Какво количество среда трябва да се добави към колбата в инкубатор с разклащане?
Стерилните ерленмайерови колби за клетъчни култури RADOBIO са специално проектирани за култивиране на суспензионни клетки, включително HEK 293 и CHO клетки в...разклащащ се инкубаторТези колби са с плоско дъно и вентилирана капачка, което ги прави подходящи за разработване на малки процеси, увеличаване на мащаба и многоетапно култивиране. Вентилираната капачка е снабдена с хидрофобна мембрана с дебелина 0,2 μm, която позволява ефективен газообмен, като същевременно блокира микробното замърсяване и проникването на вода, осигурявайки оптимални условия за растеж на клетките.
Основни спецификации и насоки за употреба
- 1. Оптимизация на работния обем
- •Обемът на средата трябва да се поддържа на 20–30% от общия капацитет на колбата, за да се осигури адекватен пренос на кислород и да се сведе до минимум напрежението на срязване.
- • Ясните градуировки на колбата позволяват прецизно измерване на обема .
- •Обемът на средата трябва да се поддържа на 20–30% от общия капацитет на колбата, за да се осигури адекватен пренос на кислород и да се сведе до минимум напрежението на срязване.
- 2. Параметри на разклащане
- •Препоръчаноинкубаторен шейкърскорост на разклащане: 75–120 об/мин (регулируема според експерименталните нужди)
- •За по-големи колби (≥3L), намалете скоростта до 90 об/мин, за да предотвратите прекомерно срязване на течността и образуване на пяна.
- •Препоръчаноинкубаторен шейкърскорост на разклащане: 75–120 об/мин (регулируема според експерименталните нужди)
Препоръчителни параметри за CHO и HEK 293 клетки
| Обем на колбата | Работен обем | Скорост на разклащане |
|---|---|---|
| 125 мл | 25 мл | 120 об/мин |
| 250 мл | 60 мл | 120 об/мин |
| 500 мл | 150 мл | 120 об/мин |
| 1000 мл | 350 мл | 120 об/мин |
| 1500 мл | 400 мл | 120 об/мин |
| 2000 мл | 400 мл | 120 об/мин |
| 3000 мл | 800 мл | 90 об/мин |
| 5000 мл | 2500 мл | 90 об/мин |
Забележка: Данните се отнасят за клетъчни линии CHO Stable, CHO Transient и HEK 293 Transient.
Допълнителни технически подробности
- 1. Материал и стерилност
- • Опции за материали PETG/PC:PETG предлага висока прозрачност и устойчивост на удар; PC осигурява превъзходна термична стабилност (издържа на автоклавиране при 121°C)
-
- •Стерилизация: Гама-облъчена, индивидуално опакована, сертифицирана като без ДНКаза/РНКаза, без ендотоксини и съответстваща на стандартите USP Class VI
- • Опции за материали PETG/PC:PETG предлага висока прозрачност и устойчивост на удар; PC осигурява превъзходна термична стабилност (издържа на автоклавиране при 121°C)
- 2. Предимства на дизайна
- • Ергономична капачка: Улеснява сигурното боравене и е съвместима с пипети/скрейпъри за клетки
- •Налични са модели с преграда: Подобрява ефективността на смесване за култури с висока плътност чрез увеличаване на преноса на кислород (kLa)
- • Ергономична капачка: Улеснява сигурното боравене и е съвместима с пипети/скрейпъри за клетки
- 3.Критични бележки за употреба
- •Избягвайте препълване: Обеми >30% могат да намалят газообмена, което води до хипоксия в аеробните култури
- •Мониториране на pH/кислород: Поддържайте pH на ниво 7,0–7,4 (CHO клетки) и разтворен кислород (DO) >40% за оптимален метаболизъм
- •Чувствителност на срязване: За клетки, чувствителни на срязване (напр. първични Т-клетки), използвайте по-ниски скорости (80–100 об/мин) или антипенители
- •Избягвайте препълване: Обеми >30% могат да намалят газообмена, което води до хипоксия в аеробните култури
Приложения отвъд стандартното култивиране
- •Перфузионни системи: Интегрират се с линии за подаване на хранителни вещества за непрекъснато подаване на хранителни вещества, постигайки клетъчна плътност >20 × 10⁶ клетки/mL
- •Микробни култури: Подходящи за бактериална/дрождева ферментация с прегради за подобрена аерация
- •Протоколи за мащабиране: При преминаване от колби към биореактори, поддържайте постоянна обемна скорост на пренос на кислород (kLa) чрез регулиране на разбъркването и аерирането.
Време на публикуване: 17 август 2025 г.