中文
تأثیر تغییر دما بر کشت سلول
دما یک پارامتر مهم در کشت سلول است زیرا بر تکرارپذیری نتایج تأثیر می گذارد. تغییرات دما بالاتر یا زیر 37 درجه سانتیگراد تأثیر بسیار قابل توجهی در سینتیک رشد سلول سلولهای پستانداران ، مشابه سلول های باکتریایی دارد. تغییر در بیان ژن و تغییرات در ساختار سلولی ، پیشرفت چرخه سلولی ، پایداری mRNA در سلولهای پستانداران پس از یک ساعت در دمای 32 درجه سانتیگراد قابل تشخیص است. علاوه بر تأثیر مستقیم بر رشد سلول ، تغییرات دما نیز بر pH رسانه تأثیر می گذارد ، زیرا حلالیت CO2 pH را تغییر می دهد (pH در دماهای پایین تر افزایش می یابد). سلولهای پستانداران کشت شده می توانند کاهش دما قابل توجهی را تحمل کنند. آنها می توانند برای چند روز در 4 درجه سانتیگراد ذخیره شوند و می توانند انجماد را تا -196 درجه سانتیگراد (با استفاده از شرایط مناسب) تحمل کنند. با این حال ، آنها نمی توانند دمای بالاتر از حدود 2 درجه سانتیگراد بالاتر از حد معمول را برای بیش از چند ساعت تحمل کنند و به سرعت در دمای 40 درجه سانتیگراد و بالاتر خواهند مرد. برای اطمینان از حداکثر تکرارپذیری نتایج ، حتی اگر سلول ها زنده بمانند ، باید مراقب باشید تا دمای تا حد امکان در طول جوجه کشی و کنترل سلولهای خارج از جوجه کشی حفظ شود.
دلایل تغییر دما در داخل انکوباتور
متوجه خواهید شد که وقتی درب انکوباتور باز می شود ، دما به سرعت به مقدار تعیین شده 37 درجه سانتیگراد کاهش می یابد. به طور کلی ، درجه حرارت طی چند دقیقه پس از بسته شدن درب بهبود می یابد. در حقیقت ، فرهنگ های استاتیک برای بازیابی دمای تنظیم شده در انکوباتور به زمان نیاز دارند. تعدادی از عوامل می توانند بر زمان لازم برای کشت سلولی پس از درمان در خارج از انکوباتور تأثیر بگذارند. این عوامل شامل ：
- ▶ مدت زمانی که سلول ها از انکوباتور خارج شده اند
- ▶ نوع فلاسک که در آن سلولها رشد می کنند (هندسه بر انتقال حرارت تأثیر می گذارد)
- ▶ تعداد ظروف در انکوباتور.
- acont تماس مستقیم فلاسک ها با قفسه فولادی بر تبادل گرما و سرعت رسیدن به دمای بهینه تأثیر می گذارد ، بنابراین بهتر است از پشته های فلاسک ها جلوگیری کنید و هر کشتی را قرار دهید
- ▶ مستقیماً در قفسه انکوباتور.
دمای اولیه هر ظروف تازه و رسانه های مورد استفاده نیز بر زمان لازم برای سلول ها در وضعیت مطلوب آنها تأثیر می گذارد. هرچه دمای آنها پایین تر باشد ، طول می کشد.
اگر همه این عوامل با گذشت زمان تغییر کنند ، آنها همچنین تنوع بین آزمایشات را افزایش می دهند. لازم است این نوسانات دما را به حداقل برساند ، حتی اگر همیشه کنترل همه چیز امکان پذیر نباشد (به خصوص اگر چندین نفر از همان انکوباتور استفاده می کنند).
چگونه می توان تغییرات دما را به حداقل رساند و زمان بازیابی دما را کاهش داد
با پیش گرم کردن رسانه
برخی از محققان عادت دارند بطری های کامل رسانه را در یک حمام آب 37 درجه سانتیگراد از قبل گرم کنند تا قبل از استفاده آنها را به این دما برسانند. همچنین می توان محیط را در انکوباتور که فقط برای پیش گرم شدن متوسط و نه برای کشت سلولی استفاده می شود ، از قبل گرم کنید ، جایی که محیط می تواند بدون ایجاد مزاحمت در کشت سلولی در انکوباتور دیگر به دمای مطلوب برسد. اما این ، تا آنجا که ما می دانیم ، معمولاً هزینه ای مقرون به صرفه نیست.
داخل دستگاه جوجه کشی
درب انکوباتور را تا حد ممکن باز کنید و به سرعت آن را ببندید. از لکه های سرد ، که باعث ایجاد اختلاف دما در انکوباتور می شود ، خودداری کنید. فضای بین فلاسک ها را بگذارید تا هوا گردش کند. قفسه های داخل انکوباتور را می توان سوراخ کرد. این امر امکان توزیع گرمای بهتر را فراهم می کند زیرا اجازه می دهد هوا از سوراخ ها عبور کند. با این حال ، وجود سوراخ ها می تواند منجر به تفاوت در رشد سلول شود ، زیرا اختلاف دما بین منطقه با سوراخ و منطقه با متا وجود دارد. به همین دلایل ، اگر آزمایشات شما نیاز به رشد بسیار یکنواخت کشت سلولی داشته باشد ، می توانید فلاسک های کشت را روی تکیه گاه های فلزی با سطوح تماس کوچکتر قرار دهید ، که معمولاً در کشت سلولی روتین لازم نیست.
به حداقل رساندن زمان پردازش سلول
برای به حداقل رساندن زمان صرف هزینه در فرآیند درمان سلول ، باید
- ▶ قبل از شروع کار ، تمام مواد و ابزارهای لازم را سازماندهی کنید.
- ▶ سریع و هموار کار کنید و روشهای آزمایشی را از قبل مرور کنید تا عملیات شما تکراری و خودکار شود.
- action تماس مایعات با هوای محیط را به حداقل برسانید.
- ▶ دمای ثابت را در آزمایشگاه کشت سلولی که در آن کار می کنید حفظ کنید.
زمان پست: ژانویه -03-2024