▶Jumlah wadhah ing inkubator .
- ▶ Kontak langsung saka flasks karo beting baja mengaruhi exchange panas lan kacepetan sik njongko suhu optimal, supaya iku luwih apik kanggo ngindhari tumpukan saka flasks lan kanggo nyelehake saben prau
- ▶langsung ing rak inkubator.
Suhu awal saka wadhah seger lan media sing digunakake uga bakal mengaruhi wektu sing dibutuhake kanggo sel kasebut ing kondisi optimal; luwih murah suhu, saya suwe.
Yen kabeh faktor kasebut owah saka wektu, uga bakal nambah variasi ing antarane eksperimen. Sampeyan kudu nyilikake fluktuasi suhu kasebut, sanajan ora bisa ngontrol kabeh (utamane yen sawetara wong nggunakake inkubator sing padha).
Cara nyilikake variasi suhu lan nyuda wektu pemulihan suhu
Kanthi preheating medium
Sawetara peneliti wis biasa kanggo pre-warming kabeh gendul media ing adus banyu 37 °C kanggo nggawa menyang suhu iki sadurunge digunakake. Sampeyan uga bisa preheat medium ing inkubator sing mung digunakake kanggo preheating medium lan ora kanggo kultur sel, ing ngendi medium bisa tekan suhu optimal tanpa ngganggu kultur sel ing inkubator liyane. Nanging iki, sing kita ngerti, biasane ora biaya sing terjangkau.
Nang Inkubator
Bukak lawang inkubator sakbisane lan tutup kanthi cepet. Ngindhari bintik-bintik kadhemen, sing nggawe beda suhu ing inkubator. Ninggalake spasi ing antarane labu supaya bisa sirkulasi udara. Rak ing njero inkubator bisa dilubangi. Iki ngidini distribusi panas sing luwih apik amarga ngidini hawa bisa ngliwati bolongan kasebut. Nanging, anane bolongan bisa nyebabake bedane pertumbuhan sel, amarga ana bedane suhu antarane wilayah sing duwe bolongan lan wilayah sing meta. Kanggo alasan kasebut, yen eksperimen sampeyan mbutuhake pertumbuhan kultur sel sing seragam, sampeyan bisa nyelehake flasks budaya ing dhukungan logam kanthi permukaan kontak sing luwih cilik, sing biasane ora perlu ing kultur sel rutin.
Nyilikake Wektu Pangolahan Sel
Kanggo nyilikake wektu mbuwang ing proses perawatan sel, sampeyan kudu
- ▶Atur kabeh bahan lan piranti sing dibutuhake sadurunge sampeyan miwiti kerja.
- ▶Gawe kanthi cepet lan lancar, mriksa cara eksperimen luwih dhisik supaya operasi sampeyan dadi bola-bali lan otomatis.
- ▶ Nyilikake kontak cairan karo udara sekitar.
- ▶Njaga suhu konstan ing lab kultur sel ing ngendi sampeyan kerja.
Wektu kirim: Aug-18-2023