Температураның өзгеруінің жасуша дақылына әсері
Температура жасуша мәдениетіндегі маңызды параметр болып табылады, себебі ол нәтижелердің қайталану мүмкіндігіне әсер етеді. Температураның 37°С-тан жоғары немесе төмен өзгеруі сүтқоректілер жасушаларының жасуша өсу кинетикасына бактериялық жасушалар сияқты өте маңызды әсер етеді. 32ºC температурада бір сағаттан кейін сүтқоректілердің жасушаларында гендердің экспрессиясының өзгеруі және жасушалық құрылымдағы модификациялар, жасуша циклінің прогрессиясы, мРНҚ тұрақтылығы анықталуы мүмкін. Клеткалардың өсуіне тікелей әсер етумен қатар, температураның өзгеруі ортаның рН деңгейіне де әсер етеді, өйткені СО2 ерігіштігі рН-ды өзгертеді (төмен температурада рН жоғарылайды). Мәдени сүтқоректілердің жасушалары температураның айтарлықтай төмендеуіне шыдай алады. Оларды 4 °C температурада бірнеше күн бойы сақтауға болады және -196 ° C дейін мұздатуға шыдай алады (тиісті шарттарды пайдалану). Дегенмен, олар қалыпты жағдайдан шамамен 2 °C жоғары температураға бірнеше сағаттан артық шыдамайды және 40 °C және одан жоғары температурада тез өледі. Нәтижелердің максималды қайталануын қамтамасыз ету үшін, тіпті жасушалар аман қалса да, инкубациялау және инкубатордан тыс жасушаларды өңдеу кезінде температураны мүмкіндігінше тұрақты ұстауға қамқорлық жасау қажет.
Инкубатор ішіндегі температура ауытқуларының себептері
Сіз инкубатордың есігі ашылған кезде температураның 37 °C орнатылған мәнге тез төмендейтінін байқаған боларсыз. Жалпы алғанда, температура есік жабылғаннан кейін бірнеше минут ішінде қалпына келеді. Шындығында, статикалық мәдениеттерге инкубатордағы белгіленген температураға дейін қалпына келтіру үшін уақыт қажет. Бірнеше факторлар инкубатордан тыс өңдеуден кейін жасуша дақылының температурасын қалпына келтіруге кететін уақытқа әсер етуі мүмкін. Бұл факторларға мыналар жатады:
- ▶жасушалардың инкубатордан шыққан уақытының ұзақтығы
- ▶Жасушалар өсірілетін колбаның түрі (геометрия жылу алмасуына әсер етеді)
- ▶Инкубатордағы контейнерлер саны .
- ▶Қолбалардың болат сөремен тікелей жанасуы жылу алмасуға және оңтайлы температураға жету жылдамдығына әсер етеді, сондықтан колбалардың үймелерін болдырмай, әрбір ыдысты орналастырған дұрыс.
- ▶тікелей инкубатордың сөресінде.
Пайдаланылған кез келген жаңа контейнерлер мен тасымалдағыштардың бастапқы температурасы да ұяшықтардың оңтайлы күйінде болу уақытына әсер етеді; олардың температурасы неғұрлым төмен болса, соғұрлым ұзақ уақыт алады.
Егер осы факторлардың барлығы уақыт өте өзгерсе, олар эксперименттер арасындағы өзгергіштікті де арттырады. Бұл температура ауытқуларын барынша азайту керек, тіпті бәрін бақылау әрдайым мүмкін болмаса да (әсіресе бір инкубаторды бірнеше адам пайдаланса).
Температураның ауытқуын қалай азайтуға және температураны қалпына келтіру уақытын азайтуға болады
Ортаны алдын ала қыздыру арқылы
Кейбір зерттеушілер қолданар алдында оларды осы температураға дейін жеткізу үшін 37 °C су моншасында тұтас бөтелкелерді алдын ала жылытуға дағдыланған. Сондай-ақ, ортаны басқа инкубатордағы жасуша дақылдарын бұзбай оңтайлы температураға жете алатын жасуша дақылы үшін емес, тек орташа алдын ала қыздыру үшін пайдаланылатын инкубаторда алдын ала қыздыруға болады. Бірақ бұл, біздің білуімізше, әдетте қол жетімді шығын емес.
Инкубатордың ішінде
Инкубатордың есігін мүмкіндігінше аз ашып, тезірек жабыңыз. Инкубатордағы температура айырмашылығын тудыратын суық нүктелерден аулақ болыңыз. Ауа айналымын қамтамасыз ету үшін колбалар арасында бос орын қалдырыңыз. Инкубатордың ішіндегі сөрелер тесілуі мүмкін. Бұл ауаның саңылаулардан өтуіне мүмкіндік беретіндіктен, жылуды жақсы бөлуге мүмкіндік береді. Дегенмен, саңылаулардың болуы жасушалардың өсуінің айырмашылығына әкелуі мүмкін, өйткені саңылаулары бар аймақ пен мета бар аймақ арасында температура айырмашылығы бар. Осы себептерге байланысты, егер сіздің тәжірибелеріңіз жасуша культурасының жоғары біркелкі өсуін талап етсе, культуралық колбаларды әдеттегі жасуша мәдениетінде әдетте қажет емес жанасу беттері кішірек металл тіректерге қоюға болады.
Жасушаны өңдеу уақытын азайту
Жасушаны емдеу процесіне кететін уақытты азайту үшін сізге қажет
- ▶Жұмысты бастамас бұрын барлық қажетті материалдар мен құралдарды реттеңіз.
- ▶Операцияларыңыз қайталанатын және автоматтандырылған болуы үшін тәжірибелік әдістерді алдын ала қарап отырып, жылдам және тегіс жұмыс жасаңыз.
- ▶Сұйықтардың қоршаған ауамен жанасуын барынша азайтыңыз.
- ▶Жұмыс істейтін жасуша культурасы зертханасында тұрақты температураны сақтаңыз.
Жіберу уақыты: 03 қаңтар 2024 ж