แบนเนอร์หน้า

ข่าวสารและบล็อก

ควรเติมอาหารเลี้ยงเชื้อปริมาณเท่าใดลงในขวดทดลองในตู้อบแบบเขย่า?


ควรเติมอาหารเลี้ยงเชื้อปริมาณเท่าใดลงในขวดทดลองในตู้อบแบบเขย่า?
ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ Erlenmeyer ที่ปลอดเชื้อของ RADOBIO ได้รับการออกแบบมาโดยเฉพาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แขวนลอย รวมถึงเซลล์ HEK 293 และ CHO ในสภาวะปลอดเชื้อตู้ฟักแบบเขย่าขวดเพาะเลี้ยงเหล่านี้มีก้นแบนและฝาปิดแบบมีรูระบายอากาศ ทำให้เหมาะสำหรับการพัฒนา การขยายขนาด และการเพาะเลี้ยงหลายขั้นตอนในกระบวนการผลิตขนาดเล็ก ฝาปิดแบบมีรูระบายอากาศประกอบด้วยเยื่อไฮโดรโฟบิกขนาด 0.2 ไมโครเมตร ซึ่งช่วยให้การแลกเปลี่ยนก๊าซมีประสิทธิภาพ ในขณะเดียวกันก็ป้องกันการปนเปื้อนของจุลินทรีย์และการซึมผ่านของน้ำ ทำให้มั่นใจได้ถึงสภาวะการเจริญเติบโตของเซลล์ที่เหมาะสมที่สุด
 

ข้อมูลจำเพาะที่สำคัญและแนวทางการใช้งาน

  1. 1. การเพิ่มประสิทธิภาพปริมาตรการทำงาน​​
    •   ควรคงปริมาตรของตัวกลางไว้ที่ 20–30% ของความจุทั้งหมดของขวด เพื่อให้แน่ใจว่ามีการถ่ายเทออกซิเจนอย่างเพียงพอและลดแรงเฉือนให้น้อยที่สุด
       
    • •ขีดบอกปริมาตรที่ชัดเจนบนขวดช่วยให้สามารถวัดปริมาตรได้อย่างแม่นยำ
       .
  2. 2. พารามิเตอร์การเขย่า​​
    • ที่แนะนำเครื่องเขย่าฟักไข่ความเร็วในการเขย่า: 75–120 รอบต่อนาที (ปรับได้ตามความต้องการในการทดลอง)
       
    • สำหรับขวดขนาดใหญ่ (≥3 ลิตร) ให้ลดความเร็วลงเหลือ 90 รอบต่อนาที เพื่อป้องกันการเฉือนของของเหลวมากเกินไปและการเกิดฟอง

พารามิเตอร์ที่แนะนำสำหรับเซลล์ CHO และ HEK 293

ปริมาตรขวด ปริมาณการทำงาน ความเร็วในการสั่น
125 มล. 25 มล. 120 รอบต่อนาที
250 มล. 60 มล. 120 รอบต่อนาที
500 มล. 150 มล. 120 รอบต่อนาที
1000 มล. 350 มล. 120 รอบต่อนาที
1500 มล. 400 มล. 120 รอบต่อนาที
2000 มล. 400 มล. 120 รอบต่อนาที
3000 มล. 800 มล. 90 รอบต่อนาที
5000 มล. 2500 มล. 90 รอบต่อนาที

หมายเหตุ: ข้อมูลนี้ใช้ได้กับเซลล์สายพันธุ์ CHO Stable, CHO Transient และ HEK 293 Transient


รายละเอียดทางเทคนิคเพิ่มเติม

  1. 1. วัสดุและความปลอดเชื้อ​​
    • • ตัวเลือกวัสดุ PETG/PC:PETG มีความโปร่งใสสูงและทนทานต่อแรงกระแทก ในขณะที่ PC มีเสถียรภาพทางความร้อนที่เหนือกว่า (ทนต่อการนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121°C)
      •  
    • การฆ่าเชื้อ: ผ่านการฉายรังแกแกมมา บรรจุแยกชิ้น ผ่านการรับรองว่าปราศจาก DNase/RNase ปราศจากเอนโดท็อกซิน และเป็นไปตามมาตรฐาน USP Class VI
       
  2. 2. ข้อดีด้านการออกแบบ​​
    • • ฝาปิดออกแบบตามหลักสรีรศาสตร์: ช่วยให้จับถนัดมือและใช้งานร่วมกับปิเปต/เครื่องขูดเซลล์ได้
       
    • มีรุ่นที่มีแผ่นกั้นให้เลือก: ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการผสมสำหรับการเพาะเลี้ยงที่มีความหนาแน่นสูงโดยการเพิ่มการถ่ายเทออกซิเจน (kLa)
       
  3. 3. หมายเหตุสำคัญเกี่ยวกับการใช้งาน​​
    • หลีกเลี่ยงการเติมมากเกินไป: ปริมาตรที่มากกว่า 30% อาจลดการแลกเปลี่ยนก๊าซ ทำให้เกิดภาวะขาดออกซิเจนในวัฒนธรรมแบบใช้ออกซิเจน
       
    • ตรวจสอบค่า pH/ออกซิเจน: รักษาค่า pH ให้อยู่ที่ 7.0–7.4 (เซลล์ CHO) และออกซิเจนละลาย (DO) >40% เพื่อการเผาผลาญที่เหมาะสม
       
    • ความไวต่อแรงเฉือน: สำหรับเซลล์ที่ไวต่อแรงเฉือน (เช่น เซลล์ T ปฐมภูมิ) ให้ใช้ความเร็วรอบต่ำ (80–100 รอบต่อนาที) หรือใช้สารป้องกันการเกิดฟอง

การประยุกต์ใช้ที่นอกเหนือจากการเพาะปลูกแบบมาตรฐาน

  • ระบบเพอร์ฟิวชั่น: ผสานรวมเข้ากับท่อส่งสารอาหารเพื่อการจ่ายสารอาหารอย่างต่อเนื่อง ทำให้ได้ความหนาแน่นของเซลล์มากกว่า 20 × 10⁶ เซลล์/มล.
     
  • จุลินทรีย์เพาะเลี้ยง: เหมาะสำหรับการหมักแบคทีเรีย/ยีสต์ โดยมีแผ่นกั้นเพื่อการเติมอากาศที่ดีขึ้น
     
  • โปรโตคอลการขยายขนาด: เมื่อเปลี่ยนจากขวดทดลองไปเป็นเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ ให้รักษาอัตราการถ่ายเทออกซิเจนเชิงปริมาตร (kLa) ให้คงที่โดยการปรับการกวนและการเติมอากาศ
     

วันที่เผยแพร่: 17 สิงหาคม 2568