Ile medium należy dodać do kolby w inkubatorze wytrząsającym?
Kolby Erlenmeyera do sterylnej hodowli komórek RADOBIO są specjalnie zaprojektowane do hodowli komórek w zawiesinie, w tym komórek HEK 293 i CHO, winkubator wstrząsowyKolby te charakteryzują się płaskim dnem i odpowietrzaną pokrywką, dzięki czemu nadają się do rozwoju procesów na małą skalę, skalowania i hodowli wieloetapowej. Odpowietrzana pokrywka zawiera hydrofobową membranę o grubości 0,2 μm, która umożliwia efektywną wymianę gazową, blokując jednocześnie zanieczyszczenia mikrobiologiczne i przenikanie wody, zapewniając optymalne warunki wzrostu komórek.
Kluczowe specyfikacje i wytyczne dotyczące użytkowania
- 1. Optymalizacja objętości roboczej
- •Objętość średnia powinna być utrzymywana na poziomie 20–30% całkowitej pojemności kolby, aby zapewnić odpowiedni transfer tlenu i zminimalizować naprężenia ścinające
- •Czytelne podziałki na kolbie umożliwiają precyzyjny pomiar objętości .
- •Objętość średnia powinna być utrzymywana na poziomie 20–30% całkowitej pojemności kolby, aby zapewnić odpowiedni transfer tlenu i zminimalizować naprężenia ścinające
- 2.Parametry wstrząsania
- •Zaleconywstrząsarka inkubatoraprędkość potrząsania: 75–120 obr./min (regulowana w zależności od potrzeb eksperymentalnych)
- •W przypadku większych kolb (≥3 l) zmniejsz prędkość do 90 obr./min, aby zapobiec nadmiernemu ścinaniu cieczy i pienieniu
- •Zaleconywstrząsarka inkubatoraprędkość potrząsania: 75–120 obr./min (regulowana w zależności od potrzeb eksperymentalnych)
Zalecane parametry dla komórek CHO i HEK 293
| Objętość kolby | Objętość robocza | Prędkość potrząsania |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 obr./min |
| 250 ml | 60 ml | 120 obr./min |
| 500 ml | 150 ml | 120 obr./min |
| 1000 ml | 350 ml | 120 obr./min |
| 1500 ml | 400 ml | 120 obr./min |
| 2000 ml | 400 ml | 120 obr./min |
| 3000 ml | 800 ml | 90 obr./min |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 obr./min |
Uwaga: dane dotyczą linii komórkowych CHO Stable, CHO Transient i HEK 293 Transient
Dodatkowe szczegóły techniczne
- 1. Materiał i sterylność
- •Opcje materiałów PETG/PC:PETG zapewnia wysoką przejrzystość i odporność na uderzenia, PC zapewnia doskonałą stabilność termiczną (wytrzymuje autoklawowanie w temperaturze 121°C)
-
- •Sterylizacja: napromieniowanie promieniami gamma, pakowane pojedynczo, certyfikowane jako wolne od DNAz/RNaz, wolne od endotoksyn i zgodne ze standardami USP klasy VI
- •Opcje materiałów PETG/PC:PETG zapewnia wysoką przejrzystość i odporność na uderzenia, PC zapewnia doskonałą stabilność termiczną (wytrzymuje autoklawowanie w temperaturze 121°C)
- 2. Zalety konstrukcyjne
- •Ergonomiczna nasadka: Ułatwia bezpieczne obchodzenie się z pipetami i skrobaczkami do komórek
- •Dostępne modele z przegrodami: Zwiększa wydajność mieszania w przypadku kultur o dużej gęstości poprzez zwiększenie transferu tlenu (kLa)
- •Ergonomiczna nasadka: Ułatwia bezpieczne obchodzenie się z pipetami i skrobaczkami do komórek
- 3.Krytyczne uwagi dotyczące użytkowania
- •Unikaj przepełnienia: Objętości >30% mogą zmniejszyć wymianę gazową, co może prowadzić do niedotlenienia w hodowlach tlenowych
- •Monitoruj pH/tlen: Utrzymuj pH na poziomie 7,0–7,4 (komórki CHO) i rozpuszczony tlen (DO) >40%, aby zapewnić optymalny metabolizm
- •Wrażliwość na ścinanie: W przypadku komórek wrażliwych na ścinanie (np. pierwotnych komórek T) należy stosować niższe prędkości (80–100 obr./min) lub środki przeciwpieniące
- •Unikaj przepełnienia: Objętości >30% mogą zmniejszyć wymianę gazową, co może prowadzić do niedotlenienia w hodowlach tlenowych
Zastosowania wykraczające poza standardową uprawę
- •Systemy perfuzyjne: Integracja z liniami zasilającymi w celu zapewnienia ciągłego zaopatrzenia w składniki odżywcze, osiągająca gęstość komórek >20 × 10⁶ komórek/ml
- •Kultury mikrobiologiczne: Nadają się do fermentacji bakteryjnej/drożdży, z przegrodami zapewniającymi lepsze napowietrzanie
- •Protokoły skalowania: Podczas przechodzenia z kolb do bioreaktorów należy utrzymywać stałą objętościową szybkość transferu tlenu (kLa) poprzez regulację mieszania i napowietrzania
Czas publikacji: 17-08-2025