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振とう培養器内のフラスコには、どのくらいの量の培地を加えるべきですか?


振とう培養器内のフラスコには、どのくらいの量の培地を加えるべきですか?
RADOBIOの滅菌細胞培養用エルレンマイヤーフラスコは、HEK 293細胞やCHO細胞などの浮遊細胞を培養するために特別に設計されています。振とう培養器これらのフラスコは平底で通気孔付きキャップを備えているため、小規模なプロセス開発、スケールアップ、および多段階培養に適しています。通気孔付きキャップには0.2μmの疎水性膜が組み込まれており、微生物汚染や水の浸透を防ぎながら効率的なガス交換を可能にし、最適な細胞増殖条件を確保します。
 

主な仕様と使用ガイドライン

  1. 1.作業容量の最適化​​
    •   酸素の適切な移動を確保し、せん断応力を最小限に抑えるため、培地の量はフラスコ全体の容量の20~30%に維持する必要がある。
       
    • ・フラスコに明確な目盛りが付いているため、正確な体積測定が可能です。
       .
  2. 2.振動パラメータ​​
    • 推奨インキュベーターシェーカー振とう速度:75~120回転/分(実験ニーズに応じて調整可能)
       
    • より大きなフラスコ(3L以上)の場合は、過剰な流体せん断と泡立ちを防ぐため、回転速度を90 RPMに下げてください。

CHO細胞およびHEK293細胞に対する推奨パラメーター

フラスコ容量 作業容量 振動速度
125 mL 25 mL 120回転/分
250mL 60 mL 120回転/分
500mL 150mL 120回転/分
1000 mL 350mL 120回転/分
1500 mL 400mL 120回転/分
2000 mL 400mL 120回転/分
3000 mL 800 mL 90回転/分
5000 mL 2500 mL 90回転/分

注:このデータは、CHO Stable細胞株、CHO Transient細胞株、およびHEK 293 Transient細胞株に適用されます。


補足的な技術詳細

  1. 1. 材料と滅菌状態​​
    • •PETG/PC素材オプション:PETGは高い透明性と耐衝撃性を備え、PCは優れた耐熱性(121℃でのオートクレーブ処理に耐える)を備えている。
      •  
    • 滅菌:ガンマ線照射済み、個包装、DNase/RNaseフリー、エンドトキシンフリー認証済み、USPクラスVI規格準拠
       
  2. 2.設計上の利点​​
    • ・人間工学に基づいたキャップ:安全な取り扱いを容易にし、ピペット/セルスクレーパーとの互換性を確保します。
       
    • バッフル付きモデルもご用意しています:酸素移動量(kLa)を増加させることで、高密度培養における混合効率を高めます。
       
  3. 3.重要な使用上の注意​​
    • 過剰充填は避けてください:容量が30%を超えるとガス交換が阻害され、好気性培養において低酸素症を引き起こす可能性があります。
       
    • pH/酸素濃度のモニタリング:最適な代謝のために、pHを7.0~7.4(CHO細胞の場合)、溶存酸素濃度(DO)を40%以上に維持してください。
       
    • せん断感受性:せん断感受性細胞(例:初代T細胞)の場合は、低速(80~100 RPM)または消泡剤を使用してください。

標準栽培以外の用途

  • 灌流システム:栄養供給ラインと統合することで、20 × 10⁶ 細胞/mL を超える細胞密度を実現します。
     
  • 微生物培養:通気性を向上させるためのバッフル設計により、細菌/酵母発酵に適しています。
     
  • スケールアップ手順:フラスコからバイオリアクターに移行する際は、撹拌と通気を調整して、一定の体積酸素移動速度(kLa)を維持する。
     

投稿日時:2025年8月17日