Efè varyasyon tanperati sou kilti selilè
Tanperati se yon paramèt enpòtan nan kilti selilè paske li afekte repwodiktibilite rezilta yo. Chanjman tanperati ki pi wo oswa pi ba pase 37°C gen yon efè trè siyifikatif sou sinetik kwasans selilè selil mamifè yo, menm jan ak selil bakteri yo. Chanjman nan ekspresyon jèn ak modifikasyon nan estrikti selilè, pwogresyon sik selilè, estabilite mRNA ka detekte nan selil mamifè apre yon èdtan nan 32ºC. Anplis afekte dirèkteman kwasans selilè, chanjman nan tanperati afekte tou pH medya a, paske solubilite CO2 a modifye pH la (pH ogmante nan tanperati ki pi ba). Selil mamifè kiltive yo ka tolere yon diminisyon tanperati enpòtan. Yo ka estoke nan 4 °C pandan plizyè jou epi yo ka tolere konjelasyon jiska -196 °C (lè w sèvi ak kondisyon apwopriye). Sepandan, yo pa ka tolere tanperati ki pi wo pase apeprè 2 °C pi wo pase nòmal pou plis pase kèk èdtan epi yo pral mouri byen vit nan 40 °C ak pi wo. Pou asire maksimòm repwodiktibilite rezilta yo, menm si selil yo siviv, yo bezwen pran prekosyon pou kenbe tanperati a osi konstan ke posib pandan enkubasyon ak manyen selil yo deyò enkibatè a.
Rezon ki fè tanperati a varye andedan enkibatè a
Ou pral remake ke lè pòt enkibatè a louvri, tanperati a desann rapidman rive nan valè fikse a ki se 37 °C. An jeneral, tanperati a ap refè nan kèk minit apre pòt la fèmen. Anfèt, kilti estatik yo bezwen tan pou yo refè nan tanperati fikse a nan enkibatè a. Gen yon kantite faktè ki ka afekte tan li pran pou yon kilti selilè reprann tanperati li apre tretman deyò enkibatè a. Faktè sa yo enkli:
- ▶ kantite tan selil yo te pase deyò enkibatè a
- ▶ kalite flakon kote selil yo grandi a (jeyometri afekte transfè chalè)
- ▶Kantite resipyan ki nan enkibatè a.
- ▶Kontak dirèk flakon yo ak etajè asye a afekte echanj chalè a ak vitès pou rive nan tanperati optimal la, kidonk li pi bon pou evite anpile flakon epi mete chak veso
- ▶ dirèkteman sou etajè enkibatè a.
Tanperati inisyal nenpòt resipyan ak medya fre yo itilize a ap afekte tou tan li pran pou selil yo rive nan eta optimal yo; pi ba tanperati a, se pi lontan li pran.
Si tout faktè sa yo chanje sou tan, y ap ogmante varyabilite ki genyen ant eksperyans yo tou. Li nesesè pou minimize varyasyon tanperati sa yo, menm si li pa toujou posib pou kontwole tout bagay (sitou si plizyè moun ap itilize menm enkibatè a).
Kijan pou minimize varyasyon tanperati yo epi diminye tan rekiperasyon tanperati a
Lè w chofe mwayen an davans
Gen kèk chèchè ki abitye chofe boutèy antye ak medya nan yon beny dlo 37 °C pou pote yo nan tanperati sa a anvan yo itilize yo. Li posib tou pou chofe medya a nan yon enkibatè ki sèlman itilize pou chofe medya a epi non pa pou kilti selilè, kote medya a ka rive nan yon tanperati optimal san li pa deranje kilti selilè yo nan yon lòt enkibatè. Men, sa, dapre sa nou konnen, anjeneral se pa yon depans abòdab.
Anndan Enkibatè a
Louvri pòt enkibatè a otank posib epi fèmen l pi vit posib. Evite zòn frèt yo, ki kreye diferans tanperati nan enkibatè a. Kite espas ant flakon yo pou pèmèt lè sikile. Etajè ki anndan enkibatè a ka gen twou. Sa pèmèt yon pi bon distribisyon chalè paske li pèmèt lè pase nan twou yo. Sepandan, prezans twou ka lakòz diferans nan kwasans selilè, paske gen yon diferans tanperati ant zòn ki gen twou yo ak zòn ki gen meta a. Pou rezon sa yo, si eksperyans ou yo mande yon kwasans trè inifòm nan kilti selilè a, ou ka mete flakon kilti yo sou sipò metal ki gen sifas kontak ki pi piti, ki anjeneral pa nesesè nan kilti selilè woutin.
Minimize Tan Pwosesis Selilè
Pou minimize tan ki pase nan pwosesis tretman selilè a, ou bezwen
- ▶Òganize tout materyèl ak zouti ki nesesè yo anvan ou kòmanse travay.
- ▶Travay rapidman e san pwoblèm, revize metòd eksperimantal yo davans pou operasyon ou yo vin repetitif epi otomatize.
- ▶ Minimize kontak likid yo ak lè anbyen an.
- ▶Kenbe yon tanperati konstan nan laboratwa kilti selilè kote w ap travay la.
Dat piblikasyon: 3 janvye 2024