CO2 inkubatorida harorat o'zgarishining hujayra kulturasiga ta'siri
Harorat hujayra kulturasida muhim parametr hisoblanadi, chunki u natijalarning takrorlanishiga ta'sir qiladi. 37°C dan yuqori yoki past harorat o'zgarishi sutemizuvchi hujayralarning hujayra o'sish kinetikasiga, bakterial hujayralarnikiga o'xshash juda sezilarli ta'sir ko'rsatadi. Sutemizuvchi hujayralarda gen ekspressiyasidagi o'zgarishlar va hujayra tuzilishidagi modifikatsiyalar, hujayra siklining rivojlanishi, mRNK barqarorligi 32°C da bir soatdan keyin aniqlanishi mumkin. Hujayra o'sishiga bevosita ta'sir qilishdan tashqari, harorat o'zgarishi muhitning pH qiymatiga ham ta'sir qiladi, chunki CO2 ning eruvchanligi pH ni o'zgartiradi (past haroratlarda pH oshadi). Kulturalangan sutemizuvchi hujayralar haroratning sezilarli darajada pasayishiga bardosh bera oladi. Ularni 4°C da bir necha kun saqlash mumkin va -196°C gacha muzlashga bardosh bera oladi (tegishli sharoitlardan foydalangan holda). Biroq, ular me'yordan taxminan 2°C dan yuqori haroratga bir necha soatdan ortiq bardosh bera olmaydi va 40°C va undan yuqori haroratda tezda nobud bo'ladi. Natijalarning maksimal takrorlanishini ta'minlash uchun, hatto hujayralar omon qolsa ham, inkubatsiya va hujayralarni inkubatordan tashqarida qayta ishlash paytida haroratni iloji boricha doimiy saqlashga e'tibor berish kerak.
Inkubator ichidagi harorat o'zgarishining sabablari
Inkubator eshigi ochilganda, harorat tezda 37 °C gacha pasayib ketishini payqagan bo'lsangiz kerak. Umuman olganda, harorat eshik yopilgandan keyin bir necha daqiqa ichida tiklanadi. Aslida, statik kulturalar inkubatorda belgilangan haroratga qaytishi uchun vaqt talab qiladi. Inkubatordan tashqarida ishlov berilgandan so'ng hujayra kulturasining haroratini tiklash vaqtiga bir qator omillar ta'sir qilishi mumkin. Bu omillar quyidagilarni o'z ichiga oladi:
- ▶hujayralar inkubatordan chiqarilgan vaqt davomiyligi
- ▶ hujayralar o'stiriladigan kolba turi (geometriya issiqlik uzatilishiga ta'sir qiladi)
- ▶Inkubatordagi idishlar soni.
- ▶ Kolbalarning po'lat tokchaga to'g'ridan-to'g'ri tegishi issiqlik almashinuviga va optimal haroratga erishish tezligiga ta'sir qiladi, shuning uchun kolbalar uyumlaridan qochish va har bir idishni joylashtirish yaxshiroqdir
- ▶ to'g'ridan-to'g'ri inkubator javonida.
Ishlatilgan har qanday yangi idishlar va muhitning boshlang'ich harorati ham hujayralarning optimal holatiga kelish vaqtiga ta'sir qiladi; ularning harorati qancha past bo'lsa, shuncha uzoq vaqt talab etiladi.
Agar bu omillarning barchasi vaqt o'tishi bilan o'zgarsa, ular tajribalar orasidagi o'zgaruvchanlikni ham oshiradi. Haroratning bu tebranishlarini minimallashtirish kerak, hatto hamma narsani nazorat qilish har doim ham imkoni bo'lmasa ham (ayniqsa, bir nechta odam bir xil narsadan foydalanayotgan bo'lsa)CO2 inkubatori).
Harorat o'zgarishini qanday kamaytirish va haroratni tiklash vaqtini qisqartirish mumkin
Muhitni oldindan qizdirish orqali
Ba'zi tadqiqotchilar ishlatishdan oldin ushbu haroratga yetguncha butun shisha muhitni 37 °C suv hammomida oldindan qizdirishga odatlanganlar. Shuningdek, muhitni faqat muhitni oldindan qizdirish uchun ishlatiladigan va hujayra kulturasi uchun emas, balki inkubatorda oldindan qizdirish mumkin, bu yerda muhit boshqa inkubatordagi hujayra kulturalarini buzmasdan optimal haroratga yetishi mumkin. Ammo, biz bilganimizdek, bu odatda arzon xarajat emas.
Inkubator ichida
Inkubator eshigini iloji boricha kamroq oching va iloji boricha tezroq yoping. Inkubatorda harorat farqlarini keltirib chiqaradigan sovuq joylardan saqlaning. Havo aylanishi uchun kolbalar orasida bo'sh joy qoldiring. Inkubator ichidagi tokchalar teshilishi mumkin. Bu issiqlikni yaxshiroq taqsimlash imkonini beradi, chunki u havo teshiklardan o'tishiga imkon beradi. Biroq, teshiklarning mavjudligi hujayra o'sishida farqlarga olib kelishi mumkin, chunki teshiklari bo'lgan joy va meta bo'lgan joy o'rtasida harorat farqi mavjud. Shu sabablarga ko'ra, agar sizning tajribalaringiz hujayra kulturasining yuqori darajada bir xil o'sishini talab qilsa, siz kultura kolbalarini odatda oddiy hujayra kulturasida zarur bo'lmagan kichikroq kontakt yuzalari bo'lgan metall tayanchlarga qo'yishingiz mumkin.
Hujayralarni qayta ishlash vaqtini minimallashtirish
Hujayralarni davolash jarayoniga sarflanadigan vaqtni minimallashtirish uchun sizga kerak
- ▶ Ishni boshlashdan oldin barcha kerakli materiallar va vositalarni tartibga soling.
- ▶ Operatsiyalaringiz takrorlanuvchi va avtomatlashtirilgan bo'lishi uchun eksperimental usullarni oldindan ko'rib chiqib, tez va ravon ishlang.
- ▶ Suyuqliklarning atrof-muhit havosi bilan aloqasini minimallashtiring.
- ▶ Ishlayotgan hujayra kulturasi laboratoriyasida doimiy haroratni saqlang.
Joylashtirilgan vaqt: 2024-yil 3-yanvar