Таъсири тағирёбии ҳарорат ба фарҳанги ҳуҷайра
Ҳарорат як параметри муҳим дар фарҳанги ҳуҷайра аст, зеро он ба такроршавандагии натиҷаҳо таъсир мерасонад. Тағйирёбии ҳарорат аз 37°С боло ё поёнтар ба кинетикаи афзоиши ҳуҷайраҳои ҳуҷайраҳои ширхӯрон, ки ба ҳуҷайраҳои бактериявӣ монанд аст, таъсири хеле назаррас дорад. Тағирот дар ифодаи генҳо ва тағирот дар сохтори ҳуҷайра, пешрафти давраи ҳуҷайра, устувории mRNA-ро дар ҳуҷайраҳои ширхӯрон пас аз як соат дар 32ºC муайян кардан мумкин аст. Ба гайр аз таъсири бевосита ба афзоиши ҳуҷайраҳо, тағирёбии ҳарорат ба рН-и ВАО низ таъсир мерасонад, зеро ҳалшавандагии CO2 рН-ро тағир медиҳад (рН дар ҳарорати паст меафзояд). Ҳуҷайраҳои парваришшудаи ширхӯрон метавонанд ба пастшавии назарраси ҳарорат таҳаммул кунанд. Онҳоро дар ҳарорати 4 °C барои якчанд рӯз нигоҳ доштан мумкин аст ва ба яхкунӣ то -196 ° C (бо истифода аз шароити мувофиқ) таҳаммул карда метавонанд. Бо вуҷуди ин, онҳо наметавонанд ҳарорати аз 2 °C болотар аз муқаррариро дар тӯли бештар аз чанд соат таҳаммул кунанд ва дар 40 °C ва болотар аз он зуд мемиранд. Барои таъмин намудани такрори максималии натиҷаҳо, ҳатто агар ҳуҷайраҳо зинда мемонанд, бояд ғамхорӣ кард, ки ҳароратро дар давоми инкубатсия ва коркарди ҳуҷайраҳо берун аз инкубатор то ҳадди имкон доимӣ нигоҳ дорад.
Сабабҳои тағирёбии ҳарорат дар дохили инкубатор
Шумо пай бурдед, ки ҳангоми кушодани дари инкубатор ҳарорат ба қадри муқарраршудаи 37 °C зуд паст мешавад. Умуман, дар давоми чанд дақиқа пас аз баста шудани дар ҳарорат барқарор мешавад. Дар асл, фарҳангҳои статикӣ барои барқарор кардани ҳарорати муқарраршуда дар инкубатор вақт лозиманд. Якчанд омилҳо метавонанд ба вақти барқарор кардани ҳарорат пас аз табобат берун аз инкубатор фарҳанги ҳуҷайра таъсир расонанд. Ба ин омилҳо дохил мешаванд:
- ▶муддати аз инкубатор берун будани ҳуҷайраҳо
- ▶навъи колба, ки дар он ҳуҷайраҳо парвариш карда мешаванд (геометрия ба интиқоли гармӣ таъсир мерасонад)
- ▶Миқдори контейнерҳо дар инкубатор .
- ▶Тамоси бевоситаи колбаҳо бо рафи пӯлод ба мубодилаи гармӣ ва суръати расидан ба ҳарорати оптималӣ таъсир мерасонад, аз ин рӯ беҳтар аст, ки аз колбаҳо даст кашед ва ҳар як зарфро ҷойгир кунед.
- ▶бевосита дар рафи инкубатор.
Ҳарорати ибтидоии ҳама гуна зарфҳои тару тоза ва васоити истифодашуда инчунин ба вақти дар ҳолати оптималии худ будани ҳуҷайраҳо таъсир мерасонад; харорати онхо хар кадар паст бошад, хамон кадар зиёдтар вакт мегирад.
Агар ҳамаи ин омилҳо бо мурури замон тағир ёбанд, онҳо инчунин тағирёбии байни таҷрибаҳоро зиёд мекунанд. Ин таѓйирёбии њароратро ба њадди аќал кам кардан лозим аст, њатто агар њама чизро назорат кардан на њама ваќт имконпазир бошад (хусусан агар якчанд нафар як инкубаторро истифода баранд).
Чӣ тавр кам кардани тағирёбии ҳарорат ва кам кардани вақти барқароршавии ҳарорат
Бо пешакӣ гарм кардани миёна
Баъзе муҳаққиқон одат кардаанд, ки шишаҳои васоити ахбори оммаро дар ваннаи обии 37 °C пешакӣ гарм кунанд, то пеш аз истифода онҳоро ба ин ҳарорат расонанд. Инчунин мумкин аст, ки муҳити атрофро дар инкубаторе, ки танҳо барои пеш аз гармкунии миёна истифода мешавад, на барои фарҳанги ҳуҷайра истифода бурд, ки дар он миёна метавонад ба ҳарорати оптималӣ бидуни халалдор кардани фарҳангҳои ҳуҷайра дар инкубатори дигар расад. Аммо ин, то ҷое ки мо медонем, одатан хароҷоти дастрас нест.
Дар дохили инкубатор
Дари инкубаторро то ҳадди имкон камтар кушоед ва онро зудтар пӯшед. Аз нуқтаҳои хунук, ки дар инкубатор фарқияти ҳароратро ба вуҷуд меоранд, худдорӣ намоед. Дар байни колбаҳо фосила гузоред, то ки ҳаво гардиш кунад. Рафҳои дохили инкубаторро сӯрох кардан мумкин аст. Ин имкон медиҳад, ки гармӣ беҳтар тақсим карда шавад, зеро он имкон медиҳад, ки ҳаво аз сӯрохиҳо гузарад. Аммо мавҷудияти сӯрохиҳо метавонад боиси фарқияти афзоиши ҳуҷайраҳо гардад, зеро дар байни майдони сӯрохҳо ва майдони дорои мета фарқияти ҳарорат вуҷуд дорад. Бо ин сабабҳо, агар таҷрибаҳои шумо афзоиши хеле яксони фарҳанги ҳуҷайраро талаб кунанд, шумо метавонед колбаҳои фарҳангиро дар болои сутунҳои металлӣ бо сатҳҳои тамоси хурдтар ҷойгир кунед, ки одатан дар фарҳанги муқаррарии ҳуҷайра зарур нестанд.
Кам кардани вақти коркарди ҳуҷайра
Барои кам кардани вақти сарф дар раванди табобати ҳуҷайра, шумо бояд
- ▶Тамоми мавод ва асбобҳои заруриро пеш аз оғози кор ба тартиб дароред.
- ▶Зуд ва бемаънӣ кор кунед, усулҳои таҷрибавиро пешакӣ аз назар гузаронед, то амалиётҳои шумо такроршаванда ва автоматӣ шаванд.
- ▶Тамоси моеъҳоро бо ҳавои муҳит кам кунед.
- ▶Дар лабораторияи парвариши ҳуҷайра, ки шумо кор мекунед, ҳарорати доимиро нигоҳ доред.
Вақти фиристодан: январ-03-2024