¿Qué cantidad de medio de cultivo se debe añadir al matraz en una incubadora con agitación?
Los matraces Erlenmeyer estériles para cultivo celular de RADOBIO están diseñados específicamente para el cultivo de células en suspensión, incluidas las células HEK 293 y CHO, en unincubadora con agitaciónEstos matraces cuentan con un fondo plano y una tapa ventilada, lo que los hace adecuados para el desarrollo de procesos a pequeña escala, la ampliación de escala y el cultivo en múltiples etapas. La tapa ventilada integra una membrana hidrofóbica de 0,2 μm, que permite un intercambio de gases eficiente a la vez que bloquea la contaminación microbiana y la penetración de agua, asegurando así condiciones óptimas para el crecimiento celular.
Especificaciones clave y pautas de uso
- 1. Optimización del volumen de trabajo
- •El volumen del medio debe mantenerse entre el 20 y el 30 % de la capacidad total del matraz para asegurar una transferencia de oxígeno adecuada y minimizar la tensión de cizallamiento.
- •Las marcas de graduación claras en el matraz permiten una medición precisa del volumen. .
- •El volumen del medio debe mantenerse entre el 20 y el 30 % de la capacidad total del matraz para asegurar una transferencia de oxígeno adecuada y minimizar la tensión de cizallamiento.
- 2. Parámetros de agitación
- •Recomendadoagitador de incubadoraVelocidad de agitación: 75–120 RPM (ajustable según las necesidades experimentales)
- •Para matraces más grandes (≥3 L), reduzca la velocidad a 90 RPM para evitar una cizalladura excesiva del fluido y la formación de espuma.
- •Recomendadoagitador de incubadoraVelocidad de agitación: 75–120 RPM (ajustable según las necesidades experimentales)
Parámetros recomendados para células CHO y HEK 293
| Volumen del matraz | Volumen de trabajo | Velocidad de vibración |
|---|---|---|
| 125 ml | 25 ml | 120 RPM |
| 250 ml | 60 ml | 120 RPM |
| 500 ml | 150 ml | 120 RPM |
| 1000 ml | 350 ml | 120 RPM |
| 1500 ml | 400 ml | 120 RPM |
| 2000 ml | 400 ml | 120 RPM |
| 3000 ml | 800 ml | 90 RPM |
| 5000 ml | 2500 ml | 90 RPM |
Nota: Los datos se aplican a las líneas celulares CHO Estable, CHO Transitoria y HEK 293 Transitoria.
Detalles técnicos complementarios
- 1. Material y esterilidad
- •Opciones de material PETG/PC:El PETG ofrece alta transparencia y resistencia a los impactos; el PC proporciona una estabilidad térmica superior (resiste la esterilización en autoclave a 121 °C).
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- •Esterilización: Irradiado con rayos gamma, envasado individualmente, certificado libre de ADNasa/ARNasa, libre de endotoxinas y conforme a las normas USP Clase VI.
- •Opciones de material PETG/PC:El PETG ofrece alta transparencia y resistencia a los impactos; el PC proporciona una estabilidad térmica superior (resiste la esterilización en autoclave a 121 °C).
- 2. Ventajas del diseño
- • Tapa ergonómica: Facilita un manejo seguro y la compatibilidad con pipetas/raspadores celulares.
- •Modelos con deflectores disponibles: Mejora la eficiencia de la mezcla para cultivos de alta densidad al aumentar la transferencia de oxígeno (kLa).
- • Tapa ergonómica: Facilita un manejo seguro y la compatibilidad con pipetas/raspadores celulares.
- 3. Notas de uso crítico
- •Evite el sobrellenado: Los volúmenes superiores al 30 % pueden reducir el intercambio de gases, lo que puede provocar hipoxia en cultivos aerobios.
- •Monitorear pH/oxígeno: Mantener el pH entre 7,0 y 7,4 (células CHO) y el oxígeno disuelto (OD) >40% para un metabolismo óptimo.
- •Sensibilidad al cizallamiento: Para células sensibles al cizallamiento (por ejemplo, células T primarias), utilice velocidades más bajas (80-100 RPM) o agentes antiespumantes.
- •Evite el sobrellenado: Los volúmenes superiores al 30 % pueden reducir el intercambio de gases, lo que puede provocar hipoxia en cultivos aerobios.
Aplicaciones más allá del cultivo estándar
- •Sistemas de perfusión: se integran con las líneas de alimentación para un suministro continuo de nutrientes, logrando densidades celulares >20 × 10⁶ células/mL.
- •Cultivos microbianos: Adecuados para la fermentación bacteriana/de levaduras con diseños con deflectores para una mejor aireación.
- •Protocolos de escalado: Al pasar de matraces a biorreactores, mantenga una tasa de transferencia de oxígeno volumétrica (kLa) constante ajustando la agitación y la aireación.
Fecha de publicación: 17 de agosto de 2025