CO2 ইনকিউবেটরে কোষ কালচারের উপর তাপমাত্রার পরিবর্তনের প্রভাব
কোষ কালচারে তাপমাত্রা একটি গুরুত্বপূর্ণ প্যারামিটার, কারণ এটি ফলাফলের পুনরাবৃত্তিযোগ্যতাকে প্রভাবিত করে। ৩৭°C-এর উপরে বা নীচে তাপমাত্রার পরিবর্তন স্তন্যপায়ী কোষের বৃদ্ধির গতিবিদ্যার উপর খুব উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলে, যা ব্যাকটেরিয়া কোষের ক্ষেত্রেও দেখা যায়। ৩২ºC তাপমাত্রায় এক ঘণ্টা রাখার পর স্তন্যপায়ী কোষে জিনের প্রকাশে পরিবর্তন এবং কোষীয় গঠন, কোষ চক্রের অগ্রগতি ও mRNA স্থিতিশীলতার পরিবর্তন শনাক্ত করা যায়। কোষের বৃদ্ধিকে সরাসরি প্রভাবিত করার পাশাপাশি, তাপমাত্রার পরিবর্তন মিডিয়ার pH-কেও প্রভাবিত করে, কারণ CO2-এর দ্রবণীয়তা pH পরিবর্তন করে (কম তাপমাত্রায় pH বৃদ্ধি পায়)। কালচার করা স্তন্যপায়ী কোষ তাপমাত্রার উল্লেখযোগ্য হ্রাস সহ্য করতে পারে। এদেরকে ৪°C তাপমাত্রায় বেশ কয়েকদিন সংরক্ষণ করা যায় এবং -১৯৬°C পর্যন্ত হিমায়িত অবস্থাও সহ্য করতে পারে (উপযুক্ত শর্ত সাপেক্ষে)। তবে, এরা স্বাভাবিকের চেয়ে প্রায় ২°C বেশি তাপমাত্রা কয়েক ঘণ্টার বেশি সহ্য করতে পারে না এবং ৪০°C বা তার বেশি তাপমাত্রায় দ্রুত মারা যায়। ফলাফলের সর্বোচ্চ পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নিশ্চিত করার জন্য, কোষগুলো বেঁচে থাকলেও ইনকিউবেশন চলাকালীন এবং ইনকিউবেটরের বাইরে কোষগুলো নাড়াচাড়া করার সময় তাপমাত্রা যথাসম্ভব স্থির রাখার ব্যাপারে যত্ন নিতে হবে।
ইনকিউবেটরের ভিতরে তাপমাত্রার তারতম্যের কারণগুলি
আপনি নিশ্চয়ই লক্ষ্য করেছেন যে, ইনকিউবেটরের দরজা খুললে তাপমাত্রা দ্রুত কমে নির্ধারিত ৩৭° সেলসিয়াস মানে নেমে আসে। সাধারণত, দরজা বন্ধ করার কয়েক মিনিটের মধ্যেই তাপমাত্রা স্বাভাবিক অবস্থায় ফিরে আসে। প্রকৃতপক্ষে, ইনকিউবেটরের ভেতরে স্থির কালচারগুলোর নির্ধারিত তাপমাত্রায় ফিরে আসতে সময়ের প্রয়োজন হয়। ইনকিউবেটরের বাইরে পরিচর্যার পর একটি সেল কালচারের তাপমাত্রা ফিরে পেতে যে সময় লাগে, তা বেশ কিছু বিষয়ের উপর নির্ভর করে। এই বিষয়গুলো হলো:
- ▶কোষগুলো কতক্ষণ ধরে ইনকিউবেটরের বাইরে রয়েছে
- ▶যে ধরনের ফ্লাস্কে কোষগুলো জন্মানো হয় (জ্যামিতি তাপ স্থানান্তরে প্রভাব ফেলে)
- ▶ইনকিউবেটরে থাকা পাত্রের সংখ্যা।
- স্টিলের তাকের সাথে ফ্লাস্কগুলোর সরাসরি সংস্পর্শ তাপ বিনিময় এবং সর্বোত্তম তাপমাত্রায় পৌঁছানোর গতিকে প্রভাবিত করে, তাই ফ্লাস্কগুলো স্তূপ করে রাখা এড়িয়ে প্রতিটি পাত্রকে নির্দিষ্ট স্থানে রাখাই শ্রেয়।
- ▶সরাসরি ইনকিউবেটরের তাকের উপর।
ব্যবহৃত যেকোনো নতুন পাত্র এবং মিডিয়ার প্রাথমিক তাপমাত্রাও কোষগুলোর সর্বোত্তম অবস্থায় পৌঁছানোর সময়কে প্রভাবিত করে; তাপমাত্রা যত কম হবে, তত বেশি সময় লাগবে।
সময়ের সাথে সাথে যদি এই সমস্ত উপাদান পরিবর্তিত হয়, তবে তা পরীক্ষাগুলোর মধ্যেকার ভিন্নতাও বাড়িয়ে দেবে। এই তাপমাত্রার ওঠানামা কমানো প্রয়োজন, যদিও সবসময় সবকিছু নিয়ন্ত্রণ করা সম্ভব হয় না (বিশেষ করে যদি একাধিক ব্যক্তি একই যন্ত্র ব্যবহার করেন)।CO2 ইনকিউবেটর).
কীভাবে তাপমাত্রার তারতম্য কমানো যায় এবং তাপমাত্রা পুনরুদ্ধারের সময় হ্রাস করা যায়
মাধ্যমটিকে আগে থেকে গরম করে
কিছু গবেষক ব্যবহারের আগে মিডিয়ার পুরো বোতলকে ৩৭° সেলসিয়াস তাপমাত্রার ওয়াটার বাথে রেখে এই তাপমাত্রায় আনার জন্য আগে থেকে গরম করে নিতে অভ্যস্ত। এমন একটি ইনকিউবেটরেও মিডিয়াম আগে থেকে গরম করা সম্ভব, যা শুধুমাত্র মিডিয়াম গরম করার জন্য ব্যবহৃত হয় এবং সেল কালচারের জন্য নয়; সেখানে অন্য ইনকিউবেটরের সেল কালচারে কোনো ব্যাঘাত না ঘটিয়েই মিডিয়ামটি একটি সর্বোত্তম তাপমাত্রায় পৌঁছাতে পারে। কিন্তু আমাদের জানামতে, এটি সাধারণত একটি সাধ্যের মধ্যে খরচ হয়ে থাকে না।
ইনকিউবেটরের ভিতরে
ইনকিউবেটরের দরজা যতটা সম্ভব কম খুলুন এবং যত দ্রুত সম্ভব বন্ধ করুন। ঠান্ডা স্থান (কোল্ড স্পট) এড়িয়ে চলুন, যা ইনকিউবেটরের ভিতরে তাপমাত্রার পার্থক্য তৈরি করে। বাতাস চলাচলের জন্য ফ্লাস্কগুলোর মধ্যে ফাঁকা জায়গা রাখুন। ইনকিউবেটরের ভিতরের তাকগুলো ছিদ্রযুক্ত হতে পারে। এটি তাপের উন্নততর বন্টনে সাহায্য করে, কারণ ছিদ্রগুলোর মধ্য দিয়ে বাতাস চলাচল করতে পারে। তবে, ছিদ্রের উপস্থিতি কোষের বৃদ্ধিতে ভিন্নতা আনতে পারে, কারণ ছিদ্রযুক্ত এলাকা এবং ধাতব এলাকার মধ্যে তাপমাত্রার পার্থক্য থাকে। এই কারণে, যদি আপনার পরীক্ষায় কোষ কালচারের অত্যন্ত সুষম বৃদ্ধি প্রয়োজন হয়, তবে আপনি কালচার ফ্লাস্কগুলোকে ছোট সংস্পর্শ পৃষ্ঠযুক্ত ধাতব সাপোর্টের উপর রাখতে পারেন, যা সাধারণত সাধারণ কোষ কালচারের ক্ষেত্রে প্রয়োজন হয় না।
কোষ প্রক্রিয়াকরণের সময় কমানো
কোষ প্রক্রিয়াকরণে ব্যয়িত সময় কমাতে, আপনাকে যা করতে হবে তা হলো
- কাজ শুরু করার আগে প্রয়োজনীয় সমস্ত উপকরণ ও সরঞ্জাম গুছিয়ে নিন।
- পরীক্ষামূলক পদ্ধতিগুলো আগে থেকে পর্যালোচনা করে দ্রুত ও সাবলীলভাবে কাজ করুন, যাতে আপনার কার্যক্রম পুনরাবৃত্তিমূলক এবং স্বয়ংক্রিয় হয়ে ওঠে।
- ▶পরিবেশের বাতাসের সাথে তরল পদার্থের সংস্পর্শ যথাসম্ভব কমান।
- ▶আপনি যে সেল কালচার ল্যাবে কাজ করেন, সেখানকার তাপমাত্রা স্থির রাখুন।
পোস্ট করার সময়: ০৩-জানুয়ারি-২০২৪