Скільки середовища слід додати в колбу в інкубаторі з струшуванням?
Стерильні колби Ерленмейєра для культивування клітин RADOBIO спеціально розроблені для культивування суспензійних клітин, включаючи клітини HEK 293 та CHO, уструшуючий інкубаторЦі колби мають плоске дно та вентильовану кришку, що робить їх придатними для розробки дрібномасштабних процесів, збільшення масштабів та багатоступеневого культивування. Вентильована кришка містить гідрофобну мембрану товщиною 0,2 мкм, яка забезпечує ефективний газообмін, блокуючи мікробне забруднення та проникнення води, забезпечуючи оптимальні умови для росту клітин.
Основні характеристики та рекомендації щодо використання
- 1. Оптимізація робочого об'єму
- •Об'єм середовища слід підтримувати на рівні 20–30% від загальної місткості колби, щоб забезпечити належне перенесення кисню та мінімізувати напругу зсуву.
- • Чіткі градуювальні позначки на колбі дозволяють точне вимірювання об'єму .
- •Об'єм середовища слід підтримувати на рівні 20–30% від загальної місткості колби, щоб забезпечити належне перенесення кисню та мінімізувати напругу зсуву.
- 2. Параметри струшування
- •Рекомендованоінкубаторний шейкершвидкість струшування: 75–120 об/хв (регулюється залежно від експериментальних потреб)
- •Для більших колб (≥3 л) зменште швидкість до 90 об/хв, щоб запобігти надмірному зсуву рідини та піноутворенню
- •Рекомендованоінкубаторний шейкершвидкість струшування: 75–120 об/хв (регулюється залежно від експериментальних потреб)
Рекомендовані параметри для клітин CHO та HEK 293
| Об'єм колби | Робочий об'єм | Швидкість струшування |
|---|---|---|
| 125 мл | 25 мл | 120 об/хв |
| 250 мл | 60 мл | 120 об/хв |
| 500 мл | 150 мл | 120 об/хв |
| 1000 мл | 350 мл | 120 об/хв |
| 1500 мл | 400 мл | 120 об/хв |
| 2000 мл | 400 мл | 120 об/хв |
| 3000 мл | 800 мл | 90 об/хв |
| 5000 мл | 2500 мл | 90 об/хв |
Примітка: Дані стосуються стабільних клітинних ліній CHO, перехідних клітин CHO та перехідних клітин HEK 293.
Додаткові технічні деталі
- 1. Матеріал та стерильність
- • Варіанти матеріалів PETG/PC:PETG пропонує високу прозорість та ударостійкість; PC забезпечує чудову термостабільність (витримує автоклавування при 121°C)
-
- •Стерилізація: гамма-опромінення, індивідуально упакована, сертифікована як не містить ДНКаз/РНКаз, ендотоксинів та відповідає стандартам USP Class VI
- • Варіанти матеріалів PETG/PC:PETG пропонує високу прозорість та ударостійкість; PC забезпечує чудову термостабільність (витримує автоклавування при 121°C)
- 2. Переваги дизайну
- •Ергономічна кришка: Забезпечує безпечне використання та сумісність з піпетками/скребками для клітин
- •Доступні моделі з перегородками: Підвищує ефективність змішування для культур високої щільності шляхом збільшення переносу кисню (kLa)
- •Ергономічна кришка: Забезпечує безпечне використання та сумісність з піпетками/скребками для клітин
- 3. Важливі примітки щодо використання
- •Уникайте переповнення: об'єми >30% можуть зменшити газообмін, що призводить до гіпоксії в аеробних культурах
- •Контроль pH/кисню: підтримуйте pH на рівні 7,0–7,4 (клітини CHO) та розчинений кисень (DO) >40% для оптимального метаболізму
- •Чутливість до зсуву: Для клітин, чутливих до зсуву (наприклад, первинних Т-клітин), використовуйте нижчі швидкості (80–100 об/хв) або протипінні агенти
- •Уникайте переповнення: об'єми >30% можуть зменшити газообмін, що призводить до гіпоксії в аеробних культурах
Застосування поза межами стандартного культивування
- •Перфузійні системи: інтегруються з лініями живлення для безперервного постачання поживних речовин, досягаючи щільності клітин >20 × 10⁶ клітин/мл
- •Мікробні культури: Підходять для бактеріальної/дріжджової ферментації з перегородками для покращеної аерації
- •Протоколи масштабування: Під час переходу з колб до біореакторів підтримуйте постійну об'ємну швидкість переносу кисню (кЛа), регулюючи перемішування та аерацію.
Час публікації: 17 серпня 2025 р.