செல் வளர்ப்பில் வெப்பநிலை மாறுபாட்டின் விளைவு
செல் வளர்ப்பில் வெப்பநிலை ஒரு முக்கியமான அளவுருவாகும், ஏனெனில் இது முடிவுகளின் மறுஉருவாக்கத்தை பாதிக்கிறது. 37°C க்கு மேல் அல்லது அதற்குக் கீழே உள்ள வெப்பநிலை மாற்றங்கள், பாக்டீரியா செல்களைப் போலவே, பாலூட்டி செல்களின் செல் வளர்ச்சி இயக்கவியலில் மிகவும் குறிப்பிடத்தக்க விளைவைக் கொண்டுள்ளன. 32ºC இல் ஒரு மணி நேரத்திற்குப் பிறகு பாலூட்டி செல்களில் மரபணு வெளிப்பாட்டில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் மற்றும் செல்லுலார் அமைப்பு, செல் சுழற்சி முன்னேற்றம், mRNA நிலைத்தன்மை ஆகியவற்றில் ஏற்படும் மாற்றங்களைக் கண்டறிய முடியும். செல் வளர்ச்சியை நேரடியாகப் பாதிப்பதுடன், வெப்பநிலையில் ஏற்படும் மாற்றங்களும் ஊடகத்தின் pH ஐ பாதிக்கின்றன, ஏனெனில் CO2 இன் கரைதிறன் pH ஐ மாற்றுகிறது (குறைந்த வெப்பநிலையில் pH அதிகரிக்கிறது). வளர்ப்பு பாலூட்டி செல்கள் குறிப்பிடத்தக்க வெப்பநிலை குறைவை பொறுத்துக்கொள்ள முடியும். அவற்றை பல நாட்களுக்கு 4°C இல் சேமிக்கலாம் மற்றும் -196°C வரை உறைபனியை பொறுத்துக்கொள்ளலாம் (பொருத்தமான நிலைமைகளைப் பயன்படுத்தி). இருப்பினும், அவை இயல்பை விட சுமார் 2°C க்கு மேல் வெப்பநிலையை சில மணிநேரங்களுக்கு மேல் பொறுத்துக்கொள்ள முடியாது, மேலும் 40°C மற்றும் அதற்கு மேல் விரைவாக இறந்துவிடும். செல்கள் உயிர் பிழைத்தாலும், அதிகபட்ச மறுஉருவாக்கத்தை உறுதி செய்ய, அடைகாக்கும் போது மற்றும் இன்குபேட்டருக்கு வெளியே உள்ள செல்களைக் கையாளும் போது வெப்பநிலையை முடிந்தவரை நிலையானதாக பராமரிக்க கவனமாக இருக்க வேண்டும்.
இன்குபேட்டருக்குள் வெப்பநிலை மாறுபாடுகளுக்கான காரணங்கள்
இன்குபேட்டர் கதவு திறக்கப்படும்போது, வெப்பநிலை விரைவாக நிர்ணயிக்கப்பட்ட மதிப்பு 37 °C ஆகக் குறைவதை நீங்கள் கவனித்திருப்பீர்கள். பொதுவாக, கதவு மூடப்பட்ட சில நிமிடங்களுக்குள் வெப்பநிலை மீண்டுவிடும். உண்மையில், இன்குபேட்டரில் நிலையான கலாச்சாரங்கள் நிர்ணயிக்கப்பட்ட வெப்பநிலையை மீட்டெடுக்க நேரம் தேவை. இன்குபேட்டருக்கு வெளியே சிகிச்சைக்குப் பிறகு செல் கலாச்சாரம் வெப்பநிலையை மீண்டும் பெற எடுக்கும் நேரத்தை பல காரணிகள் பாதிக்கலாம்.இந்த காரணிகள் பின்வருமாறு:
- ▶ செல்கள் இன்குபேட்டரை விட்டு வெளியே வந்த நேரம்
- ▶செல்கள் வளர்க்கப்படும் குடுவை வகை (வடிவியல் வெப்ப பரிமாற்றத்தை பாதிக்கிறது)
- ▶இன்குபேட்டரில் உள்ள கொள்கலன்களின் எண்ணிக்கை.
- ▶எஃகு அலமாரியுடன் ஃபிளாஸ்க்குகளின் நேரடித் தொடர்பு வெப்பப் பரிமாற்றத்தையும் உகந்த வெப்பநிலையை அடையும் வேகத்தையும் பாதிக்கிறது, எனவே ஃபிளாஸ்க்குகளின் அடுக்குகளைத் தவிர்த்து ஒவ்வொரு பாத்திரத்தையும் வைப்பது நல்லது.
- ▶நேரடியாக இன்குபேட்டரின் அலமாரியில்.
பயன்படுத்தப்படும் எந்தவொரு புதிய கொள்கலன்கள் மற்றும் ஊடகங்களின் ஆரம்ப வெப்பநிலை, செல்கள் அவற்றின் உகந்த நிலையில் இருக்க எடுக்கும் நேரத்தையும் பாதிக்கும்; அவற்றின் வெப்பநிலை குறைவாக இருந்தால், அது அதிக நேரம் எடுக்கும்.
இந்தக் காரணிகள் அனைத்தும் காலப்போக்கில் மாறினால், அவை சோதனைகளுக்கு இடையிலான மாறுபாட்டையும் அதிகரிக்கும். எல்லாவற்றையும் கட்டுப்படுத்துவது எப்போதும் சாத்தியமில்லை என்றாலும் (குறிப்பாக பலர் ஒரே இன்குபேட்டரைப் பயன்படுத்தினால்) இந்த வெப்பநிலை ஏற்ற இறக்கங்களைக் குறைப்பது அவசியம்.
வெப்பநிலை மாறுபாடுகளைக் குறைப்பது மற்றும் வெப்பநிலை மீட்பு நேரத்தைக் குறைப்பது எப்படி
மீடியத்தை முன்கூட்டியே சூடாக்குவதன் மூலம்
சில ஆராய்ச்சியாளர்கள், முழு மீடியா பாட்டில்களையும் 37 °C நீர் குளியல் நீரில் முன்கூட்டியே சூடாக்கி, பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு இந்த வெப்பநிலைக்கு கொண்டு வருவதை வழக்கமாகக் கொண்டுள்ளனர். செல் வளர்ப்புக்கு அல்லாமல், நடுத்தர வெப்பமாக்கலுக்கு மட்டுமே பயன்படுத்தப்படும் இன்குபேட்டரில் மீடியத்தை முன்கூட்டியே சூடாக்கவும் முடியும், அங்கு மீடியம் மற்றொரு இன்குபேட்டரில் உள்ள செல் கலாச்சாரங்களைத் தொந்தரவு செய்யாமல் உகந்த வெப்பநிலையை அடைய முடியும். ஆனால், நமக்குத் தெரிந்தவரை, இது பொதுவாக ஒரு மலிவு விலை அல்ல.
இன்குபேட்டரின் உள்ளே
இன்குபேட்டர் கதவை முடிந்தவரை குறைவாகத் திறந்து விரைவாக மூடவும். இன்குபேட்டரில் வெப்பநிலை வேறுபாடுகளை உருவாக்கும் குளிர் இடங்களைத் தவிர்க்கவும். காற்று சுற்றுவதற்கு ஃபிளாஸ்க்குகளுக்கு இடையில் இடைவெளி விடுங்கள். இன்குபேட்டரின் உள்ளே உள்ள அலமாரிகளை துளையிடலாம். இது துளைகள் வழியாக காற்று செல்ல அனுமதிப்பதால் சிறந்த வெப்ப விநியோகத்தை அனுமதிக்கிறது. இருப்பினும், துளைகள் இருப்பது செல் வளர்ச்சியில் வேறுபாடுகளுக்கு வழிவகுக்கும், ஏனெனில் துளைகள் உள்ள பகுதிக்கும் மெட்டா உள்ள பகுதிக்கும் இடையே வெப்பநிலை வேறுபாடு உள்ளது. இந்தக் காரணங்களுக்காக, உங்கள் சோதனைகளுக்கு செல் கலாச்சாரத்தின் மிகவும் சீரான வளர்ச்சி தேவைப்பட்டால், வழக்கமான செல் கலாச்சாரத்தில் பொதுவாக அவசியமில்லாத சிறிய தொடர்பு மேற்பரப்புகளைக் கொண்ட உலோக ஆதரவுகளில் நீங்கள் கலாச்சார ஃபிளாஸ்க்குகளை வைக்கலாம்.
செல் செயலாக்க நேரத்தைக் குறைத்தல்
செல் சிகிச்சை செயல்பாட்டில் செலவிடும் நேரத்தைக் குறைக்க, நீங்கள் செய்ய வேண்டியது
- ▶வேலை செய்யத் தொடங்குவதற்கு முன் தேவையான அனைத்து பொருட்கள் மற்றும் கருவிகளையும் ஒழுங்கமைக்கவும்.
- ▶ விரைவாகவும் சீராகவும் வேலை செய்யுங்கள், முன்கூட்டியே சோதனை முறைகளை மதிப்பாய்வு செய்யுங்கள், இதனால் உங்கள் செயல்பாடுகள் மீண்டும் மீண்டும் நிகழும் மற்றும் தானியங்கி முறையில் மாறும்.
- ▶சுற்றுப்புறக் காற்றோடு திரவங்களின் தொடர்பைக் குறைக்கவும்.
- ▶நீங்கள் பணிபுரியும் செல் வளர்ப்பு ஆய்வகத்தில் நிலையான வெப்பநிலையை பராமரிக்கவும்.
இடுகை நேரம்: ஆகஸ்ட்-18-2023