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शेकिंग इनक्यूबेटर में रखे फ्लास्क में कितना मीडियम मिलाना चाहिए?


शेकिंग इनक्यूबेटर में रखे फ्लास्क में कितना मीडियम मिलाना चाहिए?
RADOBIO के स्टेराइल सेल कल्चर एर्लेनमेयर फ्लास्क विशेष रूप से HEK 293 और CHO कोशिकाओं सहित सस्पेंशन कोशिकाओं की खेती के लिए डिज़ाइन किए गए हैं।हिलाने वाला इनक्यूबेटरइन फ्लास्कों में सपाट तल और हवादार ढक्कन होता है, जो इन्हें छोटे पैमाने पर प्रक्रिया विकास, विस्तार और बहु-चरणीय संवर्धन के लिए उपयुक्त बनाता है। हवादार ढक्कन में 0.2 μm की हाइड्रोफोबिक झिल्ली लगी होती है, जो सूक्ष्मजीवों के संदूषण और पानी के प्रवेश को रोकते हुए कुशल गैस विनिमय को सक्षम बनाती है, जिससे कोशिकाओं के विकास के लिए इष्टतम परिस्थितियाँ सुनिश्चित होती हैं।
 

मुख्य विशिष्टताएँ और उपयोग संबंधी दिशानिर्देश

  1. 1. कार्यशील मात्रा अनुकूलन
    •   पर्याप्त ऑक्सीजन स्थानांतरण सुनिश्चित करने और अपरूपण तनाव को कम करने के लिए माध्यम की मात्रा को फ्लास्क की कुल क्षमता के 20-30% पर बनाए रखना चाहिए।
       
    • • फ्लास्क पर स्पष्ट ग्रेजुएशन चिह्न सटीक मात्रा माप की अनुमति देते हैं।
       .
  2. 2. हिलाने के मापदंड
    • अनुशंसितइनक्यूबेटर शेकरकंपन की गति: 75–120 आरपीएम (प्रयोग की आवश्यकताओं के आधार पर समायोज्य)
       
    • बड़े फ्लास्कों (≥3 लीटर) के लिए, अत्यधिक द्रव अपरूपण और झाग बनने से रोकने के लिए गति को 90 आरपीएम तक कम कर दें।

CHO और HEK 293 कोशिकाओं के लिए अनुशंसित पैरामीटर

फ्लास्क का आयतन कार्यशील मात्रा कंपन गति
125 मिलीलीटर 25 मिलीलीटर 120 आरपीएम
250 मिलीलीटर 60 मिलीलीटर 120 आरपीएम
500 मिलीलीटर 150 मिलीलीटर 120 आरपीएम
1000 मिलीलीटर 350 मिलीलीटर 120 आरपीएम
1500 मिलीलीटर 400 मिलीलीटर 120 आरपीएम
2000 मिलीलीटर 400 मिलीलीटर 120 आरपीएम
3000 मिलीलीटर 800 मिलीलीटर 90 आरपीएम
5000 मिलीलीटर 2500 मिलीलीटर 90 आरपीएम

नोट: यह डेटा CHO स्टेबल, CHO ट्रांजिएंट और HEK 293 ट्रांजिएंट सेल लाइनों पर लागू होता है।


पूरक तकनीकी विवरण

  1. 1. सामग्री और रोगाणुहीनता
    • •पीईटीजी/पीसी सामग्री विकल्प:पीईटीजी उच्च पारदर्शिता और प्रभाव प्रतिरोध प्रदान करता है; पीसी बेहतर तापीय स्थिरता प्रदान करता है (121 डिग्री सेल्सियस पर ऑटोक्लेविंग का सामना कर सकता है)।
      •  
    • नसबंदी: गामा विकिरणित, व्यक्तिगत रूप से पैक किया गया, प्रमाणित डीएनएज़/आरएनएज़-मुक्त, एंडोटॉक्सिन-मुक्त, और यूएसपी क्लास VI मानकों के अनुरूप
       
  2. 2. डिज़ाइन के लाभ
    • • एर्गोनोमिक कैप: सुरक्षित संचालन और पिपेट/सेल स्क्रैपर के साथ अनुकूलता को सुगम बनाती है।
       
    • बैफल मॉडल उपलब्ध हैं: ऑक्सीजन स्थानांतरण (kLa) बढ़ाकर उच्च घनत्व वाले कल्चर के लिए मिश्रण दक्षता को बढ़ाता है।
       
  3. 3. महत्वपूर्ण उपयोग संबंधी नोट्स
    • अधिक मात्रा में भरने से बचें: 30% से अधिक मात्रा गैस विनिमय को कम कर सकती है, जिससे वायवीय संवर्धनों में हाइपोक्सिया हो सकता है।
       
    • पीएच/ऑक्सीजन की निगरानी करें: इष्टतम चयापचय के लिए पीएच को 7.0–7.4 (सीएचओ कोशिकाओं) और घुलित ऑक्सीजन (डीओ) को >40% पर बनाए रखें।
       
    • कतरन संवेदनशीलता: कतरन-संवेदनशील कोशिकाओं (जैसे, प्राथमिक टी कोशिकाएं) के लिए, कम गति (80-100 आरपीएम) या झाग-रोधी एजेंटों का उपयोग करें।

मानक खेती से परे अनुप्रयोग

  • परफ्यूजन सिस्टम: निरंतर पोषक तत्व आपूर्ति के लिए फीड लाइनों के साथ एकीकृत करें, जिससे 20 × 10⁶ कोशिकाओं/एमएल से अधिक कोशिका घनत्व प्राप्त होता है।
     
  • माइक्रोबियल कल्चर: बेहतर वायु संचार के लिए बैफल डिज़ाइन के साथ जीवाणु/यीस्ट किण्वन के लिए उपयुक्त।
     
  • स्केल-अप प्रोटोकॉल: फ्लास्क से बायोरिएक्टर में बदलते समय, एजिटेशन और एरेशन को समायोजित करके वॉल्यूमेट्रिक ऑक्सीजन ट्रांसफर दर (kLa) को स्थिर बनाए रखें।
     

पोस्ट करने का समय: 17 अगस्त 2025