CO2 инкубаторындағы жасуша дақылына температураның өзгеруінің әсері
Температура жасуша өсіруде маңызды параметр болып табылады, себебі ол нәтижелердің қайталануына әсер етеді. 37°C-тан жоғары немесе төмен температураның өзгеруі сүтқоректілер жасушаларының өсу кинетикасына бактериялық жасушаларға ұқсас өте маңызды әсер етеді. Ген экспрессиясының және жасуша құрылымындағы өзгерістердің, жасуша циклінің прогрессиясының, мРНҚ тұрақтылығының өзгерістерін сүтқоректілер жасушаларында 32°C температурада бір сағаттан кейін анықтауға болады. Жасуша өсуіне тікелей әсер етумен қатар, температураның өзгеруі ортаның рН-на да әсер етеді, себебі CO2 ерігіштігі рН-ды өзгертеді (рН төмен температурада артады). Өсірілген сүтқоректілер жасушалары температураның айтарлықтай төмендеуіне шыдай алады. Оларды 4°C температурада бірнеше күн сақтауға болады және -196°C дейін мұздатуға шыдай алады (тиісті жағдайларды қолданғанда). Дегенмен, олар қалыптыдан шамамен 2°C жоғары температураны бірнеше сағаттан артық көтере алмайды және 40°C және одан жоғары температурада тез өледі. Нәтижелердің максималды қайталануын қамтамасыз ету үшін, тіпті жасушалар аман қалса да, инкубация және жасушаларды инкубатордан тыс өңдеу кезінде температураны мүмкіндігінше тұрақты ұстауға тырысу қажет.
Инкубатор ішіндегі температураның ауытқу себептері
Инкубатор есігі ашылған кезде температураның белгіленген мәнге дейін тез төмендейтінін байқаған боларсыз. Жалпы, есік жабылғаннан кейін температура бірнеше минут ішінде қалпына келеді. Шын мәнінде, статикалық дақылдар инкубаторда белгіленген температураға дейін қалпына келу үшін уақытты қажет етеді. Инкубатордан тыс өңдеуден кейін жасуша дақылының температурасын қалпына келтіру уақытына бірқатар факторлар әсер етуі мүмкін. Бұл факторларға мыналар жатады:
- ▶ жасушалардың инкубатордан шыққан уақытының ұзақтығы
- ▶ жасушалар өсірілетін колба түрі (геометрия жылу берілуіне әсер етеді)
- ▶Инкубатордағы контейнерлер саны.
- ▶ Колбалардың болат сөреге тікелей тиюі жылу алмасуға және оңтайлы температураға жету жылдамдығына әсер етеді, сондықтан колбалардың үйінділерін жинамай, әр ыдысты орналастырған дұрыс
- ▶ тікелей инкубатор сөресінде.
Пайдаланылатын кез келген жаңа контейнерлер мен ортаның бастапқы температурасы жасушалардың оңтайлы күйге жету уақытына да әсер етеді; олардың температурасы неғұрлым төмен болса, соғұрлым ұзақ уақыт сақталады.
Егер осы факторлардың барлығы уақыт өте келе өзгерсе, олар эксперименттер арасындағы өзгергіштікті де арттырады. Температураның бұл ауытқуларын азайту қажет, тіпті бәрін бақылау әрқашан мүмкін болмаса да (әсіресе бірнеше адам бірдей әдісті қолданса)CO2 инкубаторы).
Температураның ауытқуын қалай азайтуға және температураны қалпына келтіру уақытын қалай қысқартуға болады
Ортаны алдын ала қыздыру арқылы
Кейбір зерттеушілер ортаны қолданар алдында осы температураға жеткізу үшін 37 °C су моншасында тұтас бөтелкелерді алдын ала жылытуға үйренген. Сондай-ақ, ортаны тек ортаны алдын ала қыздыру үшін қолданылатын, жасуша дақылдары үшін емес инкубаторда алдын ала қыздыруға болады, мұнда орта басқа инкубатордағы жасуша дақылдарын бұзбай оңтайлы температураға жете алады. Бірақ, біз білетіндей, бұл әдетте қолжетімді шығын емес.
Инкубатордың ішінде
Инкубатор есігін мүмкіндігінше аз ашып, тез жабыңыз. Инкубаторда температура айырмашылығын тудыратын суық нүктелерден аулақ болыңыз. Ауа айналымы үшін колбалар арасында бос орын қалдырыңыз. Инкубатор ішіндегі сөрелерді тесуге болады. Бұл ауаның тесіктерден өтуіне мүмкіндік беретіндіктен жылудың жақсы таралуына мүмкіндік береді. Дегенмен, тесіктердің болуы жасушалардың өсуінде айырмашылықтарға әкелуі мүмкін, себебі тесіктері бар аймақ пен мета бар аймақ арасында температура айырмашылығы бар. Осы себептерге байланысты, егер сіздің тәжірибелеріңіз жасуша дақылының біркелкі өсуін қажет етсе, сіз дақыл колбаларын кішірек жанасу беттері бар металл тіректерге орналастыра аласыз, бұл әдеттегі жасуша дақылында қажет емес.
Ұяшықтарды өңдеу уақытын азайту
Жасушаны емдеу процесіне кететін уақытты азайту үшін сізге қажет
- ▶Жұмысты бастамас бұрын барлық қажетті материалдар мен құралдарды дайындаңыз.
- ▶Операцияларыңыз қайталанатын және автоматтандырылған болуы үшін тәжірибелік әдістерді алдын ала қарап, жылдам және бірқалыпты жұмыс істеңіз.
- ▶Сұйықтықтардың қоршаған ауамен жанасуын азайтыңыз.
- ▶Жұмыс істейтін жасуша өсіру зертханасында тұрақты температураны сақтаңыз.
Жарияланған уақыты: 2024 жылғы 3 қаңтар