Wie viel Medium sollte in den Schüttelinkubator in den Kolben gegeben werden?
Sterile Erlenmeyerkolben von RADOBIO für die Zellkultur sind speziell für die Kultivierung von Suspensionszellen, einschließlich HEK 293- und CHO-Zellen, konzipiert.SchüttelinkubatorDiese Kolben mit flachem Boden und belüftetem Deckel eignen sich ideal für die Prozessentwicklung im kleinen Maßstab, die Skalierung und die mehrstufige Kultivierung. Der belüftete Deckel ist mit einer 0,2 μm hydrophoben Membran ausgestattet, die einen effizienten Gasaustausch ermöglicht und gleichzeitig mikrobielle Kontamination und das Eindringen von Wasser verhindert. Dadurch werden optimale Zellwachstumsbedingungen gewährleistet.
Wichtigste Spezifikationen und Nutzungsrichtlinien
- 1. Optimierung des Arbeitsvolumens
- •Das mittlere Volumen sollte bei 20–30 % des Gesamtvolumens des Kolbens gehalten werden, um einen ausreichenden Sauerstoffaustausch zu gewährleisten und die Scherkräfte zu minimieren.
- • Deutliche Graduierungsmarkierungen auf dem Kolben ermöglichen eine präzise Volumenmessung .
- •Das mittlere Volumen sollte bei 20–30 % des Gesamtvolumens des Kolbens gehalten werden, um einen ausreichenden Sauerstoffaustausch zu gewährleisten und die Scherkräfte zu minimieren.
- 2. Schüttelparameter
- •EmpfohlenInkubatorschüttlerSchüttelgeschwindigkeit: 75–120 U/min (einstellbar je nach experimentellen Erfordernissen)
- •Bei größeren Kolben (≥3 l) die Drehzahl auf 90 U/min reduzieren, um übermäßige Scherkräfte und Schaumbildung zu vermeiden.
- •EmpfohlenInkubatorschüttlerSchüttelgeschwindigkeit: 75–120 U/min (einstellbar je nach experimentellen Erfordernissen)
Empfohlene Parameter für CHO- und HEK-293-Zellen
| Kolbenvolumen | Arbeitsvolumen | Schüttelgeschwindigkeit |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 U/min |
| 250 ml | 60 ml | 120 U/min |
| 500 ml | 150 ml | 120 U/min |
| 1000 ml | 350 ml | 120 U/min |
| 1500 ml | 400 ml | 120 U/min |
| 2000 ml | 400 ml | 120 U/min |
| 3000 ml | 800 ml | 90 U/min |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 U/min |
Hinweis: Die Daten gelten für die Zelllinien CHO Stable, CHO Transient und HEK 293 Transient.
Ergänzende technische Details
- 1. Material und Sterilität
- • PETG/PC-Materialoptionen:PETG bietet hohe Transparenz und Schlagfestigkeit; PC bietet überlegene thermische Stabilität (hält der Autoklavierung bei 121°C stand).
-
- •Sterilisation: Gammabestrahlt, einzeln verpackt, zertifiziert DNase-/RNase-frei, endotoxinfrei und konform mit den USP-Klasse-VI-Standards
- • PETG/PC-Materialoptionen:PETG bietet hohe Transparenz und Schlagfestigkeit; PC bietet überlegene thermische Stabilität (hält der Autoklavierung bei 121°C stand).
- 2. Designvorteile
- • Ergonomische Kappe: Ermöglicht sichere Handhabung und Kompatibilität mit Pipetten/Zellschabern.
- •Erhältliche Modelle mit Prallblechen: Verbessert die Mischleistung bei Kulturen mit hoher Zelldichte durch Erhöhung des Sauerstofftransfers (kLa).
- • Ergonomische Kappe: Ermöglicht sichere Handhabung und Kompatibilität mit Pipetten/Zellschabern.
- 3. Hinweise zur kritischen Nutzung
- •Überfüllung vermeiden: Volumina >30 % können den Gasaustausch verringern und in aeroben Kulturen zu Hypoxie führen.
- •pH-Wert/Sauerstoffgehalt überwachen: Für einen optimalen Stoffwechsel sollte der pH-Wert zwischen 7,0 und 7,4 (CHO-Zellen) und der Gehalt an gelöstem Sauerstoff (DO) über 40 % liegen.
- •Scherempfindlichkeit: Für scherempfindliche Zellen (z. B. primäre T-Zellen) sollten niedrigere Drehzahlen (80–100 U/min) oder Antischaummittel verwendet werden.
- •Überfüllung vermeiden: Volumina >30 % können den Gasaustausch verringern und in aeroben Kulturen zu Hypoxie führen.
Anwendungen jenseits des Standardanbaus
- •Perfusionssysteme: Integration in Zuleitungen zur kontinuierlichen Nährstoffversorgung, wodurch Zelldichten von >20 × 10⁶ Zellen/ml erreicht werden.
- •Mikrobielle Kulturen: Geeignet für bakterielle/Hefefermentation mit Belüftungsöffnungen für verbesserte Belüftung.
- •Scale-Up-Protokolle: Beim Übergang von Kolbenkulturen zu Bioreaktoren muss eine konstante volumetrische Sauerstofftransferrate (kLa) durch Anpassung von Rühren und Belüftung aufrechterhalten werden.
Veröffentlichungsdatum: 17. August 2025