Hur mycket medium ska tillsättas i kolven i en skakinkubator?
RADOBIOs sterila cellodlings-Erlenmeyerkolvar är speciellt utformade för odling av suspensionsceller inklusive HEK 293- och CHO-celler i enskakinkubatorDessa kolvar har en platt botten och ett ventilerat lock, vilket gör dem lämpliga för småskalig processutveckling, uppskalning och odling i flera steg. Det ventilerade locket integrerar ett 0,2 μm hydrofobt membran, vilket möjliggör effektivt gasutbyte samtidigt som det blockerar mikrobiell kontaminering och vattenpenetration, vilket säkerställer optimala celltillväxtförhållanden.
Viktiga specifikationer och användningsriktlinjer
- 1. Optimering av arbetsvolym.
- •Medelvolymen bör bibehållas på 20–30 % av kolvens totala kapacitet för att säkerställa tillräcklig syreöverföring och minimera skjuvspänning.
- • Tydliga graderingsmarkeringar på kolven möjliggör exakt volymmätning .
- •Medelvolymen bör bibehållas på 20–30 % av kolvens totala kapacitet för att säkerställa tillräcklig syreöverföring och minimera skjuvspänning.
- 2. Skakningsparametrar.
- •Rekommenderadinkubatorskakareskakhastighet: 75–120 varv/min (justerbar baserat på experimentella behov)
- •För större flaskor (≥3L), minska hastigheten till 90 varv/min för att förhindra överdriven vätskeskjuvning och skumbildning.
- •Rekommenderadinkubatorskakareskakhastighet: 75–120 varv/min (justerbar baserat på experimentella behov)
Rekommenderade parametrar för CHO- och HEK 293-celler
| Kolvvolym | Arbetsvolym | Skakningshastighet |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 varv/min |
| 250 ml | 60 ml | 120 varv/min |
| 500 ml | 150 ml | 120 varv/min |
| 1000 ml | 350 ml | 120 varv/min |
| 1500 ml | 400 ml | 120 varv/min |
| 2000 ml | 400 ml | 120 varv/min |
| 3000 ml | 800 ml | 90 varv/min |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 varv/min |
Obs: Data gäller för CHO-stabila, CHO-transienta och HEK 293-transienta cellinjer.
Kompletterande tekniska detaljer
- 1. Material och sterilitet.
- •PETG/PC-materialalternativ:PETG erbjuder hög transparens och slagtålighet; PC ger överlägsen termisk stabilitet (tål autoklavering vid 121 °C)
-
- •Sterilisering: Gammabestrålad, individuellt förpackad, certifierad DNase/RNase-fri, endotoxinfri och i enlighet med USP klass VI-standarder
- •PETG/PC-materialalternativ:PETG erbjuder hög transparens och slagtålighet; PC ger överlägsen termisk stabilitet (tål autoklavering vid 121 °C)
- 2. Designfördelar.
- •Ergonomiskt lock: Underlättar säker hantering och kompatibilitet med pipetter/cellskrapor
- •Tillgängliga förvirrade modeller: Förbättrar blandningseffektiviteten för kulturer med hög densitet genom att öka syreöverföringen (kLa)
- •Ergonomiskt lock: Underlättar säker hantering och kompatibilitet med pipetter/cellskrapor
- 3. Viktiga användningsanmärkningar.
- •Undvik överfyllning: Volymer >30 % kan minska gasutbytet, vilket leder till hypoxi i aeroba kulturer.
- •Övervaka pH/syre: Bibehåll pH på 7,0–7,4 (CHO-celler) och löst syre (DO) >40 % för optimal metabolism.
- •Skjuvkänslighet: För skjuvkänsliga celler (t.ex. primära T-celler), använd lägre hastigheter (80–100 varv/min) eller skumdämpande medel.
- •Undvik överfyllning: Volymer >30 % kan minska gasutbytet, vilket leder till hypoxi i aeroba kulturer.
Tillämpningar utöver standardodling
- •Perfusionssystem: Integreras med matningsledningar för kontinuerlig näringstillförsel, vilket uppnår celldensiteter >20 × 10⁶ celler/ml
- •Mikrobiella kulturer: Lämplig för bakteriell/jästjäsning med bafflade konstruktioner för förbättrad luftning
- •Uppskalningsprotokoll: Vid övergång från kolvar till bioreaktorer, bibehåll en jämn volymetrisk syreöverföringshastighet (kLa) genom att justera omrörning och luftning.
Publiceringstid: 17 augusti 2025