Paano Pumili ng Tamang Shaker Amplitude?
Ano ang amplitude ng isang shaker?
Ang amplitude ng shaker ay ang diameter ng papag sa circular motion, kung minsan ay tinatawag na "oscillation diameter" o "track diameter" na simbolo: Ø. Nag-aalok ang Radobio ng mga karaniwang shaker na may mga amplitude na 3mm, 25mm, 26mm at 50mm,. Available din ang mga customized na shaker na may iba pang laki ng amplitude.
Ano ang Oxygen Transfer Rate (OTR)?
Ang Oxygen Transfer Rate (OTR) ay ang kahusayan ng oxygen na inilipat mula sa atmospera patungo sa likido. Ang mas mataas na halaga ng OTR ay nangangahulugan na mas mataas ang kahusayan sa paglipat ng oxygen.
Epekto ng Amplitude at Bilis ng Pag-ikot
Pareho sa mga salik na ito ang nakakaapekto sa paghahalo ng daluyan sa culture flask. Kung mas mahusay ang paghahalo, mas mahusay ang rate ng paglipat ng oxygen (OTR). Kasunod ng mga alituntuning ito, ang pinakaangkop na amplitude at bilis ng pag-ikot ay maaaring mapili.
Sa pangkalahatan, ang pagpili ng 25mm o 26mm amplitude ay maaaring gamitin bilang isang unibersal na amplitude para sa lahat ng mga aplikasyon ng kultura.
Mga kulturang bacterial, yeast at fungal:
Ang paglipat ng oxygen sa mga shake flasks ay hindi gaanong mahusay kaysa sa mga bioreactor. Ang paglipat ng oxygen ay maaaring ang limiting factor para sa mga shake flask culture sa karamihan ng mga kaso. Ang amplitude ay nauugnay sa laki ng conical flasks: ang mas malalaking flasks ay gumagamit ng mas malalaking amplitude.
Rekomendasyon: 25mm amplitude para sa conical flasks mula 25ml hanggang 2000ml.
50 mm amplitude para sa conical flasks mula 2000 ml hanggang 5000 ml.
Kultura ng Cell:
* Ang kultura ng selula ng mammalian ay medyo mababa ang pangangailangan ng oxygen.
* Para sa 250mL shaker flasks, maaaring magbigay ng sapat na paghahatid ng oxygen sa medyo malawak na hanay ng mga amplitude at bilis (20-50mm amplitude; 100-300rpm).
* Para sa mas malalaking diameter na flasks (Fernbach flasks) inirerekomenda ang amplitude na 50mm.
* Kung gagamitin ang mga disposable culture bag, inirerekomenda ang 50mm amplitude.
Microtiter at deep-well plates:
Para sa microtiter at deep-well plates mayroong dalawang magkaibang paraan para makakuha ng maximum oxygen transfer!
* 50 mm amplitude sa bilis na hindi bababa sa 250 rpm.
* Gumamit ng 3mm amplitude sa 800-1000rpm.
Sa maraming mga kaso, kahit na ang isang makatwirang amplitude ay pinili, ito ay maaaring hindi tumaas ang bioculture volume, dahil ang pagtaas sa volume ay maaaring maimpluwensyahan ng ilang mga kadahilanan. Halimbawa, kung ang isa o dalawa sa sampung mga kadahilanan ay hindi perpekto, kung gayon ang pagtaas ng dami ng kultura ay magiging limitado gaano man kahusay ang iba pang mga kadahilanan, o maaari itong pagtalunan na ang tamang pagpili ng amplitude ay magreresulta sa isang kapansin-pansin na pagtaas sa incubator kung ang tanging limitasyon sa dami ng kultura ay ang paghahatid ng oxygen. Halimbawa, kung ang pinagmumulan ng carbon ay ang naglilimita na kadahilanan, gaano man kahusay ang paglipat ng oxygen, ang nais na dami ng kultura ay hindi makakamit.
Amplitude at Bilis ng Pag-ikot
Ang parehong amplitude at bilis ng pag-ikot ay maaaring magkaroon ng epekto sa paglipat ng oxygen. Kung ang mga cell culture ay lumaki sa napakababang bilis ng pag-ikot (hal., 100 rpm), ang mga pagkakaiba sa amplitude ay may kaunti o walang kapansin-pansing epekto sa paglipat ng oxygen. Upang makamit ang pinakamataas na paglipat ng oxygen, ang unang hakbang ay upang taasan ang bilis ng pag-ikot hangga't maaari, at ang tray ay magiging maayos na balanse para sa bilis. Hindi lahat ng mga cell ay maaaring lumago nang maayos sa mataas na bilis ng mga oscillations, at ang ilang mga cell na sensitibo sa mga puwersa ng paggugupit ay maaaring mamatay mula sa mataas na bilis ng pag-ikot.
Iba pang mga impluwensya
Maaaring magkaroon ng epekto ang iba pang salik sa paglipat ng oxygen:.
* Ang dami ng pagpuno, ang mga conical flasks ay dapat punan ng hindi hihigit sa isang katlo ng kabuuang volume. Kung ang maximum na paglipat ng oxygen ay nais na makamit, punan ng hindi hihigit sa 10%. Huwag kailanman punan hanggang 50%.
* Mga Spoiler: Ang mga Spoiler ay epektibo sa pagpapabuti ng paglipat ng oxygen sa lahat ng uri ng kultura. Inirerekomenda ng ilang mga tagagawa ang paggamit ng mga flasks na "Ultra High Yield". Ang mga spoiler sa mga flasks na ito ay nagpapataas ng liquid friction at ang shaker ay maaaring hindi maabot ang maximum na set speed.
Kaugnayan sa pagitan ng amplitude at bilis
Ang centrifugal force sa isang shaker ay maaaring kalkulahin gamit ang sumusunod na equation
FC = rpm2× amplitude
Mayroong linear na ugnayan sa pagitan ng puwersa ng sentripugal at amplitude: kung gagamit ka ng 25 mm amplitude hanggang sa 50 mm na amplitude (sa parehong bilis), ang puwersa ng sentripugal ay tataas ng isang factor na 2.
Mayroong parisukat na relasyon sa pagitan ng puwersa ng sentripugal at bilis ng pag-ikot.
Kung ang bilis ay nadagdagan ng isang kadahilanan ng 2 (parehong amplitude), ang sentripugal na puwersa ay tumataas ng isang kadahilanan ng 4. Kung ang bilis ay nadagdagan ng isang kadahilanan ng 3, ang sentripugal na puwersa ay tataas ng isang kadahilanan ng 9!
Kung gumamit ka ng amplitude na 25 mm, i-incubate sa isang ibinigay na bilis. Kung nais mong makamit ang parehong puwersa ng sentripugal na may amplitude na 50 mm, ang bilis ng pag-ikot ay dapat kalkulahin bilang square root ng 1/2, kaya dapat mong gamitin ang 70% ng bilis ng pag-ikot upang makamit ang parehong mga kondisyon ng pagpapapisa ng itlog.
Pakitandaan na ang nasa itaas ay isang teoretikal na paraan lamang ng pagkalkula ng puwersa ng sentripugal. Mayroong iba pang mga kadahilanan na nakakaimpluwensya sa mga tunay na aplikasyon. Ang pamamaraang ito ng pagkalkula ay nagbibigay ng tinatayang mga halaga para sa mga layunin ng pagpapatakbo.
Oras ng post: Ene-03-2024