Quanto terreno di coltura bisogna aggiungere alla fiasca in un incubatore a scuotimento?
Le fiasche di Erlenmeyer sterili per colture cellulari RADOBIO sono specificamente progettate per la coltivazione di cellule in sospensione, comprese le cellule HEK 293 e CHO.incubatore a scuotimentoQueste fiasche presentano un fondo piatto e un tappo ventilato, che le rendono adatte allo sviluppo di processi su piccola scala, all'ampliamento di scala e alla coltivazione multistadio. Il tappo ventilato integra una membrana idrofobica da 0,2 μm, che consente un efficiente scambio gassoso bloccando al contempo la contaminazione microbica e la penetrazione dell'acqua, garantendo condizioni ottimali per la crescita cellulare.
Specifiche principali e linee guida per l'uso
- 1. Ottimizzazione del volume di lavoro
- •Il volume del mezzo di coltura deve essere mantenuto al 20-30% della capacità totale della fiasca per garantire un adeguato trasferimento di ossigeno e ridurre al minimo lo stress di taglio.
- •Le chiare tacche di graduazione sulla fiaschetta consentono una misurazione precisa del volume. .
- •Il volume del mezzo di coltura deve essere mantenuto al 20-30% della capacità totale della fiasca per garantire un adeguato trasferimento di ossigeno e ridurre al minimo lo stress di taglio.
- 2. Parametri di agitazione
- •Raccomandatoagitatore incubatoreVelocità di agitazione: 75–120 giri/minuto (regolabile in base alle esigenze sperimentali)
- •Per fiasche più grandi (≥3L), ridurre la velocità a 90 giri/minuto per evitare un'eccessiva sollecitazione del fluido e la formazione di schiuma.
- •Raccomandatoagitatore incubatoreVelocità di agitazione: 75–120 giri/minuto (regolabile in base alle esigenze sperimentali)
Parametri consigliati per le cellule CHO e HEK 293
| Volume della fiaschetta | Voce di lavoro | Velocità di vibrazione |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 giri al minuto |
| 250 ml | 60 ml | 120 giri al minuto |
| 500 ml | 150 ml | 120 giri al minuto |
| 1000 mL | 350 ml | 120 giri al minuto |
| 1500 ml | 400 ml | 120 giri al minuto |
| 2000 ml | 400 ml | 120 giri al minuto |
| 3000 ml | 800 ml | 90 giri al minuto |
| 5000 mL | 2500 ml | 90 giri al minuto |
Nota: i dati si riferiscono alle linee cellulari CHO Stable, CHO Transient e HEK 293 Transient.
Dettagli tecnici supplementari
- 1. Materiale e sterilità
- •Opzioni di materiale PETG/PC:Il PETG offre elevata trasparenza e resistenza agli urti; il PC garantisce una stabilità termica superiore (resiste all'autoclavatura a 121 °C).
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- •Sterilizzazione: irradiazione gamma, confezionamento individuale, certificato privo di DNasi/RNasi, privo di endotossine e conforme agli standard USP Classe VI.
- •Opzioni di materiale PETG/PC:Il PETG offre elevata trasparenza e resistenza agli urti; il PC garantisce una stabilità termica superiore (resiste all'autoclavatura a 121 °C).
- 2. Vantaggi del design
- • Tappo ergonomico: facilita la manipolazione sicura e la compatibilità con pipette/raschietti cellulari
- •Modelli con deflettori disponibili: migliora l'efficienza di miscelazione per colture ad alta densità aumentando il trasferimento di ossigeno (kLa)
- • Tappo ergonomico: facilita la manipolazione sicura e la compatibilità con pipette/raschietti cellulari
- 3. Note sull'utilizzo critico
- •Evitare il riempimento eccessivo: volumi superiori al 30% possono ridurre lo scambio gassoso, causando ipossia nelle colture aerobiche.
- •Monitorare pH/ossigeno: mantenere il pH a 7,0–7,4 (cellule CHO) e l'ossigeno disciolto (DO) >40% per un metabolismo ottimale.
- •Sensibilità allo sforzo di taglio: per le cellule sensibili allo sforzo di taglio (ad esempio, cellule T primarie), utilizzare velocità inferiori (80-100 giri/min) o agenti antischiuma.
- •Evitare il riempimento eccessivo: volumi superiori al 30% possono ridurre lo scambio gassoso, causando ipossia nelle colture aerobiche.
Applicazioni al di là della coltivazione standard
- •Sistemi di perfusione: si integrano con le linee di alimentazione per un apporto continuo di nutrienti, raggiungendo densità cellulari >20 × 10⁶ cellule/mL
- •Colture microbiche: adatte alla fermentazione batterica/di lievito con design a deflettori per una migliore aerazione
- •Protocolli di scalabilità: durante la transizione dalle fiasche ai bioreattori, mantenere costante il tasso di trasferimento volumetrico di ossigeno (kLa) regolando l'agitazione e l'aerazione.
Data di pubblicazione: 17 agosto 2025