Athari ya mabadiliko ya halijoto kwenye utamaduni wa seli kwenye kinu cha CO2
Halijoto ni kigezo muhimu katika uundaji wa seli kwa sababu huathiri urejeleaji wa matokeo. Mabadiliko ya halijoto juu au chini ya 37°C yana athari kubwa sana kwenye kinetiki ya ukuaji wa seli za mamalia, sawa na ile ya seli za bakteria. Mabadiliko katika usemi wa jeni na marekebisho katika muundo wa seli, mwendelezo wa mzunguko wa seli, na uthabiti wa mRNA yanaweza kugunduliwa katika seli za mamalia baada ya saa moja kwa 32°C. Mbali na kuathiri moja kwa moja ukuaji wa seli, mabadiliko ya halijoto pia huathiri pH ya vyombo vya habari, kwani umumunyifu wa CO2 hubadilisha pH (pH huongezeka kwa halijoto ya chini). Seli za mamalia zilizokuzwa zinaweza kuvumilia kupungua kwa joto kwa kiasi kikubwa. Zinaweza kuhifadhiwa kwa 4°C kwa siku kadhaa na zinaweza kuvumilia kuganda hadi -196°C (kwa kutumia hali inayofaa). Hata hivyo, haziwezi kuvumilia halijoto iliyo juu ya takriban 2°C juu ya kawaida kwa zaidi ya saa chache na zitakufa haraka kwa 40°C na zaidi. Ili kuhakikisha urejeleaji wa juu zaidi wa matokeo, hata kama seli zitaishi, uangalifu unahitaji kuchukuliwa ili kudumisha halijoto iwe sawa iwezekanavyo wakati wa kuanguliwa na kushughulikiwa kwa seli nje ya incubator.
Sababu za mabadiliko ya halijoto ndani ya kiangulio
Utakuwa umegundua kwamba mlango wa incubator unapofunguliwa, halijoto hupungua haraka hadi thamani iliyowekwa ya 37 °C. Kwa ujumla, halijoto itarudi ndani ya dakika chache baada ya mlango kufungwa. Kwa kweli, tamaduni tuli zinahitaji muda wa kurudi kwenye halijoto iliyowekwa kwenye incubator. Mambo kadhaa yanaweza kuathiri muda unaochukua kwa tamaduni ya seli kurejesha halijoto baada ya matibabu nje ya incubator. Mambo haya ni pamoja na:
- ▶muda ambao seli zimetoka kwenye incubator
- ▶aina ya chupa ambayo seli hukua (jiometri huathiri uhamishaji wa joto)
- ▶Idadi ya vyombo kwenye incubator.
- ▶Mguso wa moja kwa moja wa chupa na rafu ya chuma huathiri ubadilishanaji wa joto na kasi ya kufikia halijoto bora, kwa hivyo ni bora kuepuka mirundiko ya chupa na kuweka kila chombo
- ▶ moja kwa moja kwenye rafu ya kifaa cha kuangulia.
Halijoto ya awali ya vyombo na vyombo vyovyote vipya vinavyotumika pia itaathiri muda unaochukua kwa seli kuwa katika hali yao bora; kadiri halijoto yao inavyopungua, ndivyo inavyochukua muda mrefu zaidi.
Ikiwa mambo haya yote yatabadilika baada ya muda, yataongeza pia tofauti kati ya majaribio. Ni muhimu kupunguza mabadiliko haya ya halijoto, hata kama si mara zote inawezekana kudhibiti kila kitu (hasa ikiwa watu kadhaa wanatumia sawa).Kiangulio cha CO2).
Jinsi ya kupunguza tofauti za halijoto na kupunguza muda wa kurejesha halijoto
Kwa kupasha joto kiyoyozi
Baadhi ya watafiti wamezoea kupasha joto chupa nzima za vyombo vya habari katika bafu ya maji yenye nyuzi joto 37 ili kuzifikisha kwenye halijoto hii kabla ya matumizi. Inawezekana pia kupasha joto vyombo vya habari katika kinu cha kupasha joto ambacho hutumika tu kwa ajili ya kupasha joto la wastani na si kwa ajili ya ukuzaji wa seli, ambapo vyombo vya habari vinaweza kufikia halijoto bora bila kuvuruga ukuzaji wa seli katika kinu kingine cha kupasha joto. Lakini hii, kwa kadiri tunavyojua, kwa kawaida si gharama nafuu.
Ndani ya Kifaa cha Kutafutia
Fungua mlango wa incubator kidogo iwezekanavyo na ufunge haraka iwezekanavyo. Epuka sehemu baridi, ambazo husababisha tofauti za halijoto kwenye incubator. Acha nafasi kati ya chupa ili kuruhusu hewa kuzunguka. Rafu zilizo ndani ya incubator zinaweza kutobolewa. Hii inaruhusu usambazaji bora wa joto kwani inaruhusu hewa kupita kwenye mashimo. Hata hivyo, uwepo wa mashimo unaweza kusababisha tofauti katika ukuaji wa seli, kwa sababu kuna tofauti ya halijoto kati ya eneo lenye mashimo na eneo lenye meta. Kwa sababu hizi, ikiwa majaribio yako yanahitaji ukuaji sawa wa utamaduni wa seli, unaweza kuweka chupa za utamaduni kwenye viunga vya chuma vyenye nyuso ndogo za mguso, ambazo kwa kawaida si lazima katika utamaduni wa kawaida wa seli.
Kupunguza Muda wa Usindikaji wa Seli
Ili kupunguza muda unaotumika katika mchakato wa matibabu ya seli, unahitaji
- ▶ Panga vifaa na zana zote muhimu kabla ya kuanza kufanya kazi.
- ▶Fanya kazi haraka na kwa ulaini, ukipitia mbinu za majaribio mapema ili shughuli zako ziwe za kujirudia na otomatiki.
- ▶ Punguza mguso wa vimiminika na hewa iliyoko.
- ▶ Dumisha halijoto isiyobadilika katika maabara ya uundaji wa seli unapofanyia kazi.
Muda wa chapisho: Januari-03-2024