Ke bokae bo lokelang ho eketsoa ka har'a flask ka har'a incubator e sisinyehang?
Li-flask tsa Erlenmeyer tsa RADOBIO tse se nang likokoana-hloko li etselitsoe ka ho khetheha ho lema lisele tse emisitsoeng ho kenyeletsoa lisele tsa HEK 293 le CHO ka har'asehokelo sa ho thothomela. Lifolakha tsena li na le botlaase bo bataletseng le sekoahelo se nang le moea o kenang, e leng se etsang hore li lokele nts'etsopele ea ts'ebetso e nyane, ho holisa le ho lema mekhahlelo e mengata. Sekoahelo se nang le moea o kenang se kopanya lera la 0.2 μm le sa rateng metsi, le nolofalletsang phapanyetsano e sebetsang hantle ea khase ha ka nako e ts'oanang le thibela tšilafalo ea likokoana-hloko le ho kenella ha metsi, ho netefatsa maemo a matle a kholo ea lisele.
Litlhaloso tsa Bohlokoa le Litataiso tsa Tšebeliso
- 1.Ntlafatso ea Molumo o Sebetsang.
- •Bophahamo bo mahareng bo lokela ho bolokoa ho 20-30% ea bokhoni bohle ba flask ho netefatsa phetiso e lekaneng ea oksijene le ho fokotsa khatello ea ho kuta.
- •Matshwao a hlakileng a ho qeta ka bokgabane a dumella ho lekanya bophahamo ba modumo ka nepo .
- •Bophahamo bo mahareng bo lokela ho bolokoa ho 20-30% ea bokhoni bohle ba flask ho netefatsa phetiso e lekaneng ea oksijene le ho fokotsa khatello ea ho kuta.
- 2.Liparamente tsa ho thothomela.
- •E khothaletsoasets'oants'o sa ho incubatorlebelo la ho sisinyeha: 75–120 RPM (e ka fetoloa ho latela litlhoko tsa liteko)
- •Bakeng sa liflask tse kholo (≥3L), fokotsa lebelo ho 90 RPM ho thibela ho kuta ha mokelikeli o feteletseng le ho fofonela
- •E khothaletsoasets'oants'o sa ho incubatorlebelo la ho sisinyeha: 75–120 RPM (e ka fetoloa ho latela litlhoko tsa liteko)
Liparamitha tse Khothaletsoang bakeng sa Lisele tsa CHO le HEK 293
| Bolumo ba Letlapa | Buka ea ho Sebetsa | Lebelo la ho thothomela |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 RPM |
| 250 mL | 60 mL | 120 RPM |
| 500 mL | 150 mL | 120 RPM |
| 1000 mL | 350 ml | 120 RPM |
| 1500 mL | 400 mL | 120 RPM |
| 2000 mL | 400 mL | 120 RPM |
| 3000 mL | 800 mL | 90 RPM |
| 5000 mL | 2500 mL | 90 RPM |
Ela Hloko: Lintlha li sebetsa ho mela ea sele ea CHO e tsitsitseng, ea CHO e sa fetoheng, le ea HEK 293 e sa fetoheng.
Lintlha tse ling tsa Tekheniki
- 1.Thepa le Bohloeki.
- •Likhetho tsa Thepa ea PETG/PC:PETG e fana ka ponaletso e phahameng le ho hanyetsa tshusumetso; PC e fana ka botsitso bo phahameng ba mocheso (e mamella autoclaving ho 121°C)
-
- •Ho bolaea likokoana-hloko: E khantšoa ka mahlaseli a gamma, e pakiloe ka bonngoe, ha e na DNase/RNase e netefalitsoeng, ha e na endotoxin, 'me e latela maemo a USP Class VI
- •Likhetho tsa Thepa ea PETG/PC:PETG e fana ka ponaletso e phahameng le ho hanyetsa tshusumetso; PC e fana ka botsitso bo phahameng ba mocheso (e mamella autoclaving ho 121°C)
- 2. Melemo ea Moralo.
- •Sekoahelo sa Ergonomic: Se thusa ho sebetsana ka mokhoa o sireletsehileng le ho lumellana le li-pipettes/li-scraper tsa sele
- •Mefuta e sa Tsejoeng e Fumanehang: E ntlafatsa bokgoni ba ho kopanya bakeng sa dimela tse nang le bongata bo boholo ka ho eketsa phetiso ya oksijene (kLa)
- •Sekoahelo sa Ergonomic: Se thusa ho sebetsana ka mokhoa o sireletsehileng le ho lumellana le li-pipettes/li-scraper tsa sele
- 3.Lintlha tsa Bohlokoa tsa Tšebeliso.
- •Qoba ho Tlatsa ho Feta Tekanyo: Bongata bo fetang 30% bo ka fokotsa phapanyetsano ea khase, e leng se lebisang ho hypoxia e fokolang litloaelong tsa aerobic.
- •Lekola pH/Oksijene: Boloka pH ho 7.0–7.4 (lisele tsa CHO) le oksijene e qhibilihisitsoeng (DO) >40% bakeng sa metabolism e ntle ka ho fetisisa
- •Ho Kutloa ha ho Beola: Bakeng sa lisele tse utloang bohloko ba ho beola (mohlala, lisele tsa mantlha tsa T), sebelisa lebelo le tlase (80–100 RPM) kapa li-anti-foam agents
- •Qoba ho Tlatsa ho Feta Tekanyo: Bongata bo fetang 30% bo ka fokotsa phapanyetsano ea khase, e leng se lebisang ho hypoxia e fokolang litloaelong tsa aerobic.
Likopo tse fetang Temo e Tloaelehileng
- •Mekhoa ea ho Phefumoloha: Kopanya le mela ea phepo bakeng sa phepelo e tsoelang pele ea limatlafatsi, ho fihlela bongata ba lisele >20 × 10⁶ lisele/mL
- •Lihlahisoa tsa Microbial: E loketse ho belisoa ha baktheria/tomoso ka meralo e makatsang bakeng sa moea o ntlafetseng
- •Mekhoa ea ho Eketsa: Ha u fetola ho tloha ho li-flask ho ea ho li-bioreactor, boloka sekhahla se tsitsitseng sa phetisetso ea oksijene ea volumetric (kLa) ka ho fetola ho sisinyeha le moea o kenang.
Nako ea poso: Phato-17-2025