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細胞培養に対する温度変動の影響
温度は、結果の再現性に影響を与えるため、細胞培養の重要なパラメーターです。 37°Cを超える温度変化は、細菌細胞の細胞細胞と同様に、哺乳類細胞の細胞増殖速度に非常に大きな影響を及ぼします。遺伝子発現の変化と細胞構造、細胞周期の進行、mRNAの安定性の変化は、32ºCで1時間後に哺乳類細胞で検出できます。 CO2の溶解度がpHを変化させるため、細胞の成長に直接影響することに加えて、温度の変化は培地のpHにも影響します（pHは低温で増加します）。培養された哺乳類細胞は、大幅な温度低下に耐えることができます。それらは数日間4°Cで保管でき、凍結を-196°Cに耐えることができます（適切な条件を使用）。ただし、数時間以上普通より約2°Cを超える温度を耐えることはできず、40°C以上で迅速に死にます。結果の最大の再現性を確保するために、細胞が生き残ったとしても、インキュベーターの外側の細胞のインキュベーションと取り扱い中に、温度を可能な限り一定に維持するように注意する必要があります。
インキュベーター内の温度変動の理由
インキュベーターのドアが開くと、温度が37°Cの設定値に急速に低下することに気付くでしょう。一般に、ドアが閉じてから数分以内に温度が回復します。実際、静的培養では、インキュベーターの設定温度に回復する時間が必要です。多くの要因が、インキュベーターの外で治療後に温度を取り戻すのにかかる時間に影響を与える可能性があります。これらの要因は次のとおりです。
- ▶細胞がインキュベーターから外れている時間の長さ
- ▶細胞が成長するフラスコの種類（ジオメトリは熱伝達に影響します）
- ▶インキュベーター内の容器の数。
- ▶フラスコと鋼鉄棚の直接接触は、熱交換と最適な温度に達する速度に影響を与えるため、フラスコの積み重ねを避け、各容器を配置する方が良いです
- ▶インキュベーターの棚に直接。
使用される新鮮な容器とメディアの初期温度は、セルが最適な状態にあるのにかかる時間にも影響します。温度が低いほど、時間がかかります。
これらの要因がすべて時間とともに変化すると、実験間の変動も増加します。これらの温度の変動を最小限に抑える必要があります。たとえすべてを制御することが常に可能ではない場合でも（特に数人が同じインキュベーターを使用している場合）。
温度の変動を最小限に抑え、温度回復時間を短縮する方法
媒体を予熱することにより
一部の研究者は、37°Cの水浴でメディアのボトル全体を事前に温めて、使用する前にこの温度に持ち込むことに慣れています。また、培地が別のインキュベーターの細胞培養を乱すことなく最適な温度に達することができる細胞培養ではなく、培地予熱にのみ使用されるインキュベーターの培地を予熱することも可能です。しかし、これは、私たちが知る限り、通常は手頃な価格の費用ではありません。
インキュベーター内
インキュベーターのドアをできるだけ少なくして、すぐに閉じます。インキュベーターに温度の違いが生じるコールドスポットは避けてください。空気が循環できるように、フラスコの間にスペースを残します。インキュベーター内の棚は穴を開けることができます。これにより、空気が穴を通過できるため、より良い熱分布が可能になります。ただし、穴のある領域とメタの領域の間に温度差があるため、穴の存在は細胞の成長の違いにつながる可能性があります。これらの理由により、実験で細胞培養の非常に均一な成長が必要な場合、通常、日常の細胞培養では必要ない小さな接触面で金属サポートに培養フラスコを配置できます。
セル処理時間を最小化します
細胞治療プロセスでの費用時間を最小限に抑えるには、
- ▶作業を開始する前に、必要なすべての材料とツールを整理します。
- ▶迅速かつスムーズに作業し、実験方法を事前にレビューして、操作が反復的で自動化されるようにします。
- ▶周囲空気との液体の接触を最小限に抑えます。
- ▶あなたが働いている細胞培養研究所で一定の温度を維持します。
投稿時間：1月-2024