Таъсири тағйирёбии ҳарорат ба парвариши ҳуҷайра дар инкубатори CO2
Ҳарорат дар парвариши ҳуҷайра як параметри муҳим аст, зеро он ба такроршавандагии натиҷаҳо таъсир мерасонад. Тағйироти ҳарорат аз 37°C боло ё поёнтар ба кинетикаи афзоиши ҳуҷайраҳои ширхӯрон таъсири хеле назаррас доранд, ба монанди ҳуҷайраҳои бактериявӣ. Тағйирот дар ифодаи ген ва тағйирот дар сохтори ҳуҷайра, пешрафти давраи ҳуҷайра, устувории mRNA-ро дар ҳуҷайраҳои ширхӯрон пас аз як соат дар 32°C муайян кардан мумкин аст. Илова бар таъсири мустақим ба афзоиши ҳуҷайра, тағирот дар ҳарорат инчунин ба рН-и муҳит таъсир мерасонад, зеро ҳалшавандагии CO2 рН-ро тағйир медиҳад (рН дар ҳарорати пасттар меафзояд). Ҳуҷайраҳои ширхӯрони парваришшуда метавонанд коҳиши назарраси ҳароратро таҳаммул кунанд. Онҳоро дар 4°C барои чанд рӯз нигоҳ доштан мумкин аст ва метавонанд ба яхкунӣ то -196°C (бо истифода аз шароити мувофиқ) тоб оранд. Аммо, онҳо наметавонанд ҳарорати аз тақрибан 2°C болотар аз муқаррарӣ барои беш аз чанд соат таҳаммул кунанд ва дар 40°C ва болотар зуд мемиранд. Барои таъмини такроршавандагии максималии натиҷаҳо, ҳатто агар ҳуҷайраҳо зинда монанд, бояд эҳтиёт кард, ки ҳангоми инкубатсия ва коркарди ҳуҷайраҳо берун аз инкубатор ҳарорат то ҳадди имкон доимӣ нигоҳ дошта шавад.
Сабабҳои тағйирёбии ҳарорат дар дохили инкубатор
Шумо мушоҳида кардаед, ки ҳангоми кушода шудани дари инкубатор, ҳарорат зуд ба арзиши муқарраршудаи 37 °C паст мешавад. Умуман, ҳарорат дар давоми чанд дақиқа пас аз баста шудани дар барқарор мешавад. Дар асл, фарҳангҳои статикӣ барои барқарор шудан ба ҳарорати муқарраршуда дар инкубатор вақт лозиманд. Як қатор омилҳо метавонанд ба вақти барқарор шудани ҳарорат барои фарҳанги ҳуҷайра пас аз коркард берун аз инкубатор таъсир расонанд. Ин омилҳо инҳоянд:
- ▶ давомнокии вақти берун будани ҳуҷайраҳо аз инкубатор
- ▶ навъи колбае, ки дар он ҳуҷайраҳо парвариш карда мешаванд (геометрия ба интиқоли гармӣ таъсир мерасонад)
- ▶ Шумораи зарфҳо дар инкубатор.
- ▶Тамоси мустақими колбаҳо бо рафи пӯлодӣ ба мубодилаи гармӣ ва суръати расидан ба ҳарорати оптималӣ таъсир мерасонад, аз ин рӯ беҳтар аст, ки аз ҷамъ кардани колбаҳо худдорӣ кунед ва ҳар як зарфро ба таври мувофиқ ҷойгир кунед.
- ▶мустақиман дар рафи инкубатор.
Ҳарорати ибтидоии ҳама гуна зарфҳо ва муҳити тозаи истифодашуда инчунин ба вақти зарурӣ барои дар ҳолати оптималии ҳуҷайраҳо қарор гирифтан таъсир мерасонад; ҳар қадар ҳарорати онҳо пасттар бошад, ҳамон қадар вақти бештар лозим мешавад.
Агар ҳамаи ин омилҳо бо мурури замон тағйир ёбанд, онҳо инчунин тағйирпазирии байни таҷрибаҳоро зиёд мекунанд. Зарур аст, ки ин ноустувории ҳарорат ба ҳадди ақал расонида шавад, ҳатто агар назорати ҳама чиз на ҳамеша имконпазир бошад (хусусан агар якчанд нафар аз як чиз истифода баранд).Инкубатори CO2).
Чӣ гуна тағирёбии ҳароратро кам кардан ва вақти барқароршавии ҳароратро кам кардан мумкин аст
Бо гарм кардани муҳити атроф
Баъзе муҳаққиқон одат кардаанд, ки шишаҳои пурраи муҳитро дар ваннаи оби 37°C пешакӣ гарм кунанд, то онҳоро пеш аз истифода ба ин ҳарорат расонанд. Инчунин имкон дорад, ки муҳитро дар инкубаторе, ки танҳо барои гармкунии пешакӣ истифода мешавад ва на барои парвариши ҳуҷайра истифода мешавад, пешакӣ гарм кунед, ки дар он муҳит метавонад ба ҳарорати оптималӣ бидуни халалдор кардани парвариши ҳуҷайра дар инкубатори дигар бирасад. Аммо ин, то ҷое ки мо медонем, одатан хароҷоти дастрас нест.
Дар дохили инкубатор
Дари инкубаторро то ҳадди имкон кам кушоед ва онро зуд пӯшед. Аз нуқтаҳои хунук, ки дар инкубатор фарқияти ҳароратро ба вуҷуд меоранд, худдорӣ кунед. Байни колбаҳо ҷой гузоред, то ҳаво гардиш кунад. Рафҳои дохили инкубатор метавонанд сӯрох карда шаванд. Ин имкон медиҳад, ки гармӣ беҳтар тақсим карда шавад, зеро ҳаво аз сӯрохиҳо гузарад. Аммо, мавҷудияти сӯрохиҳо метавонад ба фарқиятҳо дар афзоиши ҳуҷайра оварда расонад, зеро байни минтақаи сӯрохиҳо ва минтақаи дорои мета фарқияти ҳарорат вуҷуд дорад. Аз ин сабабҳо, агар таҷрибаҳои шумо афзоиши хеле якхелаи фарҳанги ҳуҷайраро талаб кунанд, шумо метавонед колбаҳои фарҳангиро дар такягоҳҳои металлӣ бо сатҳҳои хурдтари тамос ҷойгир кунед, ки одатан дар фарҳанги муқаррарии ҳуҷайра зарур нестанд.
Кам кардани вақти коркарди ҳуҷайраҳо
Барои кам кардани вақти сарфшуда дар раванди табобати ҳуҷайраҳо, шумо бояд
- ▶ Пеш аз оғози кор, ҳамаи мавод ва асбобҳои заруриро омода кунед.
- ▶ Зуд ва бе мушкил кор кунед, усулҳои таҷрибавиро пешакӣ аз назар гузаронед, то амалиётҳои шумо такроршаванда ва автоматӣ шаванд.
- ▶Тамос бо моеъҳоро бо ҳавои атроф ба ҳадди ақалл кам кунед.
- ▶ Дар лабораторияи парвариши ҳуҷайра, ки дар он кор мекунед, ҳарорати доимиро нигоҳ доред.
Вақти нашр: 03 январи соли 2024