पेशी संवर्धनावर तापमानातील फरकाचा परिणाम
पेशी संवर्धनात तापमान हे एक महत्त्वाचे मापदंड आहे कारण ते परिणामांच्या पुनरुत्पादनक्षमतेवर परिणाम करते. ३७°C पेक्षा जास्त किंवा त्यापेक्षा कमी तापमानातील बदलांचा सस्तन प्राण्यांच्या पेशींच्या पेशींच्या वाढीच्या गतीशास्त्रावर खूप लक्षणीय परिणाम होतो, जो जीवाणू पेशींप्रमाणेच असतो. ३२°C वर एक तासानंतर सस्तन प्राण्यांच्या पेशींमध्ये जनुक अभिव्यक्तीतील बदल आणि पेशीय रचनेतील बदल, पेशी चक्र प्रगती, mRNA स्थिरता आढळून येते. पेशींच्या वाढीवर थेट परिणाम करण्याव्यतिरिक्त, तापमानातील बदल माध्यमांच्या pH वर देखील परिणाम करतात, कारण CO2 ची विद्राव्यता pH मध्ये बदल करते (कमी तापमानात pH वाढते). संवर्धित सस्तन प्राण्यांच्या पेशी तापमानात लक्षणीय घट सहन करू शकतात. ते अनेक दिवसांसाठी ४°C वर साठवले जाऊ शकतात आणि -१९६°C पर्यंत गोठणे सहन करू शकतात (योग्य परिस्थिती वापरून). तथापि, ते काही तासांपेक्षा जास्त काळ सामान्यपेक्षा सुमारे २°C पेक्षा जास्त तापमान सहन करू शकत नाहीत आणि ४०°C आणि त्याहून अधिक तापमानात लवकर मरतात. पेशी टिकून राहिल्या तरीही, परिणामांची जास्तीत जास्त पुनरुत्पादनक्षमता सुनिश्चित करण्यासाठी, इनक्यूबेटरच्या बाहेर पेशींचे उष्मायन आणि हाताळणी दरम्यान तापमान शक्य तितके स्थिर राखण्याची काळजी घेणे आवश्यक आहे.
इनक्यूबेटरमध्ये तापमानातील फरकांची कारणे
तुमच्या लक्षात आले असेल की जेव्हा इनक्यूबेटरचा दरवाजा उघडला जातो तेव्हा तापमान वेगाने ३७ डिग्री सेल्सिअसच्या सेट मूल्यापर्यंत घसरते. सर्वसाधारणपणे, दरवाजा बंद केल्यानंतर काही मिनिटांत तापमान पूर्ववत होते. खरं तर, इन्क्यूबेटरमध्ये स्थिर कल्चरला सेट तापमानापर्यंत पूर्ववत होण्यासाठी वेळ लागतो. इनक्यूबेटरच्या बाहेर उपचार केल्यानंतर सेल कल्चरला तापमान परत मिळविण्यासाठी लागणाऱ्या वेळेवर अनेक घटक परिणाम करू शकतात. या घटकांमध्ये हे समाविष्ट आहे:
- ▶ पेशी इनक्यूबेटरच्या बाहेर येण्याचा कालावधी
- ▶ पेशी ज्या प्रकारच्या फ्लास्कमध्ये वाढतात (भूमिती उष्णता हस्तांतरणावर परिणाम करते)
- ▶इनक्यूबेटरमधील कंटेनरची संख्या.
- ▶ स्टीलच्या शेल्फशी फ्लास्कचा थेट संपर्क उष्णता विनिमय आणि इष्टतम तापमानापर्यंत पोहोचण्याच्या गतीवर परिणाम करतो, म्हणून फ्लास्कचे ढीग टाळणे आणि प्रत्येक भांडे ठेवणे चांगले.
- ▶ थेट इनक्यूबेटरच्या शेल्फवर.
वापरल्या जाणाऱ्या कोणत्याही ताज्या कंटेनर आणि माध्यमांचे सुरुवातीचे तापमान पेशींना त्यांच्या इष्टतम स्थितीत येण्यासाठी लागणाऱ्या वेळेवर देखील परिणाम करेल; त्यांचे तापमान जितके कमी असेल तितके जास्त वेळ लागेल.
जर हे सर्व घटक कालांतराने बदलले तर ते प्रयोगांमधील परिवर्तनशीलता देखील वाढवतील. सर्वकाही नियंत्रित करणे नेहमीच शक्य नसले तरीही (विशेषतः जर अनेक लोक एकाच इनक्यूबेटरचा वापर करत असतील तर) हे तापमान चढउतार कमी करणे आवश्यक आहे.
तापमानातील फरक कमी कसा करायचा आणि तापमान पुनर्प्राप्ती वेळ कसा कमी करायचा
माध्यम प्रीहीट करून
काही संशोधकांना वापरण्यापूर्वी या तापमानाला आणण्यासाठी ३७ डिग्री सेल्सिअस तापमानाच्या पाण्याच्या बाथमध्ये माध्यमाच्या संपूर्ण बाटल्या प्री-वॉर्मिंग करण्याची सवय आहे. माध्यम केवळ मध्यम प्रीहीटिंगसाठी वापरल्या जाणाऱ्या इनक्यूबेटरमध्ये प्रीहीट करणे देखील शक्य आहे, पेशी संवर्धनासाठी नाही, जिथे माध्यम दुसऱ्या इनक्यूबेटरमधील पेशी संवर्धनांना त्रास न देता इष्टतम तापमानापर्यंत पोहोचू शकते. परंतु, आपल्या माहितीनुसार, हे सहसा परवडणारे खर्च नसते.
इनक्यूबेटरच्या आत
इनक्यूबेटरचा दरवाजा शक्य तितका कमी उघडा आणि तो लवकर बंद करा. इनक्यूबेटरमध्ये तापमानात फरक निर्माण करणाऱ्या थंड जागा टाळा. फ्लास्कमध्ये हवा फिरू देण्यासाठी जागा सोडा. इनक्यूबेटरमधील शेल्फ छिद्रित केले जाऊ शकतात. यामुळे उष्णता चांगले वितरण होते कारण त्यामुळे छिद्रांमधून हवा जाऊ शकते. तथापि, छिद्रांच्या उपस्थितीमुळे पेशींच्या वाढीमध्ये फरक होऊ शकतो, कारण छिद्रे असलेल्या क्षेत्रामध्ये आणि मेटा असलेल्या क्षेत्रामध्ये तापमानात फरक असतो. या कारणांमुळे, जर तुमच्या प्रयोगांना सेल कल्चरची अत्यंत एकसमान वाढ आवश्यक असेल, तर तुम्ही कल्चर फ्लास्क लहान संपर्क पृष्ठभागांसह धातूच्या आधारांवर ठेवू शकता, जे सहसा नियमित सेल कल्चरमध्ये आवश्यक नसते.
सेल प्रोसेसिंग वेळ कमीत कमी करणे
पेशी उपचार प्रक्रियेत कमीत कमी वेळ घालवण्यासाठी, तुम्हाला हे करणे आवश्यक आहे
- ▶ काम सुरू करण्यापूर्वी सर्व आवश्यक साहित्य आणि साधने व्यवस्थित करा.
- ▶ जलद आणि सुरळीतपणे काम करा, प्रायोगिक पद्धतींचा आगाऊ आढावा घ्या जेणेकरून तुमचे ऑपरेशन पुनरावृत्ती आणि स्वयंचलित होतील.
- ▶ सभोवतालच्या हवेशी द्रवपदार्थांचा संपर्क कमीत कमी करा.
- ▶तुम्ही ज्या सेल कल्चर लॅबमध्ये काम करता तिथे स्थिर तापमान ठेवा.
पोस्ट वेळ: जानेवारी-०३-२०२४