കോശ സംസ്കാരത്തിൽ താപനില വ്യതിയാനത്തിന്റെ പ്രഭാവം
കോശ സംസ്ക്കരണത്തിൽ താപനില ഒരു പ്രധാന പാരാമീറ്ററാണ്, കാരണം ഇത് ഫലങ്ങളുടെ പുനരുൽപാദനക്ഷമതയെ ബാധിക്കുന്നു. ബാക്ടീരിയ കോശങ്ങളുടേതിന് സമാനമായി, 37°C-ന് മുകളിലോ അതിൽ താഴെയോ ഉള്ള താപനില മാറ്റങ്ങൾ സസ്തനി കോശങ്ങളുടെ കോശ വളർച്ചാ ചലനാത്മകതയെ വളരെ സാരമായി ബാധിക്കുന്നു. 32°C-ൽ ഒരു മണിക്കൂറിനു ശേഷം സസ്തനി കോശങ്ങളിൽ ജീൻ എക്സ്പ്രഷനിലെ മാറ്റങ്ങളും കോശഘടനയിലെ മാറ്റങ്ങളും, കോശചക്ര പുരോഗതി, mRNA സ്ഥിരത എന്നിവ കണ്ടെത്താൻ കഴിയും. കോശ വളർച്ചയെ നേരിട്ട് ബാധിക്കുന്നതിനൊപ്പം, താപനിലയിലെ മാറ്റങ്ങളും മാധ്യമത്തിന്റെ pH-നെ ബാധിക്കുന്നു, കാരണം CO2 ന്റെ ലയിക്കുന്നത pH-ൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നു (താഴ്ന്ന താപനിലയിൽ pH വർദ്ധിക്കുന്നു). സംസ്ക്കരിച്ച സസ്തനി കോശങ്ങൾക്ക് ഗണ്യമായ താപനില കുറയുന്നത് സഹിക്കാൻ കഴിയും. അവ 4°C-ൽ നിരവധി ദിവസത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കാം, കൂടാതെ -196°C വരെ മരവിപ്പിക്കുന്നത് സഹിക്കാനും കഴിയും (ഉചിതമായ സാഹചര്യങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച്). എന്നിരുന്നാലും, സാധാരണയേക്കാൾ ഏകദേശം 2°C-ന് മുകളിലുള്ള താപനില കുറച്ച് മണിക്കൂറിൽ കൂടുതൽ അവയ്ക്ക് സഹിക്കാൻ കഴിയില്ല, കൂടാതെ 40°C-ലും അതിനു മുകളിലും വേഗത്തിൽ മരിക്കും. ഫലങ്ങളുടെ പരമാവധി പുനരുൽപാദനക്ഷമത ഉറപ്പാക്കാൻ, കോശങ്ങൾ അതിജീവിച്ചാലും, ഇൻകുബേറ്ററിന് പുറത്തുള്ള കോശങ്ങളുടെ ഇൻകുബേഷനിലും കൈകാര്യം ചെയ്യലിലും താപനില കഴിയുന്നത്ര സ്ഥിരമായി നിലനിർത്താൻ ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതുണ്ട്.
ഇൻകുബേറ്ററിനുള്ളിലെ താപനില വ്യതിയാനങ്ങളുടെ കാരണങ്ങൾ
ഇൻകുബേറ്റർ വാതിൽ തുറക്കുമ്പോൾ, താപനില വേഗത്തിൽ നിശ്ചയിച്ച മൂല്യമായ 37 °C ലേക്ക് താഴുന്നത് നിങ്ങൾ ശ്രദ്ധിച്ചിട്ടുണ്ടാകും. പൊതുവേ, വാതിൽ അടച്ചതിനുശേഷം കുറച്ച് മിനിറ്റുകൾക്കുള്ളിൽ താപനില വീണ്ടെടുക്കും. വാസ്തവത്തിൽ, സ്റ്റാറ്റിക് കൾച്ചറുകൾക്ക് ഇൻകുബേറ്ററിൽ നിശ്ചയിച്ച താപനിലയിലേക്ക് വീണ്ടെടുക്കാൻ സമയം ആവശ്യമാണ്. ഇൻകുബേറ്ററിന് പുറത്തുള്ള ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം ഒരു സെൽ കൾച്ചർ താപനില വീണ്ടെടുക്കാൻ എടുക്കുന്ന സമയത്തെ നിരവധി ഘടകങ്ങൾ ബാധിച്ചേക്കാം. ഈ ഘടകങ്ങളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു:
- ▶കോശങ്ങൾ ഇൻകുബേറ്ററിന് പുറത്തുള്ള സമയദൈർഘ്യം
- ▶കോശങ്ങൾ വളർത്തുന്ന ഫ്ലാസ്കിന്റെ തരം (ജ്യാമിതി താപ കൈമാറ്റത്തെ ബാധിക്കുന്നു)
- ▶ഇൻകുബേറ്ററിലെ പാത്രങ്ങളുടെ എണ്ണം.
- ▶ഫ്ലാസ്കുകൾ സ്റ്റീൽ ഷെൽഫുമായി നേരിട്ട് സമ്പർക്കം പുലർത്തുന്നത് താപ വിനിമയത്തെയും ഒപ്റ്റിമൽ താപനിലയിലെത്തുന്നതിന്റെ വേഗതയെയും ബാധിക്കുന്നു, അതിനാൽ ഫ്ലാസ്കുകളുടെ കൂമ്പാരം ഒഴിവാക്കുകയും ഓരോ പാത്രവും സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്യുന്നതാണ് നല്ലത്.
- ▶ഇൻകുബേറ്ററിന്റെ ഷെൽഫിൽ നേരിട്ട്.
പുതുതായി ഉപയോഗിക്കുന്ന പാത്രങ്ങളുടെയും മാധ്യമങ്ങളുടെയും പ്രാരംഭ താപനില കോശങ്ങൾ അവയുടെ ഒപ്റ്റിമൽ അവസ്ഥയിലാകാൻ എടുക്കുന്ന സമയത്തെയും ബാധിക്കും; അവയുടെ താപനില കുറയുന്തോറും അത് കൂടുതൽ സമയമെടുക്കും.
ഈ ഘടകങ്ങളെല്ലാം കാലക്രമേണ മാറുകയാണെങ്കിൽ, പരീക്ഷണങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള വ്യതിയാനവും അവ വർദ്ധിപ്പിക്കും. എല്ലാം നിയന്ത്രിക്കാൻ എല്ലായ്പ്പോഴും സാധ്യമല്ലെങ്കിൽ പോലും (പ്രത്യേകിച്ച് നിരവധി ആളുകൾ ഒരേ ഇൻകുബേറ്റർ ഉപയോഗിക്കുന്നുണ്ടെങ്കിൽ) ഈ താപനില വ്യതിയാനങ്ങൾ കുറയ്ക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്.
താപനില വ്യതിയാനങ്ങൾ എങ്ങനെ കുറയ്ക്കാം, താപനില വീണ്ടെടുക്കൽ സമയം കുറയ്ക്കാം
മീഡിയം മുൻകൂട്ടി ചൂടാക്കുന്നതിലൂടെ
ചില ഗവേഷകർ മുഴുവൻ മീഡിയ കുപ്പികളും 37 °C വാട്ടർ ബാത്തിൽ ചൂടാക്കി ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ഈ താപനിലയിലേക്ക് കൊണ്ടുവരുന്നത് പതിവാണ്. സെൽ കൾച്ചറിന് പകരം മീഡിയം പ്രീഹീറ്റിംഗിനായി മാത്രം ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു ഇൻകുബേറ്ററിൽ മീഡിയം പ്രീഹീറ്റ് ചെയ്യാനും കഴിയും, അവിടെ മറ്റൊരു ഇൻകുബേറ്ററിലെ സെൽ കൾച്ചറുകളെ ശല്യപ്പെടുത്താതെ മീഡിയത്തിന് ഒപ്റ്റിമൽ താപനിലയിൽ എത്താൻ കഴിയും. എന്നാൽ നമുക്കറിയാവുന്നിടത്തോളം ഇത് സാധാരണയായി താങ്ങാനാവുന്ന ചെലവല്ല.
ഇൻകുബേറ്ററിനുള്ളിൽ
ഇൻകുബേറ്റർ വാതിൽ കഴിയുന്നത്ര കുറച്ച് തുറന്ന് വേഗത്തിൽ അടയ്ക്കുക. ഇൻകുബേറ്ററിൽ താപനില വ്യത്യാസങ്ങൾ സൃഷ്ടിക്കുന്ന തണുത്ത പാടുകൾ ഒഴിവാക്കുക. വായു സഞ്ചാരം അനുവദിക്കുന്നതിന് ഫ്ലാസ്കുകൾക്കിടയിൽ ഇടം നൽകുക. ഇൻകുബേറ്ററിനുള്ളിലെ ഷെൽഫുകൾ സുഷിരങ്ങളാക്കാം. ദ്വാരങ്ങളിലൂടെ വായു കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കുന്നതിനാൽ ഇത് മികച്ച താപ വിതരണത്തിന് അനുവദിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, ദ്വാരങ്ങളുടെ സാന്നിധ്യം കോശ വളർച്ചയിൽ വ്യത്യാസങ്ങൾക്ക് കാരണമാകും, കാരണം ദ്വാരങ്ങളുള്ള പ്രദേശത്തിനും മെറ്റാ ഉള്ള പ്രദേശത്തിനും ഇടയിൽ താപനില വ്യത്യാസമുണ്ട്. ഈ കാരണങ്ങളാൽ, നിങ്ങളുടെ പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് സെൽ കൾച്ചറിന്റെ ഉയർന്ന ഏകീകൃത വളർച്ച ആവശ്യമാണെങ്കിൽ, സാധാരണ സെൽ കൾച്ചറിൽ സാധാരണയായി ആവശ്യമില്ലാത്ത ചെറിയ കോൺടാക്റ്റ് പ്രതലങ്ങളുള്ള ലോഹ സപ്പോർട്ടുകളിൽ കൾച്ചർ ഫ്ലാസ്കുകൾ സ്ഥാപിക്കാം.
സെൽ പ്രോസസ്സിംഗ് സമയം കുറയ്ക്കൽ
കോശ ചികിത്സാ പ്രക്രിയയിൽ ചെലവഴിക്കുന്ന സമയം കുറയ്ക്കുന്നതിന്, നിങ്ങൾ
- ▶ ജോലി ആരംഭിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ആവശ്യമായ എല്ലാ വസ്തുക്കളും ഉപകരണങ്ങളും ക്രമീകരിക്കുക.
- ▶ വേഗത്തിലും സുഗമമായും പ്രവർത്തിക്കുക, പരീക്ഷണ രീതികൾ മുൻകൂട്ടി അവലോകനം ചെയ്യുക, അതുവഴി നിങ്ങളുടെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ ആവർത്തിക്കുന്നതും യാന്ത്രികവുമാകും.
- ▶ ദ്രാവകങ്ങളും അന്തരീക്ഷ വായുവും തമ്മിലുള്ള സമ്പർക്കം കുറയ്ക്കുക.
- ▶നിങ്ങൾ ജോലി ചെയ്യുന്ന സെൽ കൾച്ചർ ലാബിൽ സ്ഥിരമായ താപനില നിലനിർത്തുക.
പോസ്റ്റ് സമയം: ജനുവരി-03-2024