banner_stránky

Novinky a blog

Kolik média by se mělo přidat do baňky v třepačce inkubátoru?


Kolik média by se mělo přidat do baňky v třepačce inkubátoru?
Sterilní Erlenmeyerovy baňky pro buněčné kultury RADOBIO jsou speciálně navrženy pro kultivaci suspenzních buněk včetně buněk HEK 293 a CHO vtřepací inkubátorTyto baňky mají ploché dno a odvětrávaný uzávěr, díky čemuž jsou vhodné pro vývoj procesů v malém měřítku, škálování a vícestupňovou kultivaci. Odvětrávaný uzávěr obsahuje hydrofobní membránu o tloušťce 0,2 μm, která umožňuje efektivní výměnu plynů a zároveň blokuje mikrobiální kontaminaci a pronikání vody, čímž zajišťuje optimální podmínky pro růst buněk.
 

Klíčové specifikace a pokyny k použití

  1. 1. Optimalizace pracovního objemu​​
    •   Objem média by měl být udržován na 20–30 % celkového objemu baňky, aby se zajistil dostatečný přenos kyslíku a minimalizovalo smykové napětí.
       
    • • Jasné stupnice na baňce umožňují přesné měření objemu
       .
  2. 2. Parametry třepání​​
    • Doporučenoinkubátorová třepačkarychlost třepání: 75–120 ot./min (nastavitelná dle experimentálních potřeb)
       
    • U větších baněk (≥3 l) snižte otáčky na 90 ot./min, abyste zabránili nadměrnému smyku kapaliny a pěnění.

Doporučené parametry pro buňky CHO a HEK 293

Objem baňky Pracovní objem Rychlost třepání
125 ml 25 ml 120 ot./min
250 ml 60 ml 120 ot./min
500 ml 150 ml 120 ot./min
1000 ml 350 ml 120 ot./min
1500 ml 400 ml 120 ot./min
2000 ml 400 ml 120 ot./min
3000 ml 800 ml 90 ot./min
5000 ml 2500 ml 90 ot./min

Poznámka: Údaje platí pro buněčné linie CHO Stable, CHO Transient a HEK 293 Transient.


Doplňující technické podrobnosti

  1. 1. Materiál a sterilita​​
    • • Možnosti materiálu PETG/PC:PETG nabízí vysokou průhlednost a odolnost proti nárazu; PC poskytuje vynikající tepelnou stabilitu (odolává autoklávování při 121 °C)
      •  
    • Sterilizace: Ozářeno gama zářením, jednotlivě baleno, certifikováno jako bez DNáz/RNáz, bez endotoxinů a v souladu s normami USP třídy VI
       
  2. 2. Výhody designu​​
    • • Ergonomický uzávěr: Usnadňuje bezpečnou manipulaci a je kompatibilní s pipetami/škrabkami na buňky
       
    • ​​Dostupné modely s přepážkami: Zvyšuje účinnost míchání u kultur s vysokou hustotou zvýšením přenosu kyslíku (kLa)
       
  3. 3. Důležité poznámky k použití​​
    • Zabraňte přeplnění: Objemy >30 % mohou snížit výměnu plynů, což vede k hypoxii v aerobních kulturách.
       
    • Monitorování pH/kyslíku: Udržujte pH na 7,0–7,4 (buňky CHO) a rozpuštěný kyslík (DO) >40 % pro optimální metabolismus
       
    • Citlivost na střih: U buněk citlivých na střih (např. primárních T buněk) použijte nižší rychlosti (80–100 ot./min.) nebo protipěnivé látky.

Aplikace nad rámec standardního pěstování

  • Perfuzní systémy: Integrace s přívodními linkami pro nepřetržitý přísun živin s dosažením buněčné hustoty >20 × 10⁶ buněk/ml
     
  • Mikrobiální kultury: Vhodné pro bakteriální/kvasnicovou fermentaci s přepážkami pro lepší provzdušňování
     
  • ​​Protokoly pro navyšování množství: Při přechodu z baněk do bioreaktorů udržujte konzistentní objemovou rychlost přenosu kyslíku (kLa) úpravou míchání a provzdušňování.
     

Čas zveřejnění: 17. srpna 2025