ما مقدار الوسط الذي يجب إضافته إلى القارورة في حاضنة اهتزازية؟
صُممت قوارير إرلنماير المعقمة لزراعة الخلايا من RADOBIO خصيصًا لزراعة الخلايا المعلقة، بما في ذلك خلايا HEK 293 وخلايا CHO فيحاضنة اهتزازيةتتميز هذه القوارير بقاعدة مسطحة وغطاء مزود بفتحات تهوية، مما يجعلها مناسبة لتطوير العمليات على نطاق صغير، والتوسع، والزراعة متعددة المراحل. يشتمل الغطاء المزود بفتحات تهوية على غشاء كاره للماء بمسام 0.2 ميكرومتر، مما يسمح بتبادل الغازات بكفاءة مع منع التلوث الميكروبي واختراق الماء، مما يضمن ظروفًا مثالية لنمو الخلايا.
المواصفات الرئيسية وإرشادات الاستخدام
- 1. تحسين حجم العمل
- •ينبغي الحفاظ على حجم الوسط عند 20-30% من السعة الإجمالية للقارورة لضمان نقل الأكسجين بشكل كافٍ وتقليل إجهاد القص.
- • تسمح علامات التدريج الواضحة على الدورق بقياس الحجم بدقة .
- •ينبغي الحفاظ على حجم الوسط عند 20-30% من السعة الإجمالية للقارورة لضمان نقل الأكسجين بشكل كافٍ وتقليل إجهاد القص.
- 2. معايير الاهتزاز
- •مُستَحسَنحاضنة هزازةسرعة الاهتزاز: 75-120 دورة في الدقيقة (قابلة للتعديل بناءً على الاحتياجات التجريبية)
- •بالنسبة للقوارير الأكبر حجمًا (≥3 لتر)، قلل السرعة إلى 90 دورة في الدقيقة لمنع القص المفرط للسائل وتكوّن الرغوة.
- •مُستَحسَنحاضنة هزازةسرعة الاهتزاز: 75-120 دورة في الدقيقة (قابلة للتعديل بناءً على الاحتياجات التجريبية)
المعايير الموصى بها لخلايا CHO و HEK 293
| حجم القارورة | حجم العمل | سرعة الاهتزاز |
|---|---|---|
| 125 مل | 25 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 250 مل | 60 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 500 مل | 150 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 1000 مل | 350 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 1500 مل | 400 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 2000 مل | 400 مل | 120 دورة في الدقيقة |
| 3000 مل | 800 مل | 90 دورة في الدقيقة |
| 5000 مل | 2500 مل | 90 دورة في الدقيقة |
ملاحظة: تنطبق البيانات على سلالات الخلايا CHO Stable وCHO Transient وHEK 293 Transient
تفاصيل فنية إضافية
- 1. المواد والتعقيم
- •خيارات مواد PETG/PC:يتميز البولي إيثيلين تيريفثالات (PETG) بشفافية عالية ومقاومة للصدمات؛ بينما يوفر البولي كربونات (PC) استقرارًا حراريًا فائقًا (يتحمل التعقيم بالبخار عند درجة حرارة 121 درجة مئوية).
-
- •التعقيم: معقم بأشعة جاما، مغلف بشكل فردي، معتمد وخالٍ من إنزيمات DNase/RNase، وخالٍ من السموم الداخلية، ومتوافق مع معايير USP من الفئة السادسة
- •خيارات مواد PETG/PC:يتميز البولي إيثيلين تيريفثالات (PETG) بشفافية عالية ومقاومة للصدمات؛ بينما يوفر البولي كربونات (PC) استقرارًا حراريًا فائقًا (يتحمل التعقيم بالبخار عند درجة حرارة 121 درجة مئوية).
- 2. مزايا التصميم
- • غطاء مريح: يسهل التعامل الآمن والتوافق مع الماصات/مكاشطات الخلايا
- •تتوفر نماذج مزودة بحواجز: تعمل على تحسين كفاءة الخلط للمزارع عالية الكثافة عن طريق زيادة نقل الأكسجين (kLa).
- • غطاء مريح: يسهل التعامل الآمن والتوافق مع الماصات/مكاشطات الخلايا
- 3. ملاحظات هامة حول الاستخدام
- •تجنب الإفراط في التعبئة: قد تؤدي الأحجام التي تزيد عن 30% إلى تقليل تبادل الغازات، مما يؤدي إلى نقص الأكسجة في المزارع الهوائية.
- •مراقبة درجة الحموضة/الأكسجين: حافظ على درجة الحموضة عند 7.0-7.4 (خلايا CHO) والأكسجين المذاب (DO) >40% لتحقيق التمثيل الغذائي الأمثل
- •حساسية القص: بالنسبة للخلايا الحساسة للقص (مثل الخلايا التائية الأولية)، استخدم سرعات منخفضة (80-100 دورة في الدقيقة) أو عوامل مضادة للرغوة
- •تجنب الإفراط في التعبئة: قد تؤدي الأحجام التي تزيد عن 30% إلى تقليل تبادل الغازات، مما يؤدي إلى نقص الأكسجة في المزارع الهوائية.
تطبيقات تتجاوز الزراعة التقليدية
- •أنظمة التروية: تتكامل مع خطوط التغذية لتوفير إمداد مستمر بالمغذيات، مما يحقق كثافة خلوية تزيد عن 20 × 10⁶ خلية/مل
- •المزارع الميكروبية: مناسبة للتخمر البكتيري/الخميري بتصميمات مزودة بحواجز لتحسين التهوية
- •بروتوكولات التوسع: عند الانتقال من القوارير إلى المفاعلات الحيوية، يجب الحفاظ على معدل نقل الأكسجين الحجمي (kLa) ثابتًا عن طريق ضبط التحريك والتهوية.
تاريخ النشر: 17 أغسطس 2025




