چه مقدار محیط کشت باید به ارلن در انکوباتور شیکردار اضافه شود؟

مشخصات کلیدی و دستورالعمل‌های استفاده

1. ۱. بهینه‌سازی حجم کار‎‏‎ ‎‏ ...
   •   •حجم متوسط ​​باید در 20 تا 30 درصد از کل ظرفیت فلاسک حفظ شود تا انتقال اکسیژن کافی تضمین شود و تنش برشی به حداقل برسد.
      
   • •علامت‌های درجه‌بندی واضح روی بالن، اندازه‌گیری دقیق حجم را امکان‌پذیر می‌کند.
      .
2. ۲. پارامترهای لرزش‎‏‎ ‎‏ ...
   • •توصیه شدهشیکر انکوباتورسرعت هم زدن: ۷۵ تا ۱۲۰ دور در دقیقه (قابل تنظیم بر اساس نیازهای آزمایشگاهی)
      
   • •برای فلاسک‌های بزرگتر (≥3 لیتر)، سرعت را به 90 دور در دقیقه کاهش دهید تا از برش بیش از حد مایع و کف کردن جلوگیری شود.

---

پارامترهای پیشنهادی برای سلول‌های CHO و HEK 293

توجه: داده‌ها مربوط به رده‌های سلولی CHO پایدار، CHO گذرا و HEK 293 گذرا است.

---

جزئیات فنی تکمیلی

1. ۱. مواد و استریل بودن‎‏‎ ‎‏ ...
   • • گزینه‌های مواد PETG/PC:PETG شفافیت بالا و مقاومت در برابر ضربه را ارائه می‌دهد؛ PC پایداری حرارتی فوق‌العاده‌ای دارد (در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد در برابر اتوکلاو مقاومت می‌کند)
     •  
   • •استریلیزاسیون: پرتودهی شده با گاما، بسته‌بندی جداگانه، دارای گواهی عدم وجود DNase/RNase، فاقد اندوتوکسین، و مطابق با استانداردهای USP Class VI
      
2. ۲. مزایای طراحی‎‏‎ ‎‏ ...
   • •​​درپوش ارگونومیک​​: جابجایی ایمن و سازگاری با پیپت‌ها/تراشنده‌های سلولی را تسهیل می‌کند
      
   • •مدل‌های بافل‌دار موجود: با افزایش انتقال اکسیژن (kLa) راندمان اختلاط را برای کشت‌های با تراکم بالا افزایش می‌دهد.
      
3. ۳. نکات مهم در استفاده‎‏‎ ‎‏ ...
   • •از پر کردن بیش از حد خودداری کنید: حجم‌های >30% ممکن است تبادل گاز را کاهش داده و منجر به هیپوکسی در کشت‌های هوازی شوند.
      
   • •نظارت بر pH/اکسیژن: برای متابولیسم بهینه، pH را در محدوده 7.0 تا 7.4 (سلول‌های CHO) و اکسیژن محلول (DO) را >40٪ حفظ کنید.
      
   • •حساسیت به برش: برای سلول‌های حساس به برش (مثلاً سلول‌های T اولیه)، از سرعت‌های پایین‌تر (80 تا 100 دور در دقیقه) یا عوامل ضد کف استفاده کنید.

---

کاربردهایی فراتر از کشت استاندارد

• •سیستم‌های پرفیوژن: برای تأمین مداوم مواد مغذی، با خطوط تغذیه ادغام می‌شوند و به تراکم سلولی > 20 × 10⁶ سلول در میلی‌لیتر دست می‌یابند.
   
• •کشت‌های میکروبی: مناسب برای تخمیر باکتریایی/مخمر با طراحی‌های بافل‌دار برای بهبود هوادهی
   
• •پروتکل‌های افزایش مقیاس: هنگام انتقال از فلاسک‌ها به بیوراکتورها، با تنظیم همزدن و هوادهی، نرخ انتقال اکسیژن حجمی ثابت (kLa) را حفظ کنید.