Çalkalamalı inkübatördeki şişeye ne kadar besiyeri eklenmelidir?
RADOBIO steril hücre kültürü Erlenmeyer şişeleri, HEK 293 ve CHO hücreleri de dahil olmak üzere süspansiyon halindeki hücrelerin kültivasyonu için özel olarak tasarlanmıştır.çalkalama kuluçka makinesiBu şişeler düz bir tabana ve havalandırmalı bir kapağa sahiptir, bu da onları küçük ölçekli proses geliştirme, ölçek büyütme ve çok aşamalı kültürleme için uygun hale getirir. Havalandırmalı kapak, mikrobiyal kontaminasyonu ve su girişini engellerken verimli gaz değişimini sağlayan 0,2 μm'lik hidrofobik bir membran içerir ve optimum hücre büyüme koşullarını sağlar.
Temel Özellikler ve Kullanım Kılavuzu
- 1. Çalışma Hacmi Optimizasyonu
- •Yeterli oksijen transferini sağlamak ve kesme gerilimini en aza indirmek için orta hacim, toplam şişe kapasitesinin %20-30'u oranında tutulmalıdır.
- •Şişe üzerindeki net ölçü çizgileri, hassas hacim ölçümüne olanak tanır. .
- •Yeterli oksijen transferini sağlamak ve kesme gerilimini en aza indirmek için orta hacim, toplam şişe kapasitesinin %20-30'u oranında tutulmalıdır.
- 2. Çalkalama Parametreleri
- •Tavsiye edilenkuluçka makinesi çalkalayıcıÇalkalama hızı: 75–120 RPM (deneysel ihtiyaçlara göre ayarlanabilir)
- •Daha büyük şişeler (≥3L) için, aşırı sıvı kesme kuvvetini ve köpürmeyi önlemek için hızı 90 RPM'ye düşürün.
- •Tavsiye edilenkuluçka makinesi çalkalayıcıÇalkalama hızı: 75–120 RPM (deneysel ihtiyaçlara göre ayarlanabilir)
CHO ve HEK 293 Hücreleri için Önerilen Parametreler
| Şişe Hacmi | Çalışma Hacmi | Sarsıntı Hızı |
|---|---|---|
| 125 mL | 25 mL | 120 RPM |
| 250 mL | 60 mL | 120 RPM |
| 500 mL | 150 mL | 120 RPM |
| 1000 mL | 350 mL | 120 RPM |
| 1500 mL | 400 mL | 120 RPM |
| 2000 mL | 400 mL | 120 RPM |
| 3000 mL | 800 mL | 90 RPM |
| 5000 mL | 2500 mL | 90 RPM |
Not: Veriler CHO Stable, CHO Transient ve HEK 293 Transient hücre hatları için geçerlidir.
Ek Teknik Detaylar
- 1. Malzeme ve Sterilite
- •PETG/PC Malzeme Seçenekleri:PETG yüksek şeffaflık ve darbe dayanımı sunarken; PC üstün termal kararlılık sağlar (121°C'de otoklavlamaya dayanıklıdır).
-
- •Sterilizasyon: Gama ışınlarıyla ışınlanmış, tek tek paketlenmiş, DNaz/RNaz içermediği sertifikalı, endotoksin içermediği onaylanmış ve USP Sınıf VI standartlarına uygun.
- •PETG/PC Malzeme Seçenekleri:PETG yüksek şeffaflık ve darbe dayanımı sunarken; PC üstün termal kararlılık sağlar (121°C'de otoklavlamaya dayanıklıdır).
- 2. Tasarım Avantajları
- • Ergonomik Kapak: Güvenli kullanım ve pipet/hücre kazıyıcılarla uyumluluğu kolaylaştırır.
- •Mevcut Karışık Modeller: Oksijen transferini (kLa) artırarak yüksek yoğunluklu kültürler için karıştırma verimliliğini artırır.
- • Ergonomik Kapak: Güvenli kullanım ve pipet/hücre kazıyıcılarla uyumluluğu kolaylaştırır.
- 3. Kritik Kullanım Notları
- •Aşırı Doldurmaktan Kaçının: %30'dan fazla hacimler gaz değişimini azaltarak aerobik kültürlerde hipoksiye yol açabilir.
- •pH/Oksijen Takibi: Optimal metabolizma için pH'ı 7,0–7,4 (CHO hücreleri) ve çözünmüş oksijeni (DO) >%40 seviyesinde tutun.
- •Kesme Hassasiyeti: Kesme hassasiyeti yüksek hücreler (örneğin, primer T hücreleri) için daha düşük hızlar (80-100 RPM) veya köpük önleyici maddeler kullanın.
- •Aşırı Doldurmaktan Kaçının: %30'dan fazla hacimler gaz değişimini azaltarak aerobik kültürlerde hipoksiye yol açabilir.
Standart Yetiştirmenin Ötesindeki Uygulamalar
- •Perfüzyon Sistemleri: Sürekli besin tedariki için besleme hatlarıyla entegre olur ve >20 × 10⁶ hücre/mL hücre yoğunluğuna ulaşır.
- •Mikrobiyal Kültürler: Daha iyi havalandırma için bölmeli tasarımlara sahip, bakteri/maya fermantasyonu için uygundur.
- •Ölçeklendirme Protokolleri: Şişelerden biyoreaktörlere geçiş yaparken, karıştırma ve havalandırmayı ayarlayarak tutarlı hacimsel oksijen transfer hızını (kLa) koruyun.
Yayın tarihi: 17 Ağustos 2025