Quelle quantité de milieu faut-il ajouter au flacon placé dans un incubateur agité ?
Les flacons Erlenmeyer stériles pour culture cellulaire RADOBIO sont spécialement conçus pour la culture de cellules en suspension, notamment les cellules HEK 293 et CHO.incubateur agitateurCes flacons sont dotés d'un fond plat et d'un bouchon ventilé, ce qui les rend adaptés au développement de procédés à petite échelle, à la transposition d'échelle et à la culture multi-étapes. Le bouchon ventilé intègre une membrane hydrophobe de 0,2 μm, permettant des échanges gazeux efficaces tout en bloquant la contamination microbienne et la pénétration d'eau, garantissant ainsi des conditions de croissance cellulaire optimales.
Caractéristiques principales et consignes d'utilisation
- 1. Optimisation du volume de travail
- •Le volume de milieu doit être maintenu à 20–30 % de la capacité totale du flacon afin d'assurer un transfert d'oxygène adéquat et de minimiser les contraintes de cisaillement.
- • Les graduations claires sur le flacon permettent une mesure précise du volume .
- •Le volume de milieu doit être maintenu à 20–30 % de la capacité totale du flacon afin d'assurer un transfert d'oxygène adéquat et de minimiser les contraintes de cisaillement.
- 2. Paramètres de vibration
- •Recommandéagitateur d'incubateurVitesse d'agitation : 75–120 tr/min (réglable en fonction des besoins expérimentaux)
- •Pour les flacons de grande capacité (≥ 3 L), réduire la vitesse à 90 tr/min afin d'éviter un cisaillement excessif du fluide et la formation de mousse.
- •Recommandéagitateur d'incubateurVitesse d'agitation : 75–120 tr/min (réglable en fonction des besoins expérimentaux)
Paramètres recommandés pour les cellules CHO et HEK 293
| Volume du flacon | Volume de travail | Vitesse de secousse |
|---|---|---|
| 125 mL | 25 mL | 120 tr/min |
| 250 mL | 60 mL | 120 tr/min |
| 500 mL | 150 mL | 120 tr/min |
| 1000 mL | 350 mL | 120 tr/min |
| 1500 mL | 400 mL | 120 tr/min |
| 2000 mL | 400 mL | 120 tr/min |
| 3000 mL | 800 mL | 90 tr/min |
| 5000 mL | 2500 mL | 90 tr/min |
Remarque : Ces données s’appliquent aux lignées cellulaires CHO Stable, CHO Transient et HEK 293 Transient.
Détails techniques supplémentaires
- 1. Matériaux et stérilité
- •Options de matériaux PETG/PC :Le PETG offre une transparence et une résistance aux chocs élevées ; le PC offre une stabilité thermique supérieure (résiste à l’autoclavage à 121 °C).
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- •Stérilisation : Irradié aux rayons gamma, emballé individuellement, certifié sans DNase/RNase, sans endotoxines et conforme aux normes USP Classe VI
- •Options de matériaux PETG/PC :Le PETG offre une transparence et une résistance aux chocs élevées ; le PC offre une stabilité thermique supérieure (résiste à l’autoclavage à 121 °C).
- 2. Avantages de la conception
- • Capuchon ergonomique : assure une manipulation sûre et une compatibilité avec les pipettes/grattoirs cellulaires
- •Modèles à chicanes disponibles : Améliore l'efficacité du mélange pour les cultures à haute densité en augmentant le transfert d'oxygène (kLa)
- • Capuchon ergonomique : assure une manipulation sûre et une compatibilité avec les pipettes/grattoirs cellulaires
- 3. Notes d'utilisation critiques
- •Éviter le surremplissage : des volumes supérieurs à 30 % peuvent réduire les échanges gazeux, entraînant une hypoxie dans les cultures aérobies.
- •Surveillance du pH et de l'oxygène : Maintenir le pH entre 7,0 et 7,4 (cellules CHO) et l'oxygène dissous (OD) supérieur à 40 % pour un métabolisme optimal.
- •Sensibilité au cisaillement : Pour les cellules sensibles au cisaillement (par exemple, les lymphocytes T primaires), utiliser des vitesses plus faibles (80 à 100 tr/min) ou des agents antimousse.
- •Éviter le surremplissage : des volumes supérieurs à 30 % peuvent réduire les échanges gazeux, entraînant une hypoxie dans les cultures aérobies.
Applications au-delà de la culture standard
- •Systèmes de perfusion : Intégration aux lignes d'alimentation pour un apport continu de nutriments, permettant d'atteindre des densités cellulaires > 20 × 10⁶ cellules/mL
- •Cultures microbiennes : Adaptées à la fermentation bactérienne/levure, avec une conception à chicanes pour une meilleure aération
- •Protocoles de mise à l'échelle : Lors du passage des flacons aux bioréacteurs, maintenir un taux de transfert d'oxygène volumétrique (kLa) constant en ajustant l'agitation et l'aération.
Date de publication : 17 août 2025