CO2 इनक्यूबेटर में कोशिका संवर्धन पर तापमान भिन्नता का प्रभाव
कोशिका संवर्धन में तापमान एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है क्योंकि यह परिणामों की पुनरुत्पादकता को प्रभावित करता है। 37°C से ऊपर या नीचे तापमान परिवर्तन स्तनधारी कोशिकाओं की वृद्धि गति पर जीवाणु कोशिकाओं के समान ही महत्वपूर्ण प्रभाव डालते हैं। 32°C पर एक घंटे के बाद स्तनधारी कोशिकाओं में जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन, कोशिकीय संरचना में संशोधन, कोशिका चक्र की प्रगति और mRNA स्थिरता का पता लगाया जा सकता है। कोशिका वृद्धि को सीधे प्रभावित करने के अलावा, तापमान में परिवर्तन माध्यम के pH को भी प्रभावित करते हैं, क्योंकि CO2 की घुलनशीलता pH को बदल देती है (कम तापमान पर pH बढ़ता है)। संवर्धित स्तनधारी कोशिकाएं तापमान में काफी कमी सहन कर सकती हैं। इन्हें 4°C पर कई दिनों तक संग्रहित किया जा सकता है और उपयुक्त परिस्थितियों में -196°C तक जमने को सहन कर सकती हैं। हालांकि, वे सामान्य तापमान से लगभग 2°C अधिक तापमान को कुछ घंटों से अधिक सहन नहीं कर सकती हैं और 40°C या उससे अधिक तापमान पर जल्दी मर जाती हैं। परिणामों की अधिकतम पुनरुत्पादकता सुनिश्चित करने के लिए, भले ही कोशिकाएं जीवित रहें, इनक्यूबेशन के दौरान और इनक्यूबेटर के बाहर कोशिकाओं को संभालने के दौरान तापमान को यथासंभव स्थिर बनाए रखने का ध्यान रखना आवश्यक है।
इनक्यूबेटर के अंदर तापमान में उतार-चढ़ाव के कारण
आपने देखा होगा कि जब इनक्यूबेटर का दरवाजा खोला जाता है, तो तापमान तेजी से गिरकर 37 डिग्री सेल्सियस के निर्धारित मान तक पहुँच जाता है। सामान्यतः, दरवाजा बंद करने के कुछ ही मिनटों के भीतर तापमान फिर से सामान्य हो जाता है। वास्तव में, स्थिर कल्चर को इनक्यूबेटर में निर्धारित तापमान तक पहुँचने में समय लगता है। इनक्यूबेटर के बाहर उपचार के बाद सेल कल्चर को तापमान पुनः प्राप्त करने में लगने वाले समय को कई कारक प्रभावित कर सकते हैं। इन कारकों में शामिल हैं:
- ▶ कोशिकाओं को इनक्यूबेटर से बाहर रखने की अवधि
- ▶ जिस प्रकार के फ्लास्क में कोशिकाओं को उगाया जाता है (ज्यामिति ऊष्मा स्थानांतरण को प्रभावित करती है)
- ▶इनक्यूबेटर में कंटेनरों की संख्या।
- स्टील शेल्फ के साथ फ्लास्क का सीधा संपर्क ऊष्मा विनिमय और इष्टतम तापमान तक पहुँचने की गति को प्रभावित करता है, इसलिए फ्लास्कों को एक के ऊपर एक रखने से बचना और प्रत्येक बर्तन को अलग-अलग रखना बेहतर है।
- ▶ सीधे इनक्यूबेटर के शेल्फ पर।
उपयोग किए जाने वाले किसी भी नए कंटेनर और माध्यम का प्रारंभिक तापमान भी कोशिकाओं को उनकी इष्टतम स्थिति में पहुंचने में लगने वाले समय को प्रभावित करेगा; उनका तापमान जितना कम होगा, उतना ही अधिक समय लगेगा।
यदि ये सभी कारक समय के साथ बदलते हैं, तो प्रयोगों के बीच भिन्नता भी बढ़ जाएगी। तापमान में होने वाले इन उतार-चढ़ावों को कम करना आवश्यक है, भले ही हर चीज को नियंत्रित करना हमेशा संभव न हो (विशेषकर यदि कई लोग एक ही उपकरण का उपयोग कर रहे हों)।CO2 इनक्यूबेटर).
तापमान में होने वाले उतार-चढ़ाव को कैसे कम किया जाए और तापमान को सामान्य स्थिति में लाने में लगने वाले समय को कैसे घटाया जाए
माध्यम को पहले से गर्म करके
कुछ शोधकर्ता मीडिया की पूरी बोतलों को उपयोग से पहले 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर गर्म करने के आदी हैं। माध्यम को केवल माध्यम को गर्म करने के लिए उपयोग किए जाने वाले इनक्यूबेटर में भी पहले से गर्म किया जा सकता है, न कि कोशिका संवर्धन के लिए। इससे माध्यम दूसरे इनक्यूबेटर में चल रहे कोशिका संवर्धनों को प्रभावित किए बिना इष्टतम तापमान तक पहुँच जाता है। लेकिन जहाँ तक हमें जानकारी है, यह आमतौर पर एक किफायती खर्च नहीं होता है।
इनक्यूबेटर के अंदर
इनक्यूबेटर का दरवाज़ा जितना हो सके कम खोलें और जितनी जल्दी हो सके बंद कर दें। ठंडे स्थानों से बचें, क्योंकि ये इनक्यूबेटर में तापमान का अंतर पैदा करते हैं। हवा के संचार के लिए फ्लास्कों के बीच जगह छोड़ें। इनक्यूबेटर के अंदर की अलमारियों में छेद हो सकते हैं। इससे ऊष्मा का बेहतर वितरण होता है क्योंकि हवा छेदों से होकर गुजरती है। हालांकि, छेदों की उपस्थिति से कोशिका वृद्धि में अंतर आ सकता है, क्योंकि छेदों वाले क्षेत्र और धातु वाले क्षेत्र के तापमान में अंतर होता है। इन कारणों से, यदि आपके प्रयोगों में कोशिका संवर्धन की अत्यधिक एकसमान वृद्धि की आवश्यकता है, तो आप संवर्धन फ्लास्कों को कम संपर्क सतहों वाले धातु के आधारों पर रख सकते हैं, जो आमतौर पर नियमित कोशिका संवर्धन में आवश्यक नहीं होते हैं।
कोशिका प्रसंस्करण समय को न्यूनतम करना
सेल ट्रीटमेंट प्रक्रिया में लगने वाले समय को कम करने के लिए, आपको निम्नलिखित करने की आवश्यकता है:
- ▶काम शुरू करने से पहले सभी आवश्यक सामग्री और औजारों को व्यवस्थित कर लें।
- ▶तेजी से और सुचारू रूप से काम करें, प्रयोगात्मक विधियों की पहले से समीक्षा करें ताकि आपके संचालन दोहरावदार और स्वचालित हो जाएं।
- ▶तरल पदार्थों का आसपास की हवा से संपर्क कम से कम करें।
- ▶आप जिस सेल कल्चर लैब में काम करते हैं, वहां तापमान को स्थिर बनाए रखें।
पोस्ट करने का समय: 3 जनवरी 2024