Сколько питательной среды следует добавить в колбу в шейкерном инкубаторе?

Основные технические характеристики и рекомендации по использованию

1. 1. Оптимизация рабочего объема​​
   •   •Объем среды следует поддерживать на уровне 20–30% от общей вместимости колбы для обеспечения достаточного переноса кислорода и минимизации сдвигового напряжения.
      
   • • Четкие градуировочные метки на колбе позволяют точно измерять объем.
      .
2. 2. Параметры встряхивания​​
   • •Рекомендуетсяинкубатор шейкерСкорость встряхивания: 75–120 об/мин (регулируется в зависимости от потребностей эксперимента)
      
   • •Для колб большего объема (≥3 л) уменьшите скорость вращения до 90 об/мин, чтобы предотвратить чрезмерное сдвиговое воздействие на жидкость и пенообразование.

---

Рекомендуемые параметры для клеток CHO и HEK 293

Примечание: Данные относятся к клеточным линиям CHO Stable, CHO Transient и HEK 293 Transient.

---

Дополнительные технические характеристики

1. 1. Материал и стерильность​​
   • •Варианты материалов PETG/PC:ПЭТГ обладает высокой прозрачностью и ударопрочностью; ПК обеспечивает превосходную термическую стабильность (выдерживает автоклавирование при 121°C).
     •  
   • •Стерилизация: гамма-облучение, индивидуальная упаковка, сертифицировано как не содержащее ДНКазы/РНКазы, эндотоксинов и соответствующее стандартам USP класса VI.
      
2. 2. Преимущества дизайна​​
   • • Эргономичная крышка: обеспечивает надежное обращение и совместимость с пипетками/скребками для клеток.
      
   • •Доступны модели с перегородками: повышают эффективность перемешивания в культурах высокой плотности за счет увеличения переноса кислорода (кЛа).
      
3. 3. Важные замечания по использованию​​
   • •Избегайте переполнения: объем более 30% может снизить газообмен, что приведет к гипоксии в аэробных культурах.
      
   • •Контроль pH/кислорода: поддерживайте pH на уровне 7,0–7,4 (клетки CHO) и содержание растворенного кислорода (DO) >40% для оптимального метаболизма.
      
   • •Чувствительность к сдвигу: Для чувствительных к сдвигу клеток (например, первичных Т-клеток) используйте более низкие скорости (80–100 об/мин) или пеногасители.

---

Применение за пределами стандартного выращивания

• •Перфузионные системы: Интегрируются с линиями подачи питательных веществ для непрерывной подачи питательных веществ, обеспечивая плотность клеток >20 × 10⁶ клеток/мл.
   
• •Микробные культуры: Подходят для бактериальной/дрожжевой ферментации, имеют конструкцию с перегородками для улучшения аэрации.
   
• •Протоколы масштабирования: При переходе от колб к биореакторам поддерживайте постоянную объемную скорость переноса кислорода (кЛК) путем регулирования перемешивания и аэрации.