中文
Efekti i ndryshimit të temperaturës në kulturën e qelizave
Temperatura është një parametër i rëndësishëm në kulturën e qelizave sepse ndikon në riprodhueshmërinë e rezultateve. Ndryshimet e temperaturës mbi ose nën 37 ° C kanë një efekt shumë domethënës në kinetikën e rritjes së qelizave të qelizave të gjitarëve, të ngjashme me atë të qelizave bakteriale. Ndryshimet në shprehjen e gjenit dhe modifikimet në strukturën qelizore, përparimin e ciklit qelizor, stabiliteti i mRNA mund të zbulohet në qelizat e gjitarëve pas një ore në 32ºC. Përveç ndikimit të drejtpërdrejtë të rritjes së qelizave, ndryshimet në temperaturë ndikojnë gjithashtu në pH të mediave, pasi tretshmëria e CO2 ndryshon pH (pH rritet në temperatura më të ulëta). Qelizat e kultivuara të gjitarëve mund të tolerojnë ulje të konsiderueshme të temperaturës. Ato mund të ruhen në 4 ° C për disa ditë dhe mund të tolerojnë ngrirjen në -196 ° C (duke përdorur kushte të përshtatshme). Sidoqoftë, ata nuk mund të tolerojnë temperaturat mbi rreth 2 ° C mbi normale për më shumë se disa orë dhe do të vdesin shpejt në 40 ° C dhe më lart. Për të siguruar riprodhueshmërinë maksimale të rezultateve, edhe nëse qelizat mbijetojnë, duhet të merret kujdes për të ruajtur temperaturën sa më konstante që të jetë e mundur gjatë inkubacionit dhe trajtimit të qelizave jashtë inkubatorit.
Arsyet e ndryshimeve të temperaturës brenda inkubatorit
Do të keni vërejtur që kur të hapet dera e inkubatorit, temperatura bie me shpejtësi në vlerën e caktuar prej 37 ° C. Në përgjithësi, temperatura do të rikuperohet brenda disa minutave pasi të mbyllet dera. Në fakt, kulturat statike kanë nevojë për kohë për tu rikuperuar në temperaturën e caktuar në inkubator. A number of factors can affect the time it takes for a cell culture to regain temperature after treatment outside the incubator.These factors include：
- ▶ Gjatësia e kohës qelizat kanë qenë jashtë inkubatorit
- ▶ Lloji i balonëve në të cilën rriten qelizat (gjeometria ndikon në transferimin e nxehtësisë)
- ▶ Numri i kontejnerëve në inkubator.
- ▶ Kontakti i drejtpërdrejtë i shisheve me raftin e çelikut ndikon në shkëmbimin e nxehtësisë dhe shpejtësinë e arritjes së temperaturës optimale, kështu që është më mirë të shmangni pirgjet e flladave dhe të vendosni secilën anije
- ▶ Direkt në raftin e inkubatorit.
Temperatura fillestare e çdo kontejneri të freskët dhe media të përdorura gjithashtu do të ndikojë në kohën që duhet që qelizat të jenë në gjendjen e tyre optimale; Sa më i ulët temperatura e tyre, aq më gjatë duhet.
Nëse të gjithë këta faktorë ndryshojnë me kalimin e kohës, ata gjithashtu do të rrisin ndryshueshmërinë midis eksperimenteve. Shtë e nevojshme të minimizohen këto luhatjet e temperaturës, edhe nëse nuk është gjithmonë e mundur të kontrolloni gjithçka (veçanërisht nëse disa njerëz përdorin të njëjtin inkubator).
Si të minimizoni ndryshimet e temperaturës dhe të zvogëloni kohën e rikuperimit të temperaturës
Duke e ngrohur mediumin
Disa studiues janë mësuar të bëjnë para-ngrohjen e shisheve të mediave në një banjë uji 37 ° C për t'i sjellë ato në këtë temperaturë para përdorimit. Shtë gjithashtu e mundur që të ngrohni mediumin në një inkubator që përdoret vetëm për ngrohje të mesme dhe jo për kulturën e qelizave, ku mediumi mund të arrijë një temperaturë optimale pa shqetësuar kulturat e qelizave në një inkubator tjetër. Por kjo, me sa dimë, zakonisht nuk është një shpenzim i përballueshëm.
Brenda inkubatorit
Hapni derën e inkubatorit sa më pak të jetë e mundur dhe mbylleni sa më shpejt. Shmangni pikat e ftohta, të cilat krijojnë ndryshime të temperaturës në inkubator. Lini hapësirën midis shisheve për të lejuar që ajri të qarkullojë. Raftet brenda inkubatorit mund të shpohen. Kjo lejon shpërndarjen më të mirë të nxehtësisë pasi lejon që ajri të kalojë nëpër vrimat. Sidoqoftë, prania e vrimave mund të çojë në ndryshime në rritjen e qelizave, sepse ekziston një ndryshim i temperaturës midis zonës me vrima dhe zonës me meta. Për këto arsye, nëse eksperimentet tuaja kërkojnë rritje shumë të njëtrajtshme të kulturës së qelizave, ju mund të vendosni shulet e kulturës në mbështetje metalike me sipërfaqe më të vogla kontakti, të cilat zakonisht nuk janë të nevojshme në kulturën rutinore të qelizave.
Minimizimi i kohës së përpunimit të qelizave
Për të minimizuar kohën e kaluar në procesin e trajtimit të qelizave, ju duhet të
- ▶ Organizoni të gjitha materialet dhe mjetet e nevojshme para se të filloni të punoni.
- ▶ Punoni shpejt dhe pa probleme, duke rishikuar metodat eksperimentale paraprakisht në mënyrë që operacionet tuaja të bëhen përsëritëse dhe të automatizuara.
- ▶ Minimizoni kontaktin e lëngjeve me ajrin e ambientit.
- ▶ Mbani një temperaturë të vazhdueshme në laboratorin e kulturës qelizore ku punoni.
Koha e postimit: Jan-03-2024