CO2 இன்குபேட்டரில் செல் வளர்ப்பில் வெப்பநிலை மாறுபாட்டின் விளைவு
செல் வளர்ப்பில் வெப்பநிலை ஒரு முக்கியமான காரணியாகும், ஏனெனில் அது முடிவுகளின் மீள் உருவாக்கத்தன்மையை பாதிக்கிறது. பாக்டீரியா செல்களைப் போலவே, 37°C-க்கு மேலேயோ அல்லது கீழேயோ ஏற்படும் வெப்பநிலை மாற்றங்கள், பாலூட்டி செல்களின் செல் வளர்ச்சி இயக்கவியலில் மிக முக்கியமான விளைவை ஏற்படுத்துகின்றன. 32°C வெப்பநிலையில் ஒரு மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, பாலூட்டி செல்களில் மரபணு வெளிப்பாட்டில் ஏற்படும் மாற்றங்கள், செல் கட்டமைப்பில் ஏற்படும் மாற்றங்கள், செல் சுழற்சி முன்னேற்றம், mRNA நிலைத்தன்மை ஆகியவற்றைக் கண்டறிய முடியும். செல் வளர்ச்சியை நேரடியாகப் பாதிப்பதுடன், வெப்பநிலை மாற்றங்கள் ஊடகத்தின் pH மதிப்பையும் பாதிக்கின்றன, ஏனெனில் CO2-வின் கரைதிறன் pH மதிப்பை மாற்றுகிறது (குறைந்த வெப்பநிலையில் pH மதிப்பு அதிகரிக்கிறது). வளர்க்கப்பட்ட பாலூட்டி செல்கள் குறிப்பிடத்தக்க வெப்பநிலை குறைவுகளைத் தாங்கிக்கொள்ளும். அவற்றை 4°C வெப்பநிலையில் பல நாட்களுக்குச் சேமித்து வைக்கலாம் மற்றும் -196°C வரை உறைவதையும் (பொருத்தமான நிபந்தனைகளைப் பயன்படுத்தி) தாங்கிக்கொள்ளும். இருப்பினும், சாதாரண வெப்பநிலையை விட சுமார் 2°C அதிகமான வெப்பநிலையை சில மணிநேரங்களுக்கு மேல் அவற்றால் தாங்க முடியாது, மேலும் 40°C மற்றும் அதற்கு மேற்பட்ட வெப்பநிலையில் அவை விரைவாக இறந்துவிடும். முடிவுகளின் அதிகபட்ச மீள்நிகழ்வை உறுதி செய்வதற்காக, செல்கள் உயிர் பிழைத்தாலும் கூட, அடைகாக்கும் போதும் மற்றும் அடைகாப்பானுக்கு வெளியே செல்களைக் கையாளும் போதும் வெப்பநிலையை முடிந்தவரை சீராகப் பராமரிக்கக் கவனம் செலுத்த வேண்டும்.
இன்குபேட்டரின் உள்ளே வெப்பநிலை மாறுபாடுகளுக்கான காரணங்கள்
இன்குபேட்டரின் கதவைத் திறக்கும்போது, வெப்பநிலை 37 °C என நிர்ணயிக்கப்பட்ட மதிப்பிற்கு வேகமாக குறைவதை நீங்கள் கவனித்திருப்பீர்கள். பொதுவாக, கதவை மூடிய சில நிமிடங்களுக்குள் வெப்பநிலை இயல்பு நிலைக்குத் திரும்பிவிடும். உண்மையில், இன்குபேட்டரில் உள்ள நிலையான செல் வளர்ப்புகள், நிர்ணயிக்கப்பட்ட வெப்பநிலையை மீண்டும் அடைய நேரம் தேவைப்படுகிறது. இன்குபேட்டருக்கு வெளியே ஒரு செல் வளர்ப்பு செயல்முறைக்குப் பிறகு, அது வெப்பநிலையை மீண்டும் பெறுவதற்கு எடுக்கும் நேரத்தை பல காரணிகள் பாதிக்கலாம். இந்தக் காரணிகளில் அடங்குபவை:
- ▶செல்கள் இன்குபேட்டருக்கு வெளியே இருந்த கால அளவு
- ▶செல்கள் வளர்க்கப்படும் குடுவையின் வகை (வடிவமைப்பு வெப்பப் பரிமாற்றத்தைப் பாதிக்கிறது)
- ▶ இன்குபேட்டரில் உள்ள கொள்கலன்களின் எண்ணிக்கை.
- ▶குடுவைகள் எஃகு அலமாரியுடன் நேரடியாகத் தொடர்பு கொள்வது வெப்பப் பரிமாற்றத்தையும் உகந்த வெப்பநிலையை அடையும் வேகத்தையும் பாதிக்கிறது, எனவே குடுவைகளை ஒன்றன் மேல் ஒன்றாக அடுக்கி வைப்பதைத் தவிர்த்து, ஒவ்வொரு குடுவையையும் தனித்தனியாக வைப்பது நல்லது.
- ▶ இன்குபேட்டரின் அலமாரியில் நேரடியாக.
பயன்படுத்தப்படும் புதிய கொள்கலன்கள் மற்றும் ஊடகங்களின் ஆரம்ப வெப்பநிலையும், செல்கள் அவற்றின் உகந்த நிலையை அடைய எடுக்கும் நேரத்தைப் பாதிக்கும்; அவற்றின் வெப்பநிலை குறைவாக இருந்தால், இதற்கு அதிக நேரம் எடுக்கும்.
இந்தக் காரணிகள் அனைத்தும் காலப்போக்கில் மாறினால், அவை சோதனைகளுக்கு இடையேயான மாறுபாட்டையும் அதிகரிக்கும். எல்லாவற்றையும் எப்போதும் கட்டுப்படுத்த முடியாவிட்டாலும் (குறிப்பாகப் பல பேர் ஒரே கருவியைப் பயன்படுத்தும்போது), இந்த வெப்பநிலை ஏற்ற இறக்கங்களைக் குறைப்பது அவசியமாகும்.CO2 இன்குபேட்டர்).
வெப்பநிலை மாறுபாடுகளைக் குறைப்பது மற்றும் வெப்பநிலை மீட்சி நேரத்தைக் குறைப்பது எப்படி
ஊடகத்தை முன்கூட்டியே சூடாக்குவதன் மூலம்
சில ஆராய்ச்சியாளர்கள், ஊடகக் குப்பிகள் முழுவதையும் பயன்படுத்துவதற்கு முன்பு 37 °C நீர்த் தொட்டியில் வைத்து அந்த வெப்பநிலைக்குக் கொண்டுவருவதை வழக்கமாகக் கொண்டுள்ளனர். செல் வளர்ப்பிற்குப் பயன்படுத்தாமல், ஊடகத்தை முன்கூட்டியே சூடாக்குவதற்கு மட்டுமே பயன்படுத்தப்படும் ஒரு இன்குபேட்டரில் ஊடகத்தை முன்கூட்டியே சூடாக்குவதும் சாத்தியமே. இதன் மூலம், மற்றொரு இன்குபேட்டரில் உள்ள செல் வளர்ப்புகளைத் தொந்தரவு செய்யாமல், ஊடகம் உகந்த வெப்பநிலையை அடைய முடியும். ஆனால், நமக்குத் தெரிந்தவரை, இது பொதுவாக கட்டுப்படியாகக்கூடிய செலவாக இருப்பதில்லை.
இன்குபேட்டரின் உள்ளே
இன்குபேட்டரின் கதவை முடிந்தவரை குறைவாகத் திறந்து, முடிந்தவரை விரைவாக மூடவும். இன்குபேட்டரில் வெப்பநிலை வேறுபாடுகளை உருவாக்கும் குளிர் பகுதிகளைத் தவிர்க்கவும். காற்று சுழற்சிக்கு இடமளிக்க, குடுவைகளுக்கு இடையில் இடைவெளி விடவும். இன்குபேட்டரின் உள்ளே உள்ள அலமாரிகளில் துளைகள் இடப்பட்டிருக்கலாம். இது, துளைகள் வழியாகக் காற்று செல்ல அனுமதிப்பதால், சிறந்த வெப்பப் பரவலுக்கு வழிவகுக்கிறது. இருப்பினும், துளைகள் உள்ள பகுதிக்கும் உலோகம் உள்ள பகுதிக்கும் இடையில் வெப்பநிலை வேறுபாடு இருப்பதால், துளைகள் இருப்பது செல் வளர்ச்சியில் வேறுபாடுகளுக்கு வழிவகுக்கும். இந்தக் காரணங்களுக்காக, உங்கள் சோதனைகளுக்கு செல் வளர்ப்பின் மிகவும் சீரான வளர்ச்சி தேவைப்பட்டால், வழக்கமான செல் வளர்ப்பில் பொதுவாகத் தேவையில்லாத, சிறிய தொடர்பு பரப்புகளைக் கொண்ட உலோகத் தாங்கிகளின் மீது வளர்ப்புக் குடுவைகளை நீங்கள் வைக்கலாம்.
செல் செயலாக்க நேரத்தைக் குறைத்தல்
செல் சிகிச்சை செயல்முறையில் செலவிடப்படும் நேரத்தைக் குறைக்க, நீங்கள் செய்ய வேண்டியது என்னவென்றால்
- ▶வேலையைத் தொடங்குவதற்கு முன், தேவையான அனைத்துப் பொருட்களையும் கருவிகளையும் ஒழுங்கமைத்துக் கொள்ளுங்கள்.
- ▶உங்கள் செயல்பாடுகள் திரும்பத் திரும்பச் செய்யக்கூடியதாகவும் தானியங்குமயமாகவும் ஆவதற்கு, சோதனை முறைகளை முன்கூட்டியே மதிப்பாய்வு செய்து, விரைவாகவும் சீராகவும் செயல்படுங்கள்.
- ▶திரவங்கள் சுற்றுப்புறக் காற்றுடன் தொடர்புகொள்வதைக் குறைக்கவும்.
- ▶நீங்கள் பணிபுரியும் செல் வளர்ப்பு ஆய்வகத்தில் நிலையான வெப்பநிலையைப் பராமரிக்கவும்.
பதிவிட்ட நேரம்: ஜனவரி-03-2024