कोष संस्कृतिमा तापमान भिन्नताको प्रभाव
तापक्रम कोष संस्कृतिमा एक महत्त्वपूर्ण प्यारामिटर हो किनभने यसले परिणामहरूको पुनरुत्पादन क्षमतालाई असर गर्छ। ३७ डिग्री सेल्सियस भन्दा माथि वा तल तापक्रम परिवर्तनले स्तनधारी कोषहरूको कोष वृद्धि गतिविज्ञानमा धेरै महत्त्वपूर्ण प्रभाव पार्छ, ब्याक्टेरिया कोषहरूको जस्तै। ३२ डिग्री सेल्सियसमा एक घण्टा पछि स्तनधारी कोषहरूमा जीन अभिव्यक्तिमा परिवर्तन र कोषीय संरचनामा परिवर्तन, कोष चक्र प्रगति, mRNA स्थिरता पत्ता लगाउन सकिन्छ। कोषीय वृद्धिलाई प्रत्यक्ष रूपमा असर गर्नुको साथै, तापक्रममा हुने परिवर्तनहरूले मिडियाको pH लाई पनि असर गर्छ, किनकि CO2 को घुलनशीलताले pH लाई परिवर्तन गर्छ (कम तापक्रममा pH बढ्छ)। संवर्धित स्तनधारी कोषहरूले उल्लेखनीय तापक्रम घट्ने सहन सक्छन्। तिनीहरूलाई धेरै दिनको लागि ४ डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गर्न सकिन्छ र -१९६ डिग्री सेल्सियससम्म चिसो सहन सक्छन् (उपयुक्त अवस्थाहरू प्रयोग गरेर)। यद्यपि, तिनीहरूले केही घण्टा भन्दा बढीको लागि सामान्य भन्दा लगभग २ डिग्री सेल्सियस भन्दा माथिको तापक्रम सहन सक्दैनन् र ४० डिग्री सेल्सियस र माथिको तापक्रममा चाँडै मर्नेछन्। परिणामहरूको अधिकतम पुनरुत्पादन क्षमता सुनिश्चित गर्न, कोषहरू जीवित रहे पनि, इन्क्यूबेटर बाहिर कोषहरूको इन्क्युबेशन र ह्यान्डलिङको क्रममा तापक्रमलाई सकेसम्म स्थिर राख्न हेरचाह गर्न आवश्यक छ।
इन्क्यूबेटर भित्र तापक्रम भिन्नताका कारणहरू
तपाईंले याद गर्नुभएको होला कि जब इन्क्यूबेटरको ढोका खोलिन्छ, तापक्रम द्रुत गतिमा ३७ डिग्री सेल्सियसको सेट मानमा झर्छ। सामान्यतया, ढोका बन्द भएको केही मिनेट भित्र तापक्रम पुन: प्राप्ति हुन्छ। वास्तवमा, स्थिर संस्कृतिहरूलाई इन्क्यूबेटरमा सेट तापक्रममा पुन: प्राप्ति हुन समय चाहिन्छ। इन्क्यूबेटर बाहिर उपचार पछि सेल संस्कृतिले तापक्रम पुन: प्राप्ति गर्न लाग्ने समयलाई धेरै कारकहरूले असर गर्न सक्छन्।यी कारकहरू समावेश छन्:
- ▶ कोषहरू इन्क्यूबेटरबाट बाहिर निस्केको समय
- ▶ कोषहरू हुर्काउने फ्लास्कको प्रकार (ज्यामितिले ताप स्थानान्तरणलाई असर गर्छ)
- ▶ इन्क्यूबेटरमा कन्टेनरहरूको संख्या।
- ▶ स्टिल शेल्फसँग फ्लास्कको प्रत्यक्ष सम्पर्कले ताप आदानप्रदान र इष्टतम तापक्रममा पुग्ने गतिलाई असर गर्छ, त्यसैले फ्लास्कको थुप्रोबाट बच्नु र प्रत्येक भाँडो राख्नु राम्रो हुन्छ।
- ▶ सिधै इन्क्यूबेटरको शेल्फमा।
प्रयोग गरिएको कुनै पनि ताजा कन्टेनर र मिडियाको प्रारम्भिक तापक्रमले कोषहरूलाई इष्टतम अवस्थामा पुग्न लाग्ने समयलाई पनि असर गर्नेछ; तिनीहरूको तापक्रम जति कम हुन्छ, त्यति नै लामो समय लाग्छ।
यदि यी सबै कारकहरू समयसँगै परिवर्तन भए भने, तिनीहरूले प्रयोगहरू बीचको परिवर्तनशीलता पनि बढाउनेछन्। यी तापक्रम उतारचढावहरूलाई कम गर्न आवश्यक छ, यदि सबै कुरा नियन्त्रण गर्न सधैं सम्भव छैन भने पनि (विशेष गरी यदि धेरै व्यक्तिहरूले एउटै इन्क्यूबेटर प्रयोग गरिरहेका छन् भने)।
तापक्रम भिन्नता कसरी कम गर्ने र तापक्रम पुनःप्राप्ति समय कसरी कम गर्ने
माध्यमलाई पहिले नै तताएर
केही अनुसन्धानकर्ताहरू मिडियाका सम्पूर्ण बोतलहरूलाई ३७ डिग्री सेल्सियस पानीको नुहाउने ठाउँमा पूर्व-तातो पार्ने बानी परेका छन् ताकि प्रयोग गर्नुअघि यो तापक्रममा ल्याउन सकियोस्। माध्यमलाई इन्क्यूबेटरमा पहिले नै तताउन पनि सम्भव छ जुन केवल मध्यम प्रिहिटिंगको लागि प्रयोग गरिन्छ र सेल कल्चरको लागि होइन, जहाँ माध्यमले अर्को इन्क्यूबेटरमा सेल कल्चरलाई बाधा नपुर्याई इष्टतम तापक्रममा पुग्न सक्छ। तर जहाँसम्म हामीलाई थाहा छ, यो सामान्यतया किफायती खर्च होइन।
इन्क्यूबेटर भित्र
इन्क्यूबेटरको ढोका सकेसम्म कम खोल्नुहोस् र छिटोभन्दा छिटो बन्द गर्नुहोस्। इन्क्यूबेटरमा तापक्रम भिन्नता सिर्जना गर्ने चिसो ठाउँहरूबाट बच्नुहोस्। फ्लास्कहरू बीच हावा परिसंचरण गर्न अनुमति दिन ठाउँ छोड्नुहोस्। इन्क्यूबेटर भित्रका शेल्फहरू छिद्रित गर्न सकिन्छ। यसले राम्रो ताप वितरणको लागि अनुमति दिन्छ किनकि यसले प्वालहरूबाट हावा पार गर्न अनुमति दिन्छ। यद्यपि, प्वालहरूको उपस्थितिले कोशिकाको वृद्धिमा भिन्नता ल्याउन सक्छ, किनभने प्वालहरू भएको क्षेत्र र मेटा भएको क्षेत्र बीच तापमान भिन्नता हुन्छ। यी कारणहरूले गर्दा, यदि तपाईंको प्रयोगहरूलाई कोशिका संस्कृतिको अत्यधिक समान वृद्धि आवश्यक छ भने, तपाईं कल्चर फ्लास्कहरूलाई साना सम्पर्क सतहहरू भएका धातुको समर्थनमा राख्न सक्नुहुन्छ, जुन सामान्यतया नियमित कोशिका संस्कृतिमा आवश्यक हुँदैन।
सेल प्रशोधन समय न्यूनतम गर्दै
कोशिका उपचार प्रक्रियामा खर्च हुने समय कम गर्न, तपाईंलाई आवश्यक छ
- ▶ काम सुरु गर्नु अघि सबै आवश्यक सामग्री र उपकरणहरू व्यवस्थित गर्नुहोस्।
- ▶ छिटो र सहज रूपमा काम गर्नुहोस्, प्रयोगात्मक विधिहरूको अग्रिम समीक्षा गर्नुहोस् ताकि तपाईंका कार्यहरू दोहोरिने र स्वचालित बनून्।
- ▶ वरपरको हावासँग तरल पदार्थको सम्पर्क कम गर्नुहोस्।
- ▶ तपाईंले काम गर्ने सेल कल्चर प्रयोगशालामा स्थिर तापक्रम कायम राख्नुहोस्।
पोस्ट समय: अगस्ट-१८-२०२३