Epekto sa pagkalainlain sa temperatura sa kultura sa selula sa usa ka incubator sa CO2
Ang temperatura usa ka importante nga parametro sa cell culture tungod kay kini makaapekto sa reproducibility sa mga resulta. Ang mga pagbag-o sa temperatura nga labaw o ubos sa 37°C adunay dakong epekto sa kinetics sa pagtubo sa selula sa mga selula sa mammalian, susama sa mga selula sa bakterya. Ang mga pagbag-o sa gene expression ug mga pagbag-o sa istruktura sa selula, pag-uswag sa siklo sa selula, ug kalig-on sa mRNA makita sa mga selula sa mammalian pagkahuman sa usa ka oras sa 32ºC. Gawas pa sa direktang pag-apekto sa pagtubo sa selula, ang mga pagbag-o sa temperatura makaapekto usab sa pH sa media, tungod kay ang solubility sa CO2 nag-usab sa pH (ang pH motaas sa mas ubos nga temperatura). Ang mga gikultura nga selula sa mammalian makaagwanta sa dakong pagkunhod sa temperatura. Mahimo kini tipigan sa 4 °C sulod sa pipila ka adlaw ug makaagwanta sa pagyelo hangtod sa -196 °C (gamit ang angay nga mga kondisyon). Bisan pa, dili nila maagwanta ang mga temperatura nga labaw sa mga 2 °C labaw sa normal sulod sa sobra sa pipila ka oras ug dali nga mamatay sa 40 °C pataas. Aron masiguro ang labing taas nga reproducibility sa mga resulta, bisan kung mabuhi ang mga selula, kinahanglan nga mag-amping aron mapadayon ang temperatura nga kanunay kutob sa mahimo sa panahon sa incubation ug pagdumala sa mga selula sa gawas sa incubator.
Mga hinungdan sa pag-usab-usab sa temperatura sulod sa incubator
Imong namatikdan nga kon ablihan ang pultahan sa incubator, ang temperatura dali nga moubos ngadto sa gitakdang kantidad nga 37 °C. Sa kinatibuk-an, ang temperatura mobalik sulod sa pipila ka minuto human masirado ang pultahan. Sa tinuod lang, ang mga static culture nagkinahanglan og panahon aron mobalik sa gitakdang temperatura sa incubator. Daghang mga butang ang makaapekto sa oras nga gikinahanglan aron ang usa ka cell culture mobalik sa temperatura human sa pagtambal sa gawas sa incubator. Kini nga mga butang naglakip sa:
- ▶ang gidugayon sa panahon nga ang mga selula wala na sa incubator
- ▶ang klase sa flask diin gipatubo ang mga selula (ang geometry makaapekto sa pagbalhin sa kainit)
- ▶Gidaghanon sa mga sudlanan sa incubator.
- ▶Ang direktang pagdikit sa mga flask sa steel shelf makaapekto sa pagbayloay og kainit ug sa katulin sa pagkab-ot sa labing maayong temperatura, busa mas maayo nga likayan ang pagtapok sa mga flask ug ibutang ang matag sudlanan
- ▶direkta sa estante sa incubator.
Ang inisyal nga temperatura sa bisan unsang presko nga mga sudlanan ug media nga gigamit makaapekto usab sa oras nga gikinahanglan aron ang mga selula makaabot sa ilang labing maayo nga kahimtang; kon mas ubos ang ilang temperatura, mas dugay kini nga mokabat.
Kon kining tanan nga mga hinungdan mausab sa paglabay sa panahon, kini usab makadugang sa pagkalainlain tali sa mga eksperimento. Gikinahanglan nga maminusan kini nga mga pag-usab-usab sa temperatura, bisan kung dili kanunay posible nga makontrol ang tanan (ilabi na kung daghang mga tawo ang naggamit sa parehas nga butang).Incubator sa CO2).
Unsaon pagpakunhod sa mga pagbag-o sa temperatura ug pagpakunhod sa oras sa pagbawi gikan sa temperatura
Pinaagi sa pagpainit daan sa medium
Naanad na ang ubang mga tigdukiduki sa pagpainit daan sa tibuok botelya sa media sa 37 °C nga water bath aron moabot kini sa temperatura nga gusto nila gamiton. Posible usab nga ipainit daan ang medium sa usa ka incubator nga gigamit lang para sa pagpainit daan sa medium ug dili para sa cell culture, diin ang medium makaabot sa labing maayong temperatura nga dili makabalda sa cell cultures sa laing incubator. Apan kini, sa atong nahibaloan, kasagaran dili barato nga gasto.
Sulod sa Incubator
Ablihi ang pultahan sa incubator kutob sa mahimo ug isira kini dayon. Likayi ang mga bugnaw nga lugar, nga makamugna og kalainan sa temperatura sa incubator. Pagbilin og espasyo taliwala sa mga flask aron ang hangin makasirkular. Ang mga estante sa sulod sa incubator mahimong mabuslotan. Kini nagtugot sa mas maayong pag-apod-apod sa kainit tungod kay kini nagtugot sa hangin nga moagi sa mga lungag. Bisan pa, ang presensya sa mga lungag mahimong mosangpot sa mga kalainan sa pagtubo sa selula, tungod kay adunay kalainan sa temperatura tali sa lugar nga adunay mga lungag ug sa lugar nga adunay meta. Tungod niini nga mga hinungdan, kung ang imong mga eksperimento nanginahanglan og parehas nga pagtubo sa cell culture, mahimo nimong ibutang ang mga culture flask sa mga metal nga suporta nga adunay mas gagmay nga mga contact surface, nga kasagaran dili kinahanglan sa naandan nga cell culture.
Pagminus sa Oras sa Pagproseso sa Cell
Aron maminusan ang oras nga gigugol sa proseso sa pagtambal sa selula, kinahanglan nimo
- ▶Andama ang tanang gikinahanglan nga mga materyales ug himan sa dili pa magsugod sa pagtrabaho.
- ▶Pagtrabaho nga paspas ug hapsay, ribyuha daan ang mga pamaagi sa eksperimento aron ang imong mga operasyon mahimong balik-balik ug awtomatiko.
- ▶Minimum ang pagkontak sa mga likido sa hangin sa palibot.
- ▶Hupti nga kanunay ang temperatura sa cell culture lab diin ka nagtrabaho.
Oras sa pag-post: Enero-03-2024