Pangaruh variasi suhu kana kultur sél dina inkubator CO2
Suhu mangrupikeun parameter anu penting dina kultur sél sabab mangaruhan réproduksibilitas hasil. Parobahan suhu di luhur atanapi di handap 37°C gaduh pangaruh anu signifikan pisan kana kinétika kamekaran sél sél mamalia, sami sareng sél baktéri. Parobahan dina éksprési gén sareng modifikasi dina struktur sél, kamajuan siklus sél, stabilitas mRNA tiasa dideteksi dina sél mamalia saatos hiji jam dina suhu 32ºC. Salian ti mangaruhan langsung kamekaran sél, parobahan suhu ogé mangaruhan pH média, sabab kalarutan CO2 ngarobih pH (pH ningkat dina suhu anu langkung handap). Sél mamalia anu dibudidayakeun tiasa tahan panurunan suhu anu signifikan. Éta tiasa disimpen dina suhu 4°C salami sababaraha dinten sareng tiasa tahan beku dugi ka -196°C (nganggo kaayaan anu pas). Nanging, aranjeunna henteu tiasa tahan suhu di luhur sakitar 2°C di luhur normal salami langkung ti sababaraha jam sareng bakal gancang maot dina suhu 40°C sareng di luhur. Pikeun mastikeun réproduksibilitas hasil anu maksimal, sanaos sél salamet, kedah ati-ati pikeun ngajaga suhu tetep salami inkubasi sareng penanganan sél di luar inkubator.
Alesan pikeun parobahan suhu di jero inkubator
Anjeun bakal perhatikeun yén nalika panto inkubator dibuka, suhu turun gancang ka nilai anu disetel 37 °C. Sacara umum, suhu bakal pulih dina sababaraha menit saatos panto ditutup. Nyatana, kultur statis peryogi waktos pikeun pulih ka suhu anu disetel dina inkubator. Sababaraha faktor tiasa mangaruhan waktos anu diperyogikeun ku kultur sél pikeun kéngingkeun deui suhu saatos dirawat di luar inkubator. Faktor-faktor ieu kalebet:
- ▶lila waktu sél-sél kaluar ti inkubator
- ▶jenis botol tempat sél-sél éta dipelak (géométri mangaruhan perpindahan panas)
- ▶Jumlah wadah dina inkubator.
- ▶Kontak langsung labu jeung rak baja mangaruhan pertukaran panas jeung kecepatan ngahontal suhu optimal, jadi leuwih hade nyingkahan tumpukan labu jeung nempatkeun unggal wadah
- ▶langsung dina rak inkubator.
Suhu awal wadah sareng média anyar anu dianggo ogé bakal mangaruhan waktos anu diperyogikeun ku sél pikeun aya dina kaayaan optimalna; beuki handap suhuna, beuki lami waktos anu diperyogikeun.
Upami sadaya faktor ieu robih kana waktosna, éta ogé bakal ningkatkeun variabilitas antara ékspérimén. Penting pikeun ngaminimalkeun fluktuasi suhu ieu, sanaos henteu salawasna mungkin pikeun ngontrol sadayana (utamina upami sababaraha jalmi nganggo anu samiInkubator CO2).
Kumaha carana ngaminimalkeun variasi suhu sareng ngirangan waktos pamulihan suhu
Ku cara manaskeun heula média
Sababaraha panalungtik biasa manaskeun heula botol média dina cai nu suhuna 37 °C pikeun ngahontal suhu ieu sateuacan dianggo. Bisa ogé manaskeun média dina inkubator anu ngan dipaké pikeun manaskeun média jeung lain pikeun kultur sél, dimana média bisa ngahontal suhu optimal tanpa ngaganggu kultur sél dina inkubator séjén. Tapi ieu, sakumaha anu urang terang, biasana lain biaya anu murah.
Di jero Inkubator
Buka panto inkubator sakeudeung mungkin sareng tutup gancang-gancang. Hindarkeun tempat tiis, anu nyiptakeun béda suhu dina inkubator. Tinggalkeun rohangan antara labu supados hawa tiasa sirkulasi. Rak di jero inkubator tiasa dibolongan. Ieu ngamungkinkeun distribusi panas anu langkung saé sabab ngamungkinkeun hawa ngaliwat liang. Nanging, ayana liang tiasa nyababkeun bédana dina kamekaran sél, sabab aya béda suhu antara daérah anu aya liang sareng daérah anu aya meta. Kusabab kitu, upami ékspérimén anjeun meryogikeun kamekaran kultur sél anu seragam pisan, anjeun tiasa nempatkeun labu kultur dina pangrojong logam kalayan permukaan kontak anu langkung alit, anu biasana henteu diperyogikeun dina kultur sél rutin.
Ngaminimalkeun Waktos Pamrosésan Sél
Pikeun ngaminimalkeun waktos anu dihabiskan dina prosés perawatan sél, anjeun kedah
- ▶Atur sadaya bahan sareng alat anu diperyogikeun sateuacan anjeun ngamimitian damel.
- ▶Damel gancang sareng lancar, marios metode ékspériméntal sateuacanna supados operasi anjeun janten repetitif sareng otomatis.
- ▶Kurangkeun kontak cairan jeung hawa di sabudeureun.
- ▶Jaga suhu anu konstan di laboratorium kultur sél tempat anjeun damel.
Waktos posting: Jan-03-2024