Hvor meget medium skal tilsættes kolben i en rysteinkubator?
RADOBIO sterile cellekultur-Erlenmeyerkolber er specielt designet til dyrkning af suspensionsceller, herunder HEK 293- og CHO-celler, i enrysteinkubatorDisse kolber har en flad bund og en ventileret hætte, hvilket gør dem velegnede til procesudvikling i lille skala, opskalering og dyrkning i flere trin. Den ventilerede hætte integrerer en 0,2 μm hydrofob membran, som muliggør effektiv gasudveksling, samtidig med at den blokerer mikrobiel kontaminering og vandindtrængning, hvilket sikrer optimale cellevækstbetingelser.
Vigtige specifikationer og brugsvejledning
- 1. Optimering af arbejdsvolumen
- •Mediumvolumen bør opretholdes på 20-30% af kolbens samlede kapacitet for at sikre tilstrækkelig iltoverførsel og minimere forskydningsspænding.
- • Tydelige gradueringsmærker på kolben muliggør præcis volumenmåling .
- •Mediumvolumen bør opretholdes på 20-30% af kolbens samlede kapacitet for at sikre tilstrækkelig iltoverførsel og minimere forskydningsspænding.
- 2. Rysteparametre
- •Anbefaletinkubatorrysterrystehastighed: 75–120 o/min (kan justeres efter eksperimentelle behov)
- •For større kolber (≥3L), reducer hastigheden til 90 o/min for at forhindre overdreven væskeforskydning og skumdannelse.
- •Anbefaletinkubatorrysterrystehastighed: 75–120 o/min (kan justeres efter eksperimentelle behov)
Anbefalede parametre for CHO- og HEK 293-celler
| Kolbevolumen | Arbejdsvolumen | Rystehastighed |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 omdr./min. |
| 250 ml | 60 ml | 120 omdr./min. |
| 500 ml | 150 ml | 120 omdr./min. |
| 1000 ml | 350 ml | 120 omdr./min. |
| 1500 ml | 400 ml | 120 omdr./min. |
| 2000 ml | 400 ml | 120 omdr./min. |
| 3000 ml | 800 ml | 90 omdr./min. |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 omdr./min. |
Bemærk: Data gælder for CHO Stable, CHO Transient og HEK 293 Transient cellelinjer.
Supplerende tekniske detaljer
- 1. Materiale og sterilitet
- •PETG/PC-materialemuligheder:PETG tilbyder høj gennemsigtighed og slagfasthed; PC giver overlegen termisk stabilitet (modstår autoklavering ved 121°C)
-
- •Sterilisering: Gammabestrålet, individuelt pakket, certificeret DNase/RNase-fri, endotoksinfri og i overensstemmelse med USP klasse VI-standarder
- •PETG/PC-materialemuligheder:PETG tilbyder høj gennemsigtighed og slagfasthed; PC giver overlegen termisk stabilitet (modstår autoklavering ved 121°C)
- 2. Designfordele
- • Ergonomisk hætte: Gør det lettere at håndtere og er kompatibel med pipetter/celleskrabere
- •Tilgængelige modeller med uforståelige egenskaber: Forbedrer blandingseffektiviteten for kulturer med høj densitet ved at øge iltoverførslen (kLa)
- • Ergonomisk hætte: Gør det lettere at håndtere og er kompatibel med pipetter/celleskrabere
- 3. Vigtige brugsnoter
- •Undgå overfyldning: Volumener >30% kan reducere gasudvekslingen, hvilket fører til hypoxi i aerobe kulturer.
- •Overvåg pH/ilt: Hold pH på 7,0-7,4 (CHO-celler) og opløst ilt (DO) >40 % for optimal metabolisme.
- •Forskydningsfølsomhed: For forskydningsfølsomme celler (f.eks. primære T-celler) skal der anvendes lavere hastigheder (80-100 o/min) eller antiskummidler.
- •Undgå overfyldning: Volumener >30% kan reducere gasudvekslingen, hvilket fører til hypoxi i aerobe kulturer.
Anvendelser ud over standarddyrkning
- •Perfusionssystemer: Integrer med fødeledninger for kontinuerlig næringsstofforsyning, hvilket opnår celletætheder >20 × 10⁶ celler/ml
- •Mikrobielle kulturer: Velegnet til bakterie-/gærfermentering med baffeldesign for forbedret beluftning
- •Opskaleringsprotokoller: Ved overgang fra kolber til bioreaktorer skal en konstant volumetrisk iltoverførselshastighed (kLa) opretholdes ved at justere omrøring og beluftning.
Opslagstidspunkt: 17. august 2025