Hoeveel medium moet er aan de kolf in een schudincubator worden toegevoegd?
RADOBIO steriele celkweek-Erlenmeyerflessen zijn speciaal ontworpen voor het kweken van suspensiecellen, waaronder HEK 293- en CHO-cellen.schudbroedmachineDeze kolven hebben een vlakke bodem en een geventileerde dop, waardoor ze geschikt zijn voor kleinschalige procesontwikkeling, opschaling en meertrapsteelt. De geventileerde dop is voorzien van een hydrofoob membraan van 0,2 μm, dat een efficiënte gasuitwisseling mogelijk maakt en tegelijkertijd microbiële besmetting en waterpenetratie blokkeert, waardoor optimale omstandigheden voor celgroei worden gegarandeerd.
Belangrijkste specificaties en gebruiksrichtlijnen
- 1. Optimalisatie van het werkvolume
- •Het mediumvolume moet op 20-30% van de totale inhoud van de kolf worden gehouden om een adequate zuurstofoverdracht te garanderen en schuifspanning te minimaliseren.
- •Duidelijke maatstrepen op de kolf maken nauwkeurige volumemeting mogelijk. .
- •Het mediumvolume moet op 20-30% van de totale inhoud van de kolf worden gehouden om een adequate zuurstofoverdracht te garanderen en schuifspanning te minimaliseren.
- 2. Schudparameters
- •Aanbevolenbroedmachine schudmachineSchudsnelheid: 75–120 RPM (instelbaar afhankelijk van de experimentele behoeften)
- •Voor grotere kolven (≥3L) de snelheid verlagen tot 90 RPM om overmatige vloeistofschuiving en schuimvorming te voorkomen.
- •Aanbevolenbroedmachine schudmachineSchudsnelheid: 75–120 RPM (instelbaar afhankelijk van de experimentele behoeften)
Aanbevolen parameters voor CHO- en HEK 293-cellen
| Flesvolume | Werkvolume | Schudsnelheid |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 toeren per minuut |
| 250 ml | 60 ml | 120 toeren per minuut |
| 500 ml | 150 ml | 120 toeren per minuut |
| 1000 ml | 350 ml | 120 toeren per minuut |
| 1500 ml | 400 ml | 120 toeren per minuut |
| 2000 ml | 400 ml | 120 toeren per minuut |
| 3000 ml | 800 ml | 90 toeren per minuut |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 toeren per minuut |
Opmerking: De gegevens zijn van toepassing op de cellijnen CHO Stable, CHO Transient en HEK 293 Transient.
Aanvullende technische details
- 1. Materiaal en steriliteit
- • PETG/PC-materiaalopties:PETG biedt een hoge transparantie en slagvastheid; PC biedt een superieure thermische stabiliteit (bestand tegen autoclaveren bij 121 °C).
-
- •Sterilisatie: Gammastraling, individueel verpakt, gecertificeerd DNase/RNase-vrij, endotoxinevrij en voldoet aan de USP Klasse VI-normen.
- • PETG/PC-materiaalopties:PETG biedt een hoge transparantie en slagvastheid; PC biedt een superieure thermische stabiliteit (bestand tegen autoclaveren bij 121 °C).
- 2. Ontwerpvoordelen
- • Ergonomische dop: Vergemakkelijkt een veilige hantering en compatibiliteit met pipetten/celkrabbers
- •Beschikbare modellen met schotten: Verbetert de mengefficiëntie voor culturen met hoge dichtheid door de zuurstofoverdracht te verhogen (kLa)
- • Ergonomische dop: Vergemakkelijkt een veilige hantering en compatibiliteit met pipetten/celkrabbers
- 3. Kritische gebruiksaanwijzingen
- •Vermijd overvulling: volumes van meer dan 30% kunnen de gasuitwisseling verminderen, wat kan leiden tot hypoxie in aerobe culturen.
- •pH/zuurstof controleren: Handhaaf de pH op 7,0–7,4 (CHO-cellen) en het opgeloste zuurstofgehalte (DO) op >40% voor een optimale stofwisseling.
- •Schuifkrachtgevoeligheid: Gebruik voor schuifkrachtgevoelige cellen (bijv. primaire T-cellen) lagere snelheden (80-100 RPM) of antischuimmiddelen.
- •Vermijd overvulling: volumes van meer dan 30% kunnen de gasuitwisseling verminderen, wat kan leiden tot hypoxie in aerobe culturen.
Toepassingen die verder gaan dan de standaardteelt
- •Perfusiesystemen: Integreren met voedingsleidingen voor continue toevoer van voedingsstoffen, waardoor celdichtheden van >20 × 10⁶ cellen/ml worden bereikt.
- •Microbiële culturen: Geschikt voor bacteriële/gistfermentatie met schotten voor verbeterde beluchting.
- •Opschalingsprotocollen: Bij de overgang van kolven naar bioreactoren dient een constante volumetrische zuurstofoverdrachtssnelheid (kLa) te worden gehandhaafd door de roering en beluchting aan te passen.
Geplaatst op: 17 augustus 2025